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内田 和久大学院科学技術イノベーション研究科 科学技術イノベーション専攻教授
研究者基本情報
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研究活動情報
■ 論文- 2025年05月, Human Gene Therapy研究論文(学術雑誌)
- 2024年02月, Human Gene Therapy研究論文(学術雑誌)
- 2024年02月, Biologicals研究論文(学術雑誌)
- Adeno-associated virus (AAV) vectors are produced as a mixture of the desired particle (full particle, FP), which is filled with the designed DNA, product-related impurities such as particle without DNA (empty particle, EP), and aggregates. Cesium chloride or iodixanol equilibrium density gradient ultracentrifugation (DGE-UC) has been used for the purification of AAV vectors. DGE-UC can separate FP from impurities based on the difference in their buoyant densities. Here, we report the applications and limitations of equilibrium density gradient analytical ultracentrifugation (DGE-AUC) using a modern AUC instrument that employs DGE-UC principles for the characterization and quantitation of AAV vectors. We evaluated the quantitative ability of DGE-AUC in comparison with sedimentation velocity AUC (SV-AUC) or band sedimentation AUC (BS-AUC) using AAVs with different DNA lengths and different serotypes. DGE-AUC enabled the accurate quantification of the ratio of FP to EP when the AAV vector primarily contains these particles. Furthermore, we developed a new workflow to identify the components of separated peaks in addition to FP and EP. Ultraviolet absorption spectra obtained by multiwavelength detection can also support peak assignment following component identification. DGE-AUC experiments for AAV vectors have limitations with regard to minor components with low absorption at the detected wavelength or those with a density similar to that of major components of AAV vectors. DGE-AUC is the only analytical method that can evaluate particle density heterogeneity; therefore, SV-AUC or BS-AUC and DGE-AUC are complementary methods for reliable assessment of the purity of AAV vectors.2024年01月, Analytical chemistry, 英語, 国際誌[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2024年01月, Engineering Reports研究論文(学術雑誌)
- Wiley, 2023年06月, Engineering Reports, 英語研究論文(学術雑誌)
- 2023年06月, Human Gene Therapy研究論文(学術雑誌)
- Mary Ann Liebert Inc, 2023年06月, Human Gene Therapy, 34(11-12) (11-12), 578 - 585, 英語研究論文(学術雑誌)
- {AMED} {iD}3 Catalyst Unit, 2023年, Translational and Regulatory Sciences, 英語研究論文(学術雑誌)
- Pharmaceutical Society of Japan, 2022年07月, YAKUGAKU ZASSHI, 142(7) (7), 749 - 753, 英語研究論文(学術雑誌)
- 2021年, Biologicals, 71研究論文(学術雑誌)
- {AMED} {iD}3 Catalyst Unit, 2020年, Translational and Regulatory Sciences, 2(3) (3), 94 - 99, 英語研究論文(学術雑誌)
- 2020年, Scientific Reports, 10(1) (1)研究論文(学術雑誌)
- 2009年, Biological and Pharmaceutical Bulletin, 32(9) (9)研究論文(学術雑誌)
- 2006年, Biochimica et Biophysica Acta - General Subjects, 1760(4) (4)研究論文(学術雑誌)
- 2006年, Journal of Biochemistry, 140(6) (6)研究論文(学術雑誌)
- 2005年, Journal of Immunological Methods, 306(1-2) (1-2)研究論文(学術雑誌)
- 2005年, Journal of Immunological Methods, 306(1-2) (1-2)研究論文(学術雑誌)
- 2004年, Biotechnology and Bioengineering, 87(5) (5)研究論文(学術雑誌)
- 2004年, Biotechnology and Bioengineering, 88(7) (7)研究論文(学術雑誌)
- 2004年, Journal of Molecular Biology, 336(5) (5)研究論文(学術雑誌)
- 2003年, Journal of Biological Chemistry, 278(5) (5)研究論文(学術雑誌)
- 1996年, Journal of Chromatography A, 730(1-2) (1-2)研究論文(学術雑誌)
- 1995年, Acta Histochemica et Cytochemica, 28(5) (5)研究論文(学術雑誌)
- 1993年, International Journal of Systematic Bacteriology, 43(1) (1)研究論文(学術雑誌)
- 1991年, Journal of Chromatography A, 588(1-2) (1-2)研究論文(学術雑誌)
- 1991年, Biochemical and Biophysical Research Communications, 177(3) (3)研究論文(学術雑誌)
- バイオ医薬品の製造・開発と規制上の課題バイオ医薬品の製造・開発と規制上の課題の列挙と解決法の提示レギュラトリーサイエンス学会, 2017年05月, レギュラトリーサイエンス学会誌, 7(2) (2), 121 - 129, 日本語[査読有り]記事・総説・解説・論説等(学術雑誌)
