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梶本 武利大学院医学系研究科 医科学専攻助教
研究活動情報
■ 受賞■ 論文
- Springer Science and Business Media LLC, 2025年02月, Nature Cell Biology, 27(3) (3), 530 - 543[査読有り]
- Elsevier BV, 2024年12月, European Journal of Pharmacology, 984, 177036 - 177036[査読有り]
- Springer Science and Business Media LLC, 2024年09月, Communications Biology, 7(1) (1)[査読有り]
- Abstract α‐Synuclein (α‐Syn)‐positive intracellular fibrillar protein deposits, known as Lewy bodies, are thought to be involved in the pathogenesis of Parkinson's disease (PD). Although recent lines of evidence suggested that extracellular α‐Syn secreted from pathogenic neurons contributes to the propagation of PD pathology, the precise mechanism of action remains unclear. We have reported that extracellular α‐Syn caused sphingosine 1‐phosphate (S1P) receptor type 1 (S1PR1) uncoupled from Gi and inhibited downstream G‐protein signaling in SH‐SY5Y cells, although its patho/physiological role remains to be clarified. Here we show that extracellular α‐Syn caused S1P receptor type 3 (S1PR3) uncoupled from G protein in HeLa cells. Further studies indicated that α‐Syn treatment reduced cathepsin D activity while enhancing the secretion of immature pro‐cathepsin D into cell culture medium, suggesting that lysosomal delivery of cathepsin D was disturbed. Actually, extracellular α‐Syn attenuated the retrograde trafficking of insulin‐like growth factor‐II/mannose 6‐phosphate (IGF‐II/M6P) receptor, which is under the regulation of S1PR3. These findings shed light on the understanding of dissemination of the PD pathology, that is, the mechanism underlying how extracellular α‐Syn secreted from pathogenic cells causes lysosomal dysfunction of the neighboring healthy cells, leading to propagation of the disease.Wiley, 2024年01月, Genes to Cells, 29(3) (3), 207 - 216[査読有り]
- Background and purpose: In this study, we aimed to elucidate the action mechanisms of propofol, particularly those underlying propofol-induced protein kinase C (PKC) translocation. Experimental approach: Various PKCs fused with green fluorescent protein (PKC-GFP) or other GFP-fused proteins were expressed in HeLa cells, and their propofol-induced dynamics were observed using confocal laser scanning microscopy. Propofol-induced PKC activation in cells was estimated using the C kinase activity receptor (CKAR), an indicator of intracellular PKC activation. We also examined PKC translocation using isomers and derivatives of propofol to identify the crucial structural motifs involved in this process. Key results: Propofol persistently translocated PKCα conventional PKCs and PKCδ from novel PKCs (nPKCs) to the plasma membrane (PM). Propofol translocated PKCδ and PKCη of nPKCs to the Golgi apparatus and endoplasmic reticulum, respectively. Propofol also induced the nuclear translocation of PKCζ of atypical PKCs or proteins other than PKCs, such that the protein concentration inside and outside the nucleus became uniform. CKAR analysis revealed that propofol activated PKC in the PM and Golgi apparatus. Moreover, tests using isomers and derivatives of propofol predicted that the structural motifs important for the induction of PKC and nuclear translocation are different. Conclusion and implications: Propofol induced the subtype-specific intracellular translocation of PKCs and activated PKCs. Additionally, propofol induced the nuclear translocation of PKCs and other proteins, probably by altering the permeability of the nuclear envelope. Interestingly, propofol-induced PKC and nuclear translocation may occur via different mechanisms. Our findings provide insights into the action mechanisms of propofol.Frontiers Media SA, 2023年11月, Frontiers in Pharmacology, 14[査読有り]
- Elsevier BV, 2023年09月, European Journal of Pharmacology, 955, 175806 - 175806[査読有り]
- Elsevier BV, 2021年11月, iScience, 24(11) (11), 103351 - 103351[査読有り]
- 2020年10月, Kobe Journal of Medical Sciences, 66(3) (3), E94 - E101Involvement of Receptor-Mediated S1P Signaling in EGF-Induced Macropinocytosis in COS7 Cells.[査読有り]
- 2019年03月, Nature Cell Biology, 21(3) (3), 359 - 371[査読有り]
- 2019年01月, Science Signaling, 12(562) (562)[査読有り]
- 2018年12月, Bio-protocol, 8(24) (24), 3111Quantitative Analysis of Cargo Density in Single-extracellular Vesicles by Imaging.[査読有り]
- 2018年05月, Journal of Biological Chemistry, 293(21) (21), 8208 - 8216[査読有り]
- 2018年05月, Kobe Journal of Medical Sciences, 63(4) (4), E123 - E129Essential Role of Sphingosine Kinase 2 in the Regulation of Cargo Contents in the Exosomes from K562 Cells.[査読有り]
- 2018年01月, Journal of Biological Chemistry, 293(1) (1), 245 - 253[査読有り]
- 2017年11月, Scientific Reports, 7(1) (1), 16552, 英語[査読有り]
- 2017年05月, Kobe Journal of Medical Sciences, 62(6) (6), E162 - E167Phospholipase D is Dispensable for Epidermal Growth Factor-Induced Chemotaxis.[査読有り]
- 2017年03月, Scientific Reports, 7, 44248, 英語[査読有り]
- 2016年11月, Scientific Reports, 6, 37810, 英語[査読有り]
- 2013年12月, Nature Methods, 10(12) (12), 1232 - 1238[査読有り]
- 2013年, Nature Communications, 4, 2712[査読有り]
- 2010年12月, Neuroscience, 171(4) (4), 973 - 980[査読有り]
- 2010年12月, Journal of Biological Chemistry, 285(53) (53), 41896 - 41910[査読有り]
- 2009年09月, Journal of Biological Chemistry, 284(36) (36), 24653 - 24661[査読有り]
- 2007年09月, Journal of Biological Chemistry, 282(37) (37), 27493 - 27502[査読有り]
- 2007年05月, Molecular and Cellular Biology, 27(9) (9), 3429 - 3440[査読有り]
- 2005年10月, Journal of Biological Chemistry, 280(43) (43), 36318 - 36325[査読有り]
- 2005年05月, Journal of Neurochemistry, 93(4) (4), 883 - 891[査読有り]
- 2004年10月, Genes to Cells, 9(10) (10), 945 - 957[査読有り]
- 2004年03月, Journal of Biological Chemistry, 279(13) (13), 12668 - 12676[査読有り]
- 2002年11月, Biochemical and Biophysical Research Communications, 298(5) (5), 738 - 743Subtype- and species-specific knockdown of PKC using short interfering RNA.[査読有り]
- 2001年03月, Molecular and Cellular Biology, 21(5) (5), 1769 - 1783[査読有り]
- 2020年08月, Clinical Neuroscience, 38【分子から迫る神経薬理学(91回)】スフィンゴシン1—リン酸受容体の中枢神経系における機能と病態
- 2015年01月, 細胞工学, 34(2号) (2号), 168 - 173, 日本語【エンドソームの多彩な機能:細胞内分子輸送の新ルートマップ公開】 エキソソームの形成機構記事・総説・解説・論説等(商業誌、新聞、ウェブメディア)
- (有)科学評論社, 2012年05月, 臨床免疫・アレルギー科, 57(Suppl.21) (Suppl.21), 265 - 275, 日本語【サイトカインのすべて(完全改訂版)】 サイトカインの種類 ケモカイン CXCL2
- 2011年04月, トランスポートソームの世界, 318 - 326TRPトランスポートソームと生理機能
- 2011年, TRANSIENT RECEPTOR POTENTIAL CHANNELS, 704, 373 - 389, 英語[査読有り]
- (株)メディカルレビュー社, 2010年01月, 鼻アレルギーフロンティア, 10(1) (1), 34 - 40, 日本語アレルギー性鼻炎のプレーヤーたち(第16回) 免疫機能とTRPチャネル
- 2009年01月, Cellular signalling, 21(1) (1), 7 - 13[査読有り]
- 2003年12月25日, 日本神経精神薬理学雑誌 = Japanese journal of psychopharmacology, 23(6) (6)脳部位特異的Tet制御γPKC-GFP発現トランスジェニックマウスを用いたγPKCの in vivo ライブイメージング
- (株)中山書店, 2003年12月, Molecular Medicine, 41(1) (1), 86 - 94, 日本語【RNAi医工学 医学が手に入れた夢のツールの使い方】 RNAi法を用いたサブタイプ特異的・動物種特異的PKCノックダウンと機能解析への応用
- 第97回日本薬理学会年会, 2023年12月S1P-aPKCシグナルが制御するアポトーシス抵抗性の新たな分子メカニズム
- The 41st Sapporo International CancerSymposium, 2023年10月A novel molecular mechanism of evasion of apoptotic cell death regulated by S1P-atypical PKC signaling
- 第93回日本生化学会大会(シンポジウム:プロテインキナーゼシグナリング研究の新たな挑戦), 2020年09月34. プロテインキナーゼC活性イメージングが明らかにするアポトーシス抵抗性の新たな分子メカニズム
- Kobe University-UC San Diego Joint Symposium on Life Science, Computational Science, and Structural Engineering, 2019年11月New departure in the research of protein kinase C signaling with a combination of live-cell imaging of kinase activity and in silico docking simulation
- 第92回日本生化学会大会(シンポジウム:新たなシグナル検出法・アプローチに基づくリン酸化シグナル研究の新展開), 2019年09月キナーゼ活性イメージングとドッキングシミュレーションの融合によるPKCシグナリング研究の新たな展開
- 第60回日本組織細胞化学会総会・学術集会, 2019年09月新規プロテインキナーゼC活性化レポーターにより明らかとなるアポトーシス回避の分子メカニズム
- 第71回日本細胞生物学会大会, 2019年06月非典型プロテインキナーゼCのスフィンゴシン-1リン酸による新規活性化メカニズム
- 第41回日本分子生物学会年会, 2018年11月, 日本語, 国内会議Novel Activation Mechanism of Atypical Protein Kinase C Revealed by Atypical Protein Kinase C-Specific Activity Reporterポスター発表
- 第91回日本生化学会大会, 2018年09月, 日本語, 国内会議エクソソームへの積荷ソーティングにおける三量体Gタンパク質βγサブユニットシグナリングの役割口頭発表(一般)
- 第133回日本薬理学会近畿部会, 2018年06月, 日本語, 国際会議エクソソームへの積荷ソーティングにおけるRhoファミリー低分子量Gタンパク質の役割口頭発表(一般)
- Experimental Biology 2018 (ASBMB Annual Meeting 2018), 2018年04月, 英語, 国際会議Atypical Protein Kinase C-specific Activity Reporter Reveals Novel Activation Mechanism of Atypical Protein Kinase C by Sphingosine 1-phosphateポスター発表
- Kobe University-UC San Diego 3rd Collaborative Symposium, Lipid Enzymes Role in Cancer and Degenerative Diseases, 2018年01月, 英語, San Diego, USA, 国際会議Regulation of protein kinase C by sphingolipids and its role in apoptosis[招待有り]口頭発表(招待・特別)
- ASCB Annual Meeting 2015, 2015年12月, 英語, 国際会議Sphingosine 1-phosphate signaling on multivesicular endosome triggers sorting of protein cargo into exosomesポスター発表
- University of Washington-Kobe University Symposium on Cell Signaling, 2015年09月, 英語, Seattle, USA, 国際会議Role of S1P signaling on cargo loading for exosome maturation[招待有り]口頭発表(招待・特別)
- 神戸大学・ワシントン大学国際合同シンポジウム, 2014年12月, 英語, 神戸, 国内会議Sphingosine 1-phosphate signaling triggers exosomal protein sortingポスター発表
- 第87回日本生化学会大会, 2014年10月, 日本語, 京都, 国内会議S1P受容体の継続的な活性化はエクソソーム系多胞体エンドソームの成熟を調節する口頭発表(一般)
- 第49回日本小児腎臓病学会学術集会, 2014年06月, 日本語, 秋田, 国内会議フィブロネクチン腎症(FN)におけるFN1遺伝子変異の同定およびその機能解析に関する研究口頭発表(一般)
- 第66回日本細胞生物学会大会, 2014年06月, 日本語, 奈良, 国内会議スフィンゴシン1-リン酸シグナリングによるエクソソームへの積み荷ソーティング機構ポスター発表
- 第125回日本薬理学会近畿部会, 2014年06月, 日本語, 岡山, 国内会議エクソソームへの積み荷ソーティングにおける生理活性物質スフィンゴシン1-リン酸の役割口頭発表(一般)
- ASBMB Annual Meeting 2014, 2014年04月, 英語, San Diego, USA, 国際会議Sphingosine 1-phosphate signaling regulates exosomal cargo sortingポスター発表
- 第3回東京バイオマーカー・イノベーション技術研究組合研究交流フォーラム, 2014年02月, 日本語, 東京, 国内会議エクソソーム含有癌転移マーカーを指標とした癌遠隔転移リスク早期診断法の開発口頭発表(招待・特別)
- 第36回日本分子生物学会年会, 2013年12月, 日本語, 神戸, 国内会議Critical role of sphingosine 1-phosphate in exosome biogenesisポスター発表
- 第8回スフィンゴテラピィ研究会, 2013年07月, 日本語, 加賀, 国内会議S1Pシグナルによるmultivesicular body成熟の調節口頭発表(一般)
- 第90回日本生理学会大会, 2013年03月, 日本語, 国内会議活性酸素種感受性TRPM2チャネルは腫瘍の増悪に働く
- 第118回日本薬理学会近畿部会, 2010年11月, 日本語, 国内会議δ分子種選択的PKC活性化レポーターを用いたPKCδの細胞内局所における活性化制御機構の解析口頭発表(一般)
- 第114回日本薬理学会近畿部会, 2008年11月, 英語, 国内会議FRET法を用いたPKCδ選択的な活性可視化レポーターの開発とPKCδ活性のライブセルイメージング口頭発表(一般)
- 第49回日本脂質生化学会, 2007年06月, 日本語, 札幌, 国内会議Involvement of sphingosine-1-phosphate in glutamate secretion in hippocampal neurons口頭発表(一般)
- ASBMB Annual Meeting 2004, 2004年05月, 英語, 国際会議Ceramide-induced apoptosis by targeting mechanism of protein kinase Cδポスター発表
- Conference on Lipid Messenger Signaling, 2004年01月, 英語, 国際会議Ceramide-induced apoptosis by targeting of protein kinase Cδ
- 31st Annual Meeting , Society for Neuroscience, 2002年11月, 英語, 国際会議Analysis of the responsible domain for the lipid messenger-specific and subtype-specific translocation of protein kinase C
- 31st Annual Meeting , Society for Neuroscience, 2002年11月, 英語, 国際会議Development of brain region specific and tet-regulated PKC-GFP transgenic mice as a tool for analyzing PKC functions in central nervous system
- 第75回日本生化学会大会, 2002年10月, 日本語, 国内会議セラミドによるδPKCターゲティング依存的なアポトーシス誘導機構の解析
- 第101回日本薬理学会近畿部会, 2002年06月, 日本語, 国内会議セラミドによるアポトーシス誘導過程におけるδPKCの役割 -チロシンリン酸化による活性制御機構-口頭発表(一般)
- 第44回日本神経化学会大会, 2001年09月, 日本語, 国内会議Tet制御システムを用いたGFP融合タンパク質の部位・時期特異的発現動物
- 第97回日本薬理学会近畿部会, 2000年06月, 日本語, 国内会議IFN-γ受容体刺激によるPKCサブタイプ特異的トランスロケーション -セラミドを介したターゲティング機構-口頭発表(一般)
- International Symposium on Neuronal Signaling and Protein Phosphorylation-Dephosphorylation, 2000年06月, 英語, 国際会議Ceramide-induced translocation of PKC and its involvement in the interferon signaling pathway
■ 共同研究・競争的資金等の研究課題
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(C), 神戸大学, 2023年04月 - 2026年03月がん早期治療の創出に向けたプロテインキナーゼCによる新たながん化メカニズムの解明本研究は、(1)前がん細胞の細胞死回避におけるS1P-aPKCシグナリングの役割およびがん化過程との関連を明らかにし、さらに(2)細胞のがん化におけるS1P-aPKCシグナリングの働きの詳細としてS1P-aPKCの下流シグナルを分子レベルで明らかにすることを目的としている。 2023年度は、「前がん細胞の細胞死回避におけるS1P-aPKCシグナリングの役割の解明」および「機械学習を用いたaPKCのリン酸化基質候補スクリーニングシステムの開発」に取り組んだ。「前がん細胞の細胞死回避におけるS1P-aPKCシグナリングの役割の解明」では、申請者が過去に開発したaPKC活性化レポーターをがんオルガノイドに発現させるためのレンチウイルスベクターの作製を行った。さらにaPKC活性化レポーターレンチウイルスベクターを癌細胞株に感染させてaPKC活性化レポーターの安定発現株を作製し、FRET蛍光イメージング顕微鏡システムを用いてaPKC活性化のリアルタイムイメージングを行い、作製したaPKC活性化レポーターレンチウイルスベクターが正しく動作することを確認した。また、「機械学習を用いたaPKCのリン酸化基質候補スクリーニングシステムの開発」では、aPKCの基質候補をスクリーニング予測するin silico解析システムの開発として、まず各種リン酸化酵素と基質配列を対応させたリン酸化酵素-基質データベースを構築し、次にPython言語を用いて構築したデータベースを教師データとする機械学習分類器を作成した。さらに、作成した機械学習分類器の性能テストとして、未知の基質配列に対するaPKCのリン酸化能評価を行い、有望な結果を得た。
- 文部科学省 (JST) /, 共創の場形成支援プログラム(COI-NEXT)スタートアップ創出/成長の促進支援, 2022年04月 - 2025年03月, 研究代表者シングルナノ⼩胞イメージングの前がん病変診断への応⽤と事業化
- 文部科学省 (JST) /, 研究成果最適展開支援プログラム A-STEP(トライアウト), 2021年, 研究代表者環境中ウイルスの高感度マルチ計測技術の開発
- 公益財団法人ひょうご科学技術協会 /, 学術研究助成, 2021年, 研究代表者S1Pシグナルによるエンベロープウイルス形成機構の解明と創薬シーズの創出
- 文部科学省 (JSPS) /, 学術研究助成基金助成金 基盤研究(C), 2020年, 研究代表者プロテインキナーゼCシグナリングによるがん細胞の細胞死回避機構の解明
- 文部科学省 (JSPS) /, 学術研究助成基金助成金 基盤研究(C), 2017年, 研究代表者競争的資金
- 公益財団法人中谷医工計測技術振興財団 /, 開発研究助成, 2016年, 研究代表者癌の転移リスクを超早期に診断するための 高精度エクソソームマーカー検出法の開発研究競争的資金
- 文部科学省 (JSPS) /, 学術研究助成基金助成金 国際共同研究加速基金(国際共同研究強化), 2016年, 研究代表者競争的資金
- 公益財団法人ひょうご科学技術協会 /, 学術研究助成, 2014年, 研究代表者癌転移抑制剤の開発に向けたスフィンゴシンキナーゼ2の立体構造の解明競争的資金
- 公益財団法人大阪難病研究財団 /, 医学研究助成, 2014年, 研究代表者神経変性疾患におけるスフィンゴシン1-リン酸の果たす役割の解明競争的資金
- グラクソ・スミスクライン /, 研究助成(GSK Japan Research Grant), 2014年, 研究代表者パーキンソン病のエクソソームによる発症・増悪メカニズムの解明競争的資金
- 文部科学省 (JST) /, 研究成果最適展開支援プログラム (フィージビリティスタディ(FS)ステージ 探索タイプ), 2014年, 研究代表者癌遠隔転移リスクの非侵襲的な超早期診断技術の開発競争的資金
- 文部科学省 (JSPS) /, 学術研究助成基金助成金 基盤研究(C), 2014年, 研究代表者競争的資金
- 公益財団法人大阪難病研究財団 /, 医学研究助成, 2013年, 研究代表者スフィンゴシン1-リン酸を介する多発性硬化症発症機序の解明競争的資金
- 文部科学省 (JST) /, 研究成果最適展開支援プログラム(フィージビリティスタディ(FS)ステージ 探索タイプ), 2012年, 研究代表者スフィンゴシン-1-リン酸の非侵襲的生体イメージング法の開発競争的資金
- 文部科学省 (JSPS) /, 学術研究助成基金助成金 若手研究(B), 2011年, 研究代表者競争的資金
- 文部科学省 (JSPS) /, 特別研究員奨励費, 2004年, 研究代表者細胞死における細胞内情報伝達分子のターゲティング機構の解明と薬物開発への応用競争的資金
