研究活動情報

• 2017年03月 日本薬理学会, 年会優秀発表賞

  長坂 明臣

• Alteration of long and short-term hematopoietic stem cell ratio causes myeloid-biased hematopoiesis

  Katsuyuki Nishi, Taro Sakamaki, Akiomi Nagasaka, Kevin S Kao, Kay Sadaoka, Masahide Asano, Nobuyuki Yamamoto, Akifumi Takaori-Kondo, Masanori Miyanishi

  2025年06月


• Isolation Method for Long-Term and Short-Term Hematopoietic Stem Cells.

  Katsuyuki Nishi, Akiomi Nagasaka, Taro Sakamaki, Kay Sadaoka, Masanori Miyanishi

  Self-renewal capacity and multi-lineage differentiation potential are generally regarded as the defining characteristics of hematopoietic stem cells (HSCs). However, numerous studies have suggested that functional heterogeneity exists in the HSC compartment. Recent single-cell analyses have reported HSC clones with different cell fates within the HSC compartment, which are referred to as biased HSC clones. The mechanisms underlying heterogeneous or poorly reproducible results are little understood, especially regarding the length of self-renewal when purified HSC fractions are transplanted by conventional immunostaining. Therefore, establishing a reproducible isolation method for long-term HSCs (LT-HSCs) and short-term HSCs (ST-HSCs), defined by the length of their self-renewal, is crucial for overcoming this issue. Using unbiased multi-step screening, we identified a transcription factor, Hoxb5, which may be an exclusive marker of LT-HSCs in the mouse hematopoietic system. Based on this finding, we established a Hoxb5 reporter mouse line and successfully isolated LT-HSCs and ST-HSCs. Here we describe a detailed protocol for the isolation of LT-HSCs and ST-HSCs using the Hoxb5 reporter system. This isolation method will help researchers better understand the mechanisms of self-renewal and the biological basis for such heterogeneity in the HSC compartment.

  2023年05月, Journal of visualized experiments : JoVE, (195) (195), 英語, 国際誌

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• VGLL3 is a mechanosensitive protein that promotes cardiac fibrosis through liquid–liquid phase separation

  Yuma Horii, Shoichi Matsuda, Chikashi Toyota, Takumi Morinaga, Takeo Nakaya, Soken Tsuchiya, Masaki Ohmuraya, Takanori Hironaka, Ryo Yoshiki, Kotaro Kasai, Yuto Yamauchi, Noburo Takizawa, Akiomi Nagasaka, Akira Tanaka, Hidetaka Kosako, Michio Nakaya

  Abstract Myofibroblasts cause tissue fibrosis by producing extracellular matrix proteins, such as collagens. Humoral factors like TGF-β, and matrix stiffness are important for collagen production by myofibroblasts. However, the molecular mechanisms regulating their ability to produce collagen remain poorly characterised. Here, we show that vestigial-like family member 3 (VGLL3) is specifically expressed in myofibroblasts from mouse and human fibrotic hearts and promotes collagen production. Further, substrate stiffness triggers VGLL3 translocation into the nucleus through the integrin β1-Rho-actin pathway. In the nucleus, VGLL3 undergoes liquid-liquid phase separation via its low-complexity domain and is incorporated into non-paraspeckle NONO condensates containing EWS RNA-binding protein 1 (EWSR1). VGLL3 binds EWSR1 and suppresses miR-29b, which targets collagen mRNA. Consistently, cardiac fibrosis after myocardial infarction is significantly attenuated in Vgll3-deficient mice, with increased miR-29b expression. Overall, our results reveal an unrecognised VGLL3-mediated pathway that controls myofibroblasts’ collagen production, representing a novel therapeutic target for tissue fibrosis.

  Springer Science and Business Media LLC, 2023年02月, Nature Communications, 14(1) (1)

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• GRK5 ‐mediated inflammation and fibrosis exert cardioprotective effects during the acute phase of myocardial infarction

  Akiomi Nagasaka, Tsuyoshi Terawaki, Makoto Noda, Miyuki Takashima, Mika Fujino, Yuto Yamauchi, Shigeki Arawaka, Takeo Kato, Michio Nakaya

  Wiley, 2023年01月, FEBS Open Bio, 13(2) (2), 380 - 391

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• GPRC5B promotes collagen production in myofibroblasts

  Noburo Takizawa, Takanori Hironaka, Kyosuke Mae, Tomoyuki Ueno, Yuma Horii, Akiomi Nagasaka, Michio Nakaya

  Elsevier BV, 2021年07月, Biochemical and Biophysical Research Communications, 561, 180 - 186

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Increased Expression of Heparan Sulfate 6-O-Sulfotransferase-2 Promotes Collagen Production in Cardiac Myofibroblasts

  Kotaro Kasai, Yuma Horii, Takanori Hironaka, Kyosuke Mae, Tomoyuki Ueno, Akiomi Nagasaka, Michio Nakaya

  Pharmaceutical Society of Japan, 2021年, BPB Reports, 4(3) (3), 85 - 91

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Drebrin is induced during myofibroblast differentiation and enhances the production of fibrosis-related genes.

  Takanori Hironaka, Tomoyuki Ueno, Kyosuke Mae, Chikashi Yoshimura, Takumi Morinaga, Yuma Horii, Akiomi Nagasaka, Hitoshi Kurose, Michio Nakaya

  Fibrosis is attributed to excess deposition of extracellular matrix (ECM) proteins including collagen and is associated with various organ dysfunction. This excessive ECM is produced by myofibroblasts, which are differentiated from various cells by a variety of stimuli, represented by TGF-β. However, molecular mechanisms for the regulation of ECM production in myofibroblasts remain obscure. In this study, we demonstrate that the expression of drebrin, which binds to and increases the stability of actin filament in neurons, is increased in mouse hearts and lungs upon fibrosis. Drebrin is mainly expressed in myofibroblasts in the fibrotic hearts and lungs and promotes the expression of fibrosis-related genes, such as Acta2 and Col1a1. Taken together, our study identifies drebrin as a molecule that promotes the production of fibrosis-related genes in myofibroblasts.

  2020年08月, Biochemical and biophysical research communications, 529(2) (2), 224 - 230, 英語, 国際誌

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Efferocytosis during myocardial infarction.

  Chikashi Yoshimura, Akiomi Nagasaka, Hitoshi Kurose, Michio Nakaya

  Myocardial infarction is one of the major causes of death worldwide. Many heart cells die during myocardial infarction through various processes such as necrosis, apoptosis, necroptosis, autophagy-related cell death, pyroptosis and ferroptosis. These dead cells in infarcted hearts expose the so-called 'eat-me' signals, such as phosphatidylserine, on their surfaces, enhancing their removal by professional and non-professional phagocytes. Clearance of dead cells by phagocytes in the diseased hearts plays a crucial role in the pathology of myocardial infarction by inhibiting the inflammatory responses caused by the leakage of contents from dead cells. This review focuses on the rapidly growing understanding of the molecular mechanisms of dead cell phagocytosis, termed efferocytosis, during myocardial infarction, which contributes to the pathophysiology of myocardial infarction.

  2020年07月, Journal of biochemistry, 168(1) (1), 1 - 6, 英語, 国際誌

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Leukotriene B4 receptor 1 exacerbates inflammation following myocardial infarction.

  Yuma Horii, Michio Nakaya, Hiroki Ohara, Hiroaki Nishihara, Kenji Watari, Akiomi Nagasaka, Takeo Nakaya, Yuki Sugiura, Toshiaki Okuno, Tomoaki Koga, Akira Tanaka, Takehiko Yokomizo, Hitoshi Kurose

  Leukotriene B4 receptor 1 (BLT1), a high-affinity G-protein-coupled receptor for leukotriene B4 (LTB4 ), is expressed on various inflammatory cells and plays critical roles in several inflammatory diseases. In myocardial infarction (MI), various inflammatory cells are known to be recruited to the infarcted area, but the function of BLT1 in MI is poorly understood. Here, we investigated the role of BLT1 in MI and the therapeutic effect of a BLT1 antagonist, ONO-4057, on MI. Mice with infarcted hearts showed increased BLT1 expression and LTB4 levels. BLT1-knockout mice with infarcted hearts exhibited attenuated leukocyte infiltration, proinflammatory cytokine production, and cell death, which led to reduced mortality and improved cardiac function after MI. Bone-marrow transplantation studies showed that BLT1 expressed on bone marrow-derived cells was responsible for the exacerbation of inflammation in infarcted hearts. Furthermore, ONO-4057 administration attenuated the inflammatory responses in hearts surgically treated for MI, which resulted in reduced mortality and improved cardiac function after MI. Our study demonstrated that BLT1 contributes to excessive inflammation after MI and could represent a new therapeutic target for MI.

  2020年05月, FASEB journal : official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology, 34(6) (6), 8749 - 8763, 英語, 国際誌

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• An Assay to Determine Phagocytosis of Apoptotic Cells by Cardiac Macrophages and Cardiac Myofibroblasts

  Horii Y, Matsuda S, Watari K, Nagasaka A, Kurose H, Nakaya M

  2017年09月, bio-protocol, 7(18) (18)

  [査読有り]


• Phagocytosis Assay of Necroptotic Cells by Cardiac Myofibroblasts

  Horii Y, Matsuda S, Watari K, Nagasaka A, Kurose H, Nakaya M

  2017年09月, bio-protocol, 7(18) (18), 英語

  [査読有り]


• The proton-sensing G protein-coupled receptor T-cell deathassociated gene 8 (TDAG8) shows cardioprotective effects against myocardial infarction

  Akiomi Nagasaka, Chihiro Mogi, Hiroki Ono, Toshihide Nishi, Yuma Horii, Yuki Ohba, Koichi Sato, Michio Nakaya, Fumikazu Okajima, Hitoshi Kurose

  2017年08月, SCIENTIFIC REPORTS, 7(1) (1), 7812, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Cardiac myofibroblast engulfment of dead cells facilitates recovery after myocardial infarction

  Michio Nakaya, Kenji Watari, Mitsuru Tajima, Takeo Nakaya, Shoichi Matsuda, Hiroki Ohara, Hiroaki Nishihara, Hiroshi Yamaguchi, Akiko Hashimoto, Mitsuho Nishida, Akiomi Nagasaka, Yuma Horii, Hiroki Ono, Gentaro Iribe, Ryuji Inoue, Makoto Tsuda, Kazuhide Inoue, Akira Tanaka, Masahiko Kuroda, Shigekazu Nagata, Hitoshi Kurose

  2017年01月, JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION, 127(1) (1), 383 - 401, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• GRK6 phosphorylates IκBα at Ser(32)/Ser(36) and enhances TNF-α-induced inflammation.

  Ohba Y, Nakaya M, Watari K, Nagasaka A, Kurose H

  2015年05月, Biochemical and biophysical research communications, 461(2) (2), 307 - 313, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Novel functions of GRK6 in macrophages by phosphorylating the non-GPCRs substrates

  Akiomi Nagasaka, Yuki Ohba, Hitoshi Kurose, Michio Nakaya

  2015年, Macrophages, (2) (2)

  [査読有り][招待有り]


• Apaf-1-independent programmed cell death in mouse development

  A. Nagasaka, K. Kawane, H. Yoshida, S. Nagata

  2010年06月, CELL DEATH AND DIFFERENTIATION, 17(6) (6), 931 - 941, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Degradation of nuclear DNA by DNase II-like acid DNase in cortical fiber cells of mouse eye lens

  Masaki Nakahara, Akiomi Nagasaka, Masato Koike, Kaori Uchida, Kohki Kawane, Yasuo Uchiyama, Shigekazu Nagata

  2007年07月, FEBS JOURNAL, 274(12) (12), 3055 - 3064, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）

• 免疫不全マウスモデルにおけるLineage特異的なin vivo細胞分化法に関する基礎的検討

  長坂明臣, 酒巻太郎, 宮西正憲

  2025年, 日本再生医療学会総会(Web), 24th


• 多層性解析によるヒト造血幹細胞単離法の最適化

  宮西正憲, 宮西正憲, 長坂明臣, 酒巻太郎, 西克幸, 塚本成幸, 定岡恵, 山本暢之, 井上翔太郎, MY An Le

  2024年, 日本再生医療学会総会(Web), 23rd


• マクロファージにおけるpH感知性GPCRの生理的役割

  長坂 明臣, 黒瀬 等

  2018年10月, アグリバイオ, 2(11) (11), 79 - 83


• マクロファージにおけるpH低下の生理的意義

  長坂 明臣, 黒瀬 等

  (株)ニュー・サイエンス社, 2018年07月, Medical Science Digest, 44(8) (8), 405 - 409, 日本語

  記事・総説・解説・論説等（学術雑誌）

• 免疫不全マウスモデルにおけるLineage特異的なin vivo細胞分化法に関する基礎的検討

  長坂 明臣, 酒巻 太郎, 宮西正憲

  第24回日本再生医療学会総会, 2025年03月


• The roles of T-cell death-associated gene 8 (TDAG8), a proton-sensing GPCR, in myocardial infarction

  長坂明臣

  Translational Research on Metabolic and Inflammatory Diseases and Cancer Date, 2019年12月, 英語

  口頭発表（一般）


• プロトン感知性受容体(TDAG8)に着目した心筋梗塞時におけるpH低下の生理的影響の解析

  長坂 明臣, 小野達貴, 仲矢 道雄, 黒瀬 等

  次世代を担う創薬・医療薬理シンポジウム2017, 2017年08月, 日本語


• 心筋梗塞時におけるプロトン感知性受容体TDAG8の役割解析

  長坂 明臣, 小野 達貴, 仲矢 道雄, 黒瀬 等

  第90回 日本薬理学会年会, 2017年03月


• DNase II欠損マウスを用いたマウスの発生段階におけるアポトーシス細胞の検出

  長坂 明臣, 川根 公樹, 長田 重一

  日本分子生物学会, 2008年12月, 日本語

• 日本分子生物学会


• 日本薬理学会


• 日本薬学会


• 日本組織培養学会


• 日本再生医療学会

• 血管内皮細胞障害を改善する新規機能分子の取得

  長坂 明臣

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(C), 国立研究開発法人理化学研究所, 2022年04月01日 - 2025年03月31日


• 心肥大の退縮を担う分子の探索とその分子メカニズムの解明

  長坂 明臣

  文部科学省, 科学研究費補助金（基盤研究（C））, 2019年04月 - 2022年03月, 研究代表者

  競争的資金


• 心筋梗塞後の線維化における筋線維芽細胞と各種細胞の役割および相互作用の解明

  黒瀬 等, 長坂 明臣, 仲矢 道雄

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(A), 九州大学, 2017年04月01日 - 2021年03月31日

  心筋梗塞などで生じる組織の欠落は筋線維芽細胞により産生されるコラーゲンによって補てんされる。しかし、コラーゲンの過剰な蓄積は線維化とよばれ治療の対象である。心筋梗塞時には組織の壊死が起こるため炎症も生じる。炎症の進行と線維化（筋線維芽細胞の出現）が並行して起こるため、炎症の解析も線維化の理解に重要であると考えられている。さらに、炎症時にはプロトン濃度が上昇することが知られているにも関わらず解析されてこなかった。本研究では、炎症時の白血球浸潤の重要性、プロトン濃度の上昇によって活性化されるpH感知性受容体の役割や細胞内シグナルなどについて解析し、線維化との関連を示した。


• 腫瘍関連マクロファージにおけるプロトン感知性受容体の生理的役割解析

  長坂 明臣

  文部科学省, 科学研究費補助金（若手研究（B））, 2017年04月 - 2018年03月, 研究代表者

  競争的資金


• 心臓線維化に関わる細胞群の機能分担と細胞環境の役割解析

  黒瀬 等, 仲矢 道雄, 長坂 明臣

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(A), 九州大学, 2013年10月21日 - 2017年03月31日

  心筋梗塞後、早期に血流が再開されない場合、心臓はポンプ機能の低下した心不全へと移行する。心不全への移行を促進する応答の一つが炎症である。梗塞部に生じる死細胞は炎症を引き起こすことから、死細胞の効率的な除去は心筋梗塞後の病態を改善させるため必要である。これまで、死細胞の除去はマクロファージなどの貪食細胞によって行われると考えられてきた。本研究では、梗塞後に出現する筋線維芽細胞が、アポトーシス細胞の貪食を仲介する分子（MFG-E8）に依存して死細胞を除去することを示した。筋線維芽細胞が死細胞を除去することで、心筋梗塞後の炎症に抑制的に働いていることが明らかになった。


• 心筋梗塞におけるプロトン感知性受容体「GPR4」の生理的役割の解析

  長坂 明臣

  文部科学省, 科学研究費補助金（若手研究（B)）, 2014年04月 - 2016年03月, 研究代表者

  競争的資金