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原山 洋大学院農学研究科 資源生命科学専攻教授
研究者基本情報
■ 学位■ 研究キーワード
■ 研究分野
■ 委員歴
- - 現在, 精子研究会関西地区, 世話人
- - 現在, 関西アンドロロジーカンファレンス, 世話人
- - 現在, 関西生殖医学集談会, 世話人
- - 現在, Animal Science Journal, Section Editor of Reproduction/Embryo Manipulation (繁殖・胚操作部門 分野別統括編集委員)
- - 現在, Journal of Reproduction and Development, Editor-in-Chief (編集委員長）
- - 現在, 日本アンドロロジー学会, 理事
- - 現在, （公社）日本繁殖生物学会, 常務理事
- - 2025年06月, 日本アンドロロジー学会第44回学術大会 (2025年6月開催), 大会長
- - 2024年09月, 関西畜産学会, 評議員
- - 2024年06月, Reproductive Medicine and Biology, Editor (編集委員)
- - 2023年09月, 第116回日本繁殖生物学会大会・神戸大会 (2023年9月開催), 大会長
研究活動情報
■ 受賞- 2024年09月 Japanese Society of Animal Science, The 2024 Award for Excellence in Reviewing for Animal Science Journal in 2023, Animal Science Journal Reviewers Award
- 2021年04月 Japanese Society of Animal Science, The 2021 Award for Excellence in Reviewing for Animal Science Journal in 2020, Animal Science Journal Reviewers Award
- 2019年03月 Japanese Society of Animal Science, The 2019 Award for Excellence in Reviewing for Animal Science Journal in 2018, Animal Science Journal Reviewers Award日本国学会誌・学術雑誌による顕彰
- 2017年07月 日本学術振興会, 日本学術振興会（JSPS）平成28年度 特別研究員等審査会専門委員（書面担当）の表彰, 日本学術振興会（JSPS）平成28年度 特別研究員等審査会専門委員（書面担当）の表彰書面審査における有意義な審査意見を付した 専門委員として選ばれたため。, 日本国その他の賞
- 2012年09月 日本繁殖生物学会, 2012年度日本繁殖生物学会賞・学術賞, 哺乳類精子の細胞内cAMPシグナル伝達機構に関する研究繁殖生物学に関する基盤研究、応用研究等に顕著な功績があった。, 日本国国内学会・会議・シンポジウム等の賞
- 2006年08月 関西畜産学会, 第56回関西畜産学会優秀発表賞（第1位）, ブタ精子の頭部におけるcAMP依存性細胞内カルシウム濃度上昇に及ぼす炭酸水素ナトリウムおよびPKA阻害剤の影響日本国国内学会・会議・シンポジウム等の賞
- 2006年04月 American Society of Andrology, 2006 Lalor Foundation Award, Role of protein kinase C in the cyclic adenosine 3',5'-monophosphate-dependent hyperactivation of boar spermatozoaアメリカ合衆国国際学会・会議・シンポジウム等の賞
- 2026年, Journal of Reproduction and Development, 72(2) (2), 55 - 64, 英語Large cyclic AMP-dependent increases in tyrosine-phosphorylated proteins are not absolutely necessary for the induction of full-type hyperactivation and penetration into eggs in ejaculated boar spermatozoa in vitro[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2025年02月, Journal of Reproduction and Development, 71(1) (1), 35 - 40, 英語Spermatic RXFP2 expression levels and seminal INSL3 concentrations among beef bull ejaculates with different levels of sperm morphological normality[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2023年06月, Journal of Reproduction and Development, 69(3) (3), 170 - 177, 英語Comparative characteristics between calyculin A-induced and thimerosal-induced hyperactivation of cryopreserved bovine spermatozoa[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2022年11月, Animal Science Journal, 93, e13777, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2022年06月, Journal of Reproduction and Development, 68(3) (3), 181 - 189, 英語Involvement of Ca2+-ATPase in suppressing the appearance of bovine helically motile spermatozoa with intense force prior to cryopreservation[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2021年04月, Animal Science Journal, 92(e13552) (e13552), 英語Calmodulin is involved in the occurrence of extracellular Ca2+-dependent full-type hyperactivation in boar ejaculated spermatozoa incubated with cyclic AMP analogs[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2020年09月, Theriogenology, 154, 100 - 109, 英語Effects of digoxin on full-type hyperactivation in bovine ejaculated spermatozoa with relatively lower survivability for incubation with stimulators of cAMP signaling cascades[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2020年08月, Animal Reproduction Science, 218(106479) (106479), 英語Characteristics of bull sperm acrosome associated 1 proteins[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2019年04月, Theriogenology, 129, 46 - 53, 英語Identification of isoforms of calyculin A-sensitive protein phosphatases which suppress full-type hyperactivation in bull ejaculated spermatozoa[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2018年10月, Reproductive Medicine and Biology, 17(4) (4), 442 - 448, 英語Flagellar hyperactivation of bull and boar spermatozoa [Invited review article][査読有り][招待有り]
- 2018年10月, Journal of Reproduction and Development, 64(5) (5), 377 - 384, 英語Reconsideration of the evaluation criteria for bull ejaculated sperm motility in the context of rotation[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2017年11月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 84(11) (11), 1203 - 1217, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2017年09月, 日本胚移植学雑誌, 39(3) (3), 159 - 167, 日本語家畜精子鞭毛の超活性化運動に関する研究の現状 [招待総説論文][査読有り][招待有り]研究論文（学術雑誌）
- 2017年04月, Reproductive Medicine and Biology, 16(2) (2), 89 - 98Protein biomarkers for male artificial insemination subfertility in bovine spermatozoa [Invited review article][査読有り][招待有り]
- CSIRO, 2017年, Reproduction, Fertility and Development, 29(7) (7), 1297 - 1305, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2016年12月, THERIOGENOLOGY, 86(9) (9), 2179 - 2188, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2016年10月, ZYGOTE, 24(5) (5), 654 - 661, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2016年09月, ANIMAL REPRODUCTION SCIENCE, 172(1) (1), 94 - 104, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2016年04月, THERIOGENOLOGY, 85(6) (6), 1152 - 1160, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2015年12月, JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 61(6) (6), 519 - 524, 英語Effects of acrosomal conditions of frozen-thawed spermatozoa on the results of artificial insemination in Japanese Black cattle[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2015年03月, ANDROLOGY, 3(2) (2), 321 - 331, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2015年03月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 82(3) (3), 232 - 250, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2014年05月, THERIOGENOLOGY, 81(8) (8), 1012 - 1020, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2013年10月, Journal of Reproduction and Development, 59(5) (5), 421 - 430, 英語Roles of intracellular cyclic AMP signal transduction in the capacitation and subsequent hyperactivation of mouse and boar spermatozoa [Invited review article][査読有り][招待有り]研究論文（学術雑誌）
- 2013年02月, PLOS ONE, 8(2) (2), e57296, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2012年10月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 79(10) (10), 727 - 739, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2012年04月, THERIOGENOLOGY, 77(7) (7), 1360 - 1368, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- John Wiley and Sons Ltd, 2011年, Reproductive Medicine and Biology, 10(2) (2), 89 - 96, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2010年10月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 77(10) (10), 910 - 921, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2010年04月, JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 56(2) (2), 271 - 278, 英語Evidence of the Existence of Adenylyl Cyclase 10 (ADCY10) Ortholog Proteins in the Heads and Connecting Pieces of Boar Spermatozoa[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2010年02月, JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 56(1) (1), 36 - 40, 英語Hyperactivated Motility of Frozen-Thawed Spermatozoa from Fertile and Subfertile Japanese Black Bulls Induced by Cyclic Adenosine 3 ',5 '-Monophosphate Analogue, cBiMPS[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2010年01月, REPRODUCTIVE TOXICOLOGY, 29(1) (1), 68 - 73, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2009年06月, JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 55(3) (3), 327 - 334, 英語Calyculin A-Sensitive Protein Phosphatases are Involved in Maintenance of Progressive Movement in Mouse Spermatozoa In Vitro by Suppression of Autophosphorylation of Protein Kinase A[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2008年12月, JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 54(6) (6), 502 - 507, 英語A 32-kDa Tyrosine-phosphorylated Protein Shows a Protease-dependent Increase in Dead Boar Spermatozoa[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2008年09月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 75(9) (9), 1396 - 1407, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2008年06月, JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 54(3) (3), 171 - 176, 英語Effects of protein phosphatase inhibitor calyculin a on the postacrosomal protein serine/threonine phosphorylation state and acrosome reaction in bear spermatozoa incubated with a cAMP analog[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2007年11月, J. Reprod. Dev., 53(5), pp.1079-1086, 英語Premature Capacitation of Frozen-Thawed Spermatozoa from Subfertile Japanese Black Cattle[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2007年02月, JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 53(1) (1), 127 - 133, 英語Evidence for existence of cAMP-Epac signaling in the heads of mouse epididymal spermatozoa[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2006年09月, Mol. Reprod. Dev., 73(9), pp.1169-1178, 1169 - 1178, 英語A cyclic adenosine 3',5'-monophosphate-dependent protein kinase C activation is involved in the hyperactivation of boar spermatozoa.[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2006年05月, Zygote, 14(2) (2), 157 - 167, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2005年11月, JOURNAL OF ANDROLOGY, 26(6) (6), 732 - 740, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2005年01月, Theriogenology, 64(1) (1), 378 - 392, 英語Exogenous hyaluronic acid enhances porcine parthenogenetic embryo development in vitro possibly mediated by CD44[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2004年12月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 69(4) (4), 436 - 447, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2004年10月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 69(2) (2), 194 - 204, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2004年02月, ZYGOTE, 12(1) (1), 81 - 93, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2003年11月, JOURNAL OF ANDROLOGY, 24(6) (6), 831 - 842, 英語Viability and protein phosphorylation patterns of boar spermatozoa agglutinated by treatment with a cell-permeable cyclic adenosine 3 ',5 '-monophosphate analog[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2003年09月, 日本胚移植学雑誌, 25,pp.101-107(3) (3), 101 - 107, 日本語黒毛和種精漿酸性タンパク質の濃度に及ぼす季節の影響[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2003年02月, THERIOGENOLOGY, 59(3-4) (3-4), 719 - 734, 英語Stage-specific effects of the osmolarity of a culture medium on the development of parthenogenetic diploids in the pig[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2003年02月, J. Androl., 24,pp.91-99, 91 - 99, 英語Involvement of cytoplasmic free calcium in boar sperm: head-to-head agglutination induced by a cell-permeable cyclic adenosine monophosphate analog[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- Localization of Lap2B in oocytes and embryos during early development in cattleLAP2βはラミンの裏打ち蛋白であるがその機能については不明な点が多い。ウシ胚においてこのLAP2βの局在と発現について観察した。LAP2βの発現や局在は体外受精卵や単為発生胚で差がなく発生が進むにつれて前核期よりも発現が強くなることを示した。2003年01月, Theriogenology 第59巻 474 (abstr), 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2002年10月, ANIMAL REPRODUCTION SCIENCE, 73(3-4) (3-4), 197 - 209, 英語Capacitation-like alterations in cooled boar spermatozoa: assessment by the chlortetracycline staining assay and immunodetection of tyrosine-phosphorylated sperm proteins[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2002年06月, ASIAN JOURNAL OF ANDROLOGY, 4(2) (2), 87 - 96, 英語Relationship between bicarbonate and cyclic nucleotide in the promoting effects on head-to-head agglutination in boar spermatozoa[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2002年06月, Biol Reprod., 67(6), pp. 1688-1698, 1688 - 1698, 英語Characteristics of preimplantational development of porcine parthenogenetic diploids relative to the existence of amino acids in vitro[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2002年04月, JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 48(2) (2), 157 - 166, 英語The development of porcine parthenogenetic diploid oocytes with homogeneous genomic components in vitro[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2002年01月, 日本胚移植学雑誌, 24(1), pp.1-8(1) (1), 1 - 8, 日本語黒毛和種精漿における繁殖能力関連タンパク質Osteopontinの検出[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2001年, Asian-Australasian Journal of Animal Sciences, 14(8) (8), 1196 - 1202Factors Regulating Changes of Head-to-Head Agglutinability in Boar Spermatozoa during Epididymal Transit and Capacitation in Vitro - Review -[査読有り][招待有り]
- 2000年01月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 55(1) (1), 96 - 103, 英語Biochemical characterization of sialoprotein "anti-agglutinin" purified from boar epididymal and seminal plasma[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 2000年, REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT, 12(5-6) (5-6), 307 - 318, 英語Role of cyclic adenosine 3 ',5 '-monophosphate and serum albumin in head-to-head agglutination of boar spermatozoa[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1999年03月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 52(3) (3), 269 - 276, 英語Immunolocalization of anti-agglutinin for spermatozoa in boars[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1999年, REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT, 11(4-5) (4-5), 193 - 199, 英語Changes in epididymal protein anti-agglutinin on ejaculated boar spermatozoa during capacitation in vitro[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1998年08月, 日本畜産学会報, 69(8) (8), 720 - 727, 日本語冷却処理後の梅山豚射出精子の運動性および先体の形態に及ぼす精漿成分の影響[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1998年08月, Anim. Sci. Technol. (Jpn), 69(8), pp. 720-727(8) (8), 720 - 727, 英語Effects of seminal plasma components on motility and acrosomal integrity of Meishan boar spermatozoa after cooling treatments[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- ビタミンAの過剰摂取がニワトリの骨組織形成に及ぼす影響を究明するため,白色レグホン種で1週齢の雄ニワトリを用い,市販の幼雛飼料を給与しながら1日につき体重g当たり300または600単位のビタミンAを連日10日間経口投与した場合の脛骨について,軟X線吸収像の観察を行うとともに骨幹中央部の横断標本を組織学的および組織形態計測学的に検索した。その結果,ビタミンA過剰投与鶏の脛骨では,対照鶏に比べて,骨幹の幅が明らかに狭く,全般の骨質において軟X線吸収の低下が認められた。一方,骨幹の組織構造の観察では,骨膜が薄く,大部分の骨芽細胞は扁平で紡錘形をなしていた。そして,髄腔側の骨質でみられるオステオンは,中心管の広いものが多かった。このような組織形態の変化は,ビタミンAの投与量の増加によって,さらに顕著となった。破骨細胞の形態や細胞内空胞の大きさなどは,対照鶏の場合とよく類似していた。また組織形態計測学的には,緻密骨形成の遅延と骨芽細胞の減数萎縮が認められた。しかし,破骨細胞の大きさや数などの計測値については,対照鶏との間で差が認められず,骨吸収に対するビタミンA投与の影響は極めて少ないことが察知された。これらの結果からみると,ビタミンAの過剰摂取は,骨芽細胞の機能を低下させ,骨形成を抑制するものと考えられる。Japan Poultry Science Association, 1998年03月, Japanese Poultry Science, 35(2), pp. 108-116(2) (2), 108 - 116, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- The Japanese Society of Animal Reproduction (JSAR), 1998年, Journal of Reproduction and Development, 44(1) (1), 21 - 27, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1998年, REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT, 10(5) (5), 445 - 450, 英語Effects of calcium and bicarbonate on head-to-head agglutination in ejaculated boar spermatozoa[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1997年03月, Japanese Poultry Science, 34(2), pp. 124-131, 107 - 116, 英語Effects of dietary calcium levels on the histomorphology of proximal tibia in vitamin D-deficient chicks[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1996年08月, BIOLOGY OF REPRODUCTION, 55(2) (2), 325 - 332, 英語Electrophoretic characterization of boar epididymal antiagglutinin[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- The Japanese Society of Animal Reproduction (JSAR), 1996年, Journal of Reproduction and Development, 42(4) (4), 237 - 241, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1996年, REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT, 8(7) (7), 1039 - 1043, 英語Fructose stimulates shedding of cytoplasmic droplets from epididymal boar spermatozoa[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1995年, Journal of Reproduction and Development, 41(2) (2), 113 - 121, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1994年04月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 37(4) (4), 436 - 445, 英語IDENTIFICATION OF ANTI-AGGLUTININ FOR SPERMATOZOA IN EPIDIDYMAL BOAR PLASMA[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1993年05月, MOLECULAR REPRODUCTION AND DEVELOPMENT, 35(1) (1), 62 - 68, 英語CAPACITY OF RETE TESTICULAR AND CAUDA EPIDIDYMAL BOAR SPERMATOZOA TO UNDERGO THE ACROSOME REACTION AND SUBSEQUENT FUSION WITH EGG PLASMA-MEMBRANE[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 雄梅山豚における生殖機能の発達過程を明らかにする目的で,射精能力の発達および月齢に伴う精液性状の変化について検討した.包皮からの陰茎遊離は,検査した12頭のすべてにおいて64日齢までに確認された.手掌圧迫法により初めて精液が採取できたのは73～78日齢であった.採取された精液の液体部量,膠様物重量,1射精当りの総精子数および精子濃度はそれぞれ11ヵ月齢,10ヵ月齢,9ヵ月齢および5ヵ月齢まで有意に増加したが,前進精子率および奇形精子率については,3ヵ月齢で採取した精液で成豚の精液に匹敵する成績が得られた.他方,5日間および10日間の4°C保存後の試料における正常な頭帽を持つ生存精子の割合は,9ヵ月齢以上の雄から採取した精液を用いた場合に有意に高く,また,凍結保存後の試料での前進精子率および正常な頭帽を持つ生存精子の割合は8ヵ月齢以上の雄の精液において良好であった.以上のように,雄梅山豚は約2ヵ月齢で射精能力を獲得するが,繁殖用種雄として供用するのは6ヵ月齢以降にすべきと考えられる.また,精液を4°Cあるいは-196°Cで保存する場合には,9ヵ月齢以上の雄から採取した精液を用いることが望ましいと思われる.Japanese Society of Animal Science, 1993年04月, Anim. Reprod. Technol. (Jpn.), 64(4), pp. 333-339(4) (4), 333 - 339, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1993年, Journal of Reproduction and Development, 39(1) (1), 41 - 45, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1993年, REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT, 5(3) (3), 239 - 246, 英語CAPACITY OF GOAT EPIDIDYMAL SPERMATOZOA TO UNDERGO THE ACROSOME REACTION AND SUBSEQUENT FUSION WITH THE EGG PLASMA-MEMBRANE[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 生後の雄梅山豚における精のう腺,前立腺体部および尿道球腺の発達過程を形態学的および組織学的に観察した.すべての副生殖腺の重量は30～45日齢以後に顕著に増加した.1日齢の精のう腺および前立線体部では,腺上皮は未発達で,腺腔の拡大も不十分であった.しかし,45～60日齢になると,腺の終末部に部分的な分枝が見られ,腺腔にはPAS陽性の分泌物が認められた.75～90日齢では,腺の終末部は十公に発達した組織像を示した.他方,尿道球腺については,1日齢で腺の終末部に分枝が見られ,腺腔内にはPAS陽性の分泌物が観察された.30～45日齢になると,終末部は急速に拡大するとともに,分枝を増し,腺腔はPAS陽性物質で満たされていた.以上の結果から,雄梅山豚の精のう線,前立腺体部および尿道球腺は,それぞれ75～90日齢,75～90日齢および30～45日齢には十分に発達した分泌機能を備えると考えられる.Japanese Society of Animal Science, 1992年11月, Anim. Sci. Technol. (Jpn.), 63(11), pp. 1115-1122(11) (11), 1115 - 1122, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1992年09月, THERIOGENOLOGY, 38(3) (3), 491 - 500, 英語INFLUENCE OF SEASON ON CHARACTERISTICS OF EPIDIDYMAL AND EJACULATED SEMEN IN MEISHAN BOARS[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1992年08月, Proceedings of the International Symposium on Chinese Pig Breeds., pp. 162-165, 英語Seasonal changes of reproductive performance in Meishan boars[査読有り]研究論文（国際会議プロシーディングス）
- 1992年08月, Proceedings of the International Symposium on Chinese Pig Breeds, pp. 582-585, 英語In vitro storage of Meishan boar spermatozoa[査読有り]研究論文（国際会議プロシーディングス）
- 75～364日齢の雄梅山豚,合計22頭を用い,精巣上体通過に伴う精子の運動性および形態の変化について検討した.各雄から精巣上体を採取した後,8部位に区分し,各部位の精巣上体管内腔液を回収した.内腔液の一部は直ちにCa++欠KRB液で希釈し,精子の運動性を観察した.残りの内腔液にはグルタールアルデヒド含有PBSを等量加えて精子を固定した後,ギムザ染色標本を作製し,精子の形態を観察した.75日齢では,精巣上体尾精子のうちのわずか26%しか前進運動を示さなかった.また,59%が奇形精子で,その主なものは頭部奇形であった.さらに,62%の精子が細胞質滴を中片部の近位部に保持していた.しかし,105～120日齢になると,精巣上体の通過により89%の精子が活発な前進運動を示すようになり,98%の精子では細胞質滴が中片部の遠位部へと移動していた.他方,頭部奇形精子率については,90日齢以後において精子が精巣上体頭を通過する間に有意に低下した.以上の結果から,梅山豚の精巣上体は,精子を成熟させ,奇形精子を選択的に除去する機能を約120日齢までに獲得すると考えられる.Japanese Society of Animal Science, 1992年05月, Anim. Sci. Technol. (Jpn.), 63(5), pp. 462-467(5) (5), 462 - 467, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 雄金華豚における生殖器の生後の発達過程を形態学的および組織学的に観察した。精巣は45日齢以後に著しく発達し, 約75日齢には精細管腔に初めて精子が出現するとともに, 精上皮の組織構造が成熟型となった。精巣上体については, 45日齢以後に重量が急速に増加し, 60～75日齢までにはすべての部位で管上皮は十分に発達した組織構造を示した。他方, 副生殖腺の重量はいずれの腺も60日齢以後に急速に増加した。また, 精のう腺, 前立腺体部および尿道球腺はそれぞれ75～90日齢, 90日齢および30～45日齢までに終末部の著しい分枝を示し, 腺腔をPAS陽性の分泌物で満たしていた。以上の結果から, 雄金華豚は約75日齢で春機発動期に達することが知られる。また, 金華豚の生殖器は欧米改良種豚に比べて若齢で発達すると考えられる。The Japanese Society of Swine Science, 1992年02月, 日本養豚学会誌, 29(3), pp. 174-183(3) (3), 174 - 182, 日本語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1992年02月, Asian-Aust. J. Anim. Sci., 5(1), pp. 165-171, 英語Development of the epididymis in Meishan boars[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1991年10月, THERIOGENOLOGY, 36(4) (4), 637 - 643, 英語TESTICULAR DEVELOPMENT IN CHINESE MEISHAN BOARS[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1991年09月, 家畜繁殖技術研究会誌, 13(3), pp. 158-164, 日本語4℃保存梅山豚精子の生存性および頭帽の形態に及ぼすイミダゾールの影響[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 70～71日齢の雌梅山豚(体重20～30kg)に性腺刺激ホルモンを投与し,卵子の成熟および排卵を誘起するとともに,卵胞卵子の体外培養による成熟誘起を行ない,得られた体外成熟卵胞卵子,体内成熟卵胞卵子および排卵卵子を用いて,それぞれの体外受精を試みた.Japanese Society of Animal Science, 1990年11月, Jpn. J. Zootech. Sci., 61(11), pp. 1011-1016(11) (11), 1011 - 1016, 英語
hCG投与39～40時間後には卵巣表面に突出した直径7mm以上の卵胞が平均18.0±11.3個認められ,さらにhCG投与42～43時間後には全個体の卵巣において平均6.5±3.7個の排卵卵胞が認められた.
ホルモン無処理の梅山豚より採取した卵胞卵子は,当初は緻密な卵丘細胞層に囲まれていたが,培養38時間後には卵丘が膨化し卵丘細胞は互いに遊離した状態となった.ホルモン投与した梅山豚の体内成熟卵胞卵子および排卵卵子の卵丘もほぼ同様な卵丘の膨化を呈していた.体外受精の結果,媒精12時間後の体外成熟卵胞卵子では72.3%が第II減数分裂中期以降に達しており,体内成熟卵胞卵子および排卵卵子ではそれぞれ72.3%および84.4%が第II減数分裂中期以降に達していた.精子侵入卵子率には各群間で有意な差は認められなかったが(66.7～77.8%),体内成熟卵胞卵子の雄性前核形成率は,体外成熟卵胞卵子および排卵卵子に比べて有意に高かった.精子侵入卵子当たりの侵入精子数は,梅山豚体外成熟卵胞卵子で多いのに比べ,排卵卵子では有意に少なく,体内成熟卵胞卵子ではその中間の値を示した.[査読有り]研究論文（学術雑誌） - 先体反応誘起後のヤギ精予の運動能,生存能および透明帯除去ハムスター卵子への侵入能保持時間を調べた.また,これらの特性に対するカフェインおよびイミダゾールの影響についても検討した.ヤギ射出精子を洗浄後,密封ガラス管内において39.5°Cで2時間加温して先体反応を誘起した.ついで,これらの精子をBO液,カブェイン添加BO液またはイミダゾール添加BO液に再浮遊して37°Cで5時間加温し,その間の運動性および生存性の変化を経時的に調べた.また,BO液またはイミダゾール添加BO液中に再浮遊直後の精子あるいは各媒液中で3時間加温した精子を透明帯除去ハムスター卵子とともに37°Cでさらに5時間培養し,その間の卵子への精子の侵入状況を経時的に調べた.得られた結果の概要は以下の通りである.1) ヤギ糖子では先体反応誘起の前と後で運動様式が異なり,誘起後の精子はムチ振り様の運動を行なった.2) 先体反応誘起後のヤギ精子の運動能および生存能は誘起前に比べて著しく低下した.3) ヤギ先体反応精子の透明帯除去ハムスター卵子への侵入能保持時間は3時間以内であった.4) 精子浮遊液へのイミダゾールの添加はヤギ先体反応精子の運動能および生存能の維持ならびに透明帯除去ハムスター卵子への侵入能保持時間の延長に有効であった.一方,カフェインの添加は運動性の一時的な付活には有効であったが,運動能および生存能の維持に対してはむしろ有害であった.Japanese Society of Animal Science, 1990年07月, Jpn. J. Zootech. Sci., 61(7), pp. 640-647(7) (7), 640 - 647, 英語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- トリパンブルー生体染色とギムザ染色を組み合わせた方法(TG染色法)によりヤギ先体反応精子の判別が可能か否かを検討した.TG染色の結果,ヤギ精子は正常先体を持つ生存精子と死滅精子,正常先体を持たない生存精子と死滅精子の4種類に分けられた.また,同時に行なわれた透明帯除去ハムスター卵子への精子侵入試験の結果から,ハムスター卵子に侵入可能な精子は正常先体を持たない生存精子であることが推定された.TG染色法とトリプルステイン(TS)簡便法を比較した結果,精子の類別結果に差異のないことが明らかにされ,TG染色法ではTS簡便法に比べ染色液の調製および染色手順が一層簡単であることも知られた.これらのことから,TG染色法はTS簡便法以上に有用なヤギ先体反応精子の判別法と考えられる.Japanese Society of Animal Science, 1988年03月, 日本畜産学会報, 59(3), pp. 235-240(3) (3), 235 - 240, 日本語[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 1988年01月, 家畜繁殖技術研究会誌, 10(1), pp. 10-14, 日本語梅山豚精子の体外保存[査読有り]研究論文（学術雑誌）
- 雄ヤギ5頭を用い, 精巣網カテーテル装着手術後の精巣および精巣上体頭の組織構造を観察するとともに精巣静脈血中のテストステロン濃度を調べた。カテーテル装着手術後の精巣は, いずれも萎縮し, 正常な精子形成過程が観察される精細管は少なかった。また, ライディヒ細胞の形態や染色性には異常は認められなかった。一方, 精巣上体頭では, 精巣上体管が萎縮し, 主細胞の高さは無傷のものよりも有意に減少した。同様の組織構造の変化は, 精巣輸出管を切除した場合の精巣および精巣上体頭でも認められた。精巣静脈血中のテストステロ神戸大学農学部, 1988年01月, 神戸大学農学部研究報告, 18(1), pp. 125-132(1) (1), 125 - 132, 日本語研究論文（学術雑誌）
- 4頭の成熟雄ヤギ(日本在来種)から精巣網カテーテル法によって採取した精巣網液および頚静脈血を用い, ラジオイムノアッセイによりテストステロン, エストラジオール-17βおよびプロジェステロン濃度を測定した。精巣網漿液中のホルモンの平均濃度は, テストステロンで67.8ng/ml, エストラジオール-17βで43.9pg/ml, プロジェステロンでは517.1pg/mlであった。どの個体においても昼間(0900-2100)と夜間(2100-0900)に採取した試料のテストステロン濃度に有意な差は認められなか神戸大学農学部, 1988年01月, Sci. Rept. Fac. Agr. Kobe Univ., 18, pp. 133-136(1) (1), 133 - 136, 英語研究論文（学術雑誌）
- 2019年10月, 日本アンドロロジー学会ニュースレター, 19, 3 - 4, 日本語家畜精子での受精制御分子について[招待有り]その他
- 日本胚移植研究会, 2017年09月, 日本胚移植学雑誌, 39(3) (3), 141, 日本語特集 哺乳類の精子研究における新展開 －基礎と応用― 序[招待有り]その他
- 2008年04月, 環境科学総合研究所年報, 26, pp. 45-52, 日本語人間との共生環境の回復を目的とした有害野生動物の繁殖抑制その他
- 2007年12月, 財）三島海雲記念財団平成18年度受贈者研究報告書, 44, pp. 19-23, 日本語精子鞭毛のハイパーアクチベーションを指標とする黒毛和種雄ウシの繁殖能力評価法の開発その他
- 2006年12月, 食肉に関する助成研究調査成果報告書, 24, pp. 52-56, 日本語黒毛和種雄ウシの生殖能力簡易評価法の確立：精子CTC染色法の追加適用その他
- 2005年12月, 食肉に関する助成研究調査成果報告書, 23, pp. 39-44, 日本語精子リン酸化タンパク質の定量解析による黒毛和種雄ウシの生殖能力簡易評価法[査読有り]その他
- 2000年12月, 食肉に関する助成研究調査成果報告書, 18, pp. 38-42, 日本語キャパシテーション過程にあるブタ精子での頭部間凝集を制御する細胞内情報伝達機構その他
- 2000年, J. Reprod. Dev., 46(Suppl.), pp. j43-j50, 日本語哺乳類精子の成熟変化を制御する分子[査読有り]記事・総説・解説・論説等（学術雑誌）
- 1999年12月, 食肉に関する助成研究調査成果報告書, 17, pp. 29-33, 日本語キャパシテーション過程におけるブタ精子結合Anti-Agglutininの変化その他
- 1998年12月, 食肉に関する助成研究調査成果報告書, 16, pp. 79-83, 日本語ブタ精子の低温耐性を向上させる精漿タンパク質の精製および精子凍結保存への利用その他
- 共著, 第12 章 哺乳類精子の成熟と活性化 pp. 69～72, 筑波大学出版会, 2025年12月, ISBN: 9784904074909最新 精子学
- 共著, 第8章 雄の配偶子形成 pp. 67～78, 朝倉書店, 2025年02月, ISBN: 9784254450354動物生殖科学
- 共著, 第5章3 受精 pp. 228～237, 株式会社インターズ―, 2020年03月繁殖生物学 改訂版（第2版）
- 共著, 第5章 受精ー個体発生のはじまりー 5.3 哺乳類の受精 pp. 44～47, 株式会社培風館, 2019年04月, 日本語発生生物学 「哺乳類の受精」学術書
- 共著, Hokuto Shobo, 2003年, 英語Capacitation-related events in boar spermatozoa, Animal Frontier Sciences(pp. 37-43)学術書
- 共著, Hokuto Shobo, 2001年, 英語Regulation of head-to-head agglutination in boar spermatozoa by capacitation-related factors. Reproductive Biotechnology: Reproductive biotechnology update and its related physiology (pp. 203-209)学術書
- 共著, Hokuto Shobo, 2001年, 英語Early development of porcine parthenogenetic diploids in-vitro (Reproductive Biotechnology: Reproductive biotechnology update and its related physiology. pp.285-295)学術書
- 共著, Nakanishi Pub. Co., 1998年12月, 英語Purification and characterization of boar epididymal plasma protein Anti-Agglutinin. (Reproductive Biology Update: Novel tools for assessment of environmental toxicity. pp. 207-217)学術書
- 共著, Nakanishi Pub. Co., 1998年, 英語Electro-activation of in vitro-matured porcine oocytes and their development in vitro and in vivo (Reproductive Biology Update: Novel tools for assessment of environmental toxicity, pp. 117-127)学術書
- 第20回国際動物繁殖学会, 2026年06月, 英語Roles of TRPC3 in the occurrence of extracellular Ca2+-dependent full-type hyperactivation in boar spermポスター発表
- 第20回国際動物繁殖学会, 2026年06月, 英語Relationship between coefficient of inbreeding and semen quality in Japanese Black cattle (Tajima beef cattle)ポスター発表
- 第20回国際動物繁殖学会, 2026年06月, 英語Roles of Ca2+ released from the internal store in the occurrence control of full-type hyperactivation of boar ejaculated spermポスター発表
- 日本アンドロロジー学会・第45回学術大会, 2026年06月, 日本語ウシ精子におけるFull-type Hyperactivation発生能力の個体差とcalpain 2との関係ポスター発表
- 第118回 日本繁殖生物学会大会, 2025年09月, 日本語ブタ精子でのFull-type Hyperactivationの発生制御における細胞内ストア由来Ca2+の役割ポスター発表
- 第118回 日本繁殖生物学会大会, 2025年09月, 日本語ウシ凍結保存精子でのFull-type Hyperactivationの発生状態に個体差を発生させる原因候補分子の探索ポスター発表
- 2025年米国繁殖学会, 2025年07月, 英語RXFP2 expression levels and seminal INSL3 concentrations among Japanese Black beef bull ejaculates with different levels of sperm morphological normalityポスター発表
- 第55回精子研究会, 2025年06月ウシ精子でのHyperactivation の発生能力を指標とする性状検査法の開発 － TRPC5によるHyperactivation の発生制御－[招待有り]シンポジウム・ワークショップパネル（指名）
- 日本アンドロロジー学会・第44回学術大会, 2025年06月, 日本語ウシ凍結保存精子での鞭毛超活性化運動の発生制御へのCa2+ 依存性プロテアーゼ 「カルパイン2 」の関与ポスター発表
- 第117 回日本繁殖生物学会大会, 2024年09月, 日本語ウシ凍結保存精子でのCalyculin-A誘発性Full-type Hyperactivationの発生制御へのカルパインの関与ポスター発表
- 第117 回日本繁殖生物学会大会, 2024年09月, 日本語ブタ精子でのFull-type Hyperactivationの誘起に及ぼす非受容体型タンパク質チロシンキナーゼの阻害剤の影響ポスター発表
- 第117 回日本繁殖生物学会大会, 2024年09月, 日本語ウシ精子でのCalyculin-A誘発性Full-type Hyperactivationの発生制御に機能するTRPCアイソフォームの探索ポスター発表
- 第73 回関西畜産学会大会, 2023年11月, 日本語ウシ凍結保存精子でのCalyculin-A 誘発性Full-type ハイパーアクチベーションの発生に及ぼすストア作動性チャネル非選択的阻害剤の影響口頭発表（一般）
- 第116回日本繁殖生物学会大会, 2023年09月, 日本語ウシ凍結保存精子でのCalyculin-A誘発性Full-type Hyperactivationの発生におけるストア作動性チャネルの関与口頭発表（一般）
- 第116回日本繁殖生物学会大会・市民公開講座「黒毛和牛をもっと増やそう！最新の繁殖生物学研究がお父さん牛にできること」, 2023年09月, 日本語お父さん牛の精子がお母さんの卵子とどのように受精するのか？[招待有り]公開講演，セミナー，チュートリアル，講習，講義等
- 日本アンドロロジー学会第42回学術大会 特別講演4, 2023年06月, 日本語人工授精での受胎率の向上を目指して －ウシ（黒毛和種）精子の新規検査法の開発－[招待有り]口頭発表（招待・特別）
- 日本アンドロロジー学会第42回学術大会, 2023年06月, 日本語ブタ射出精子での体外受精能力発現に及ぼす cAMP シグナリング活性化処理の影響ポスター発表
- 第115回日本繁殖生物学会大会, 2022年09月, 英語Relationship of the SERCA activity with the time courses of occurrence of full-type hyperactivation in bovine spermポスター発表
- 第115回日本繁殖生物学会大会, 2022年09月, 日本語cAMPアナログ・Ca2+処理されたブタ精子によるPDE阻害剤不含培養液中での卵子への侵入ポスター発表
- 日本アンドロロジー学会第41回学術大会, 2022年06月, 英語Involvement of cytoplasmic Ca2+ and SERCAs in the occurrence of helical movement in bovine spermポスター発表
- 日本アンドロロジー学会第41回学術大会, 2022年06月, 日本語ウシ凍結精子でのFull-typeハイパーアクチベーションの誘起のための処理条件の検討ポスター発表
- 第10回関西生殖医学集談会, 2022年03月, 日本語ウシ精子において化学物質処理により誘起されるHyperactivationの特性解析口頭発表（一般）
- 第71回関西畜産学会, 2021年10月, 英語A regulatory factor for the occurrence of helical movement in bovine cryopreserved sperm口頭発表（一般）
- 第114 回日本繁殖生物学会大会, 2021年09月, 英語Involvement of thapsigargin-sensitive Ca2+-ATPase in the occurrence of helical movement with 3-D rotation in cryopreserved bovine spermポスター発表
- 第114 回日本繁殖生物学会大会, 2021年09月, 日本語Thimerosal処理によりウシ精子で誘起される細胞内ストアのCa2+依存的なハイパーアクチベーションの運動様式ポスター発表
- 第114 回日本繁殖生物学会大会, 2021年09月, 日本語ウシ凍結精子でのFull-typeハイパーアクチベーションに及ぼすプロテインホスファターゼ阻害剤Calyculin Aの影響ポスター発表
- 日本アンドロロジー学会第40回学術大会, 2021年06月, 日本語ブタ液状保存精子でのFull-typeハイパーアクチベーションの誘起に及ぼすポリビニルアルコールおよびウシ血清アルブミンの影響口頭発表（一般）
- 日本アンドロロジー学会第39回学術大会, 2021年01月, 日本語ウシ射出精子の鞭毛運動に及ぼすNa+/K+-ATPase阻害剤Digoxinの影響ポスター発表
- 令和2年度 東海畜産学会 シンポジウム, 2020年12月, 日本語ウシ精子における精密性状検査法の開発[招待有り]口頭発表（基調）
- 第113回日本繁殖生物学会大会, 2020年09月, 日本語ブタ精子でのFull-type Hyperactivationの発生制御におけるカルモジュリンの役割ポスター発表
- 第46回山梨大学発生工学研究センターセミナー, 2019年12月, 日本語, 国内会議家畜精子の受精制御分子の探索と利用[招待有り]公開講演，セミナー，チュートリアル，講習，講義等
- 第112回日本繁殖生物学会, 2019年09月, 英語, 国内会議Involvement of digoxin-sensitive Na+/K+-ATPase in the regulation of bovine sperm motilityポスター発表
- 第112回日本繁殖生物学会, 2019年09月, 日本語, 国内会議黒毛和種精子におけるSPACA1タンパク質の特性解析ポスター発表
- 日本アンドロロジー学会第38回学術大会, 2019年06月, 日本語, 大阪国際会議場（グランキューブ大阪）, 国内会議低繁殖症の雄ウシを検出するための精子分子性状検査法のマーカー「SPACA1タンパク質」の解析ポスター発表
- 第111回日本繁殖生物学会大会, 2018年09月, 日本語, 上田市 信州大学繊維学部, 国内会議活力検査法の改良を目的としたウシ射出精子の運動様式の観察ポスター発表
- 日本アンドロロジー学会第37回学術大会, 2018年06月, 日本語, ラ・スイート神戸オーシャンガーデン, 国内会議cAMP-PKAシグナル伝達活性の違いがウシ精子の運動様式に及ぼす影響 － 精子の活力検査における評価基準の見直し －ポスター発表
- 第6回関西生殖医学集談会, 2018年02月, 日本語, 大阪市 ハービスPLAZA, 国内会議ウシ精子での細胞外Ca2+依存的なFull-typeハイパーアクチベーションの抑制に機能するカリクリンA感受性プロテインホスファターゼアイソフォームの特定口頭発表（一般）
- Fourth World Congress of Reproductive Biology (WCRB2017), 2017年09月, 英語, 沖縄県宜野湾市 沖縄コンベンションセンター, 国際会議Mechanism for the extracellular Ca2+-dependent occurrence of full-type hyperactivation in boar sperm treated with a cAMP analogポスター発表
- Fourth World Congress of Reproductive Biology (WCRB2017), 2017年09月, 英語, 沖縄県宜野湾市 沖縄コンベンションセンター, 国際会議Calyculin A-sensitive protein phosphatases which are involved in the suppression for full-type hyperactivation of bovine spermポスター発表
- 第5回関西生殖医学集談会, 2017年03月, 日本語, 大阪市, 国内会議ブタ精子での超活性化運動（Full-type HA）の開始におけるTRPC3チャネルの役割口頭発表（一般）
- UGSVS lecture, 2017年02月, 英語, 岐阜大学, 国内会議Advanced techniques for the reproduction in the cattle[招待有り]口頭発表（招待・特別）
- 第109回日本繁殖生物学会, 2016年09月, 日本語, 一社 日本繁殖生物学会, 相模原市（麻布大学）, 国内会議ブタ精子におけるfull-type hyperactivationの開始制御へのTRPC3チャネルの関与ポスター発表
- 第109回日本繁殖生物学会, 2016年09月, 日本語, 一社 日本繁殖生物学会, 相模原市（麻布大学）, 国内会議ウシ精子のハイパーアクチベーションを抑制するカリクリンA感受性プロテインホスファターゼの特定ポスター発表
- 日本アンドロロジー学会35回学術大会 シンポジウム1：男性不妊症の分子メカニズム, 2016年06月, 日本語, 前橋市・前橋テルサ, 国内会議先体タンパク質をマーカーとする哺乳類精子の分子性状検査法[招待有り]シンポジウム・ワークショップパネル（指名）
- 日本畜産学会第121回大会, 2016年03月, 日本語, 日本獣医生命大学, 国内会議ブタ精子での先体反応誘起に伴う頭部タンパク質SPACA1の変化ポスター発表
- 第4回関西生殖医学集談会・第48回関西アンドロロジーカンファレンス合同研究会, 2016年03月, 日本語, 大阪市, 国内会議ウシ新鮮射出精子における先体チロシンリン酸化タンパク質の分布状態口頭発表（一般）
- 第108回日本繁殖生物学会大会, 2015年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 宮崎, 国内会議ウシ新鮮射出精子の分子性状における個体差 －先体チロシンリン酸化タンパク質と人工授精成績との関係－ポスター発表
- 第35回関西生殖発生毒性フォーラム 基礎教育講演, 2015年04月, 日本語, 大阪市, 国内会議哺乳類の精子学 ー運動の開始から受精までー[招待有り]口頭発表（招待・特別）
- 第60回日本生殖医学会学術講演会 シンポジウム3 「受精に関する最近の話題」, 2015年04月, 日本語, 横浜, 国内会議人工授精成績・体外受精成績に影響を与える哺乳類精子の先体タンパク質[招待有り]シンポジウム・ワークショップパネル（指名）
- 日本畜産学会第119回大会, 2015年03月, 日本語, 宇都宮, 国内会議ウシ凍結精子での先体損傷・離脱に伴うIZUMO1の変化口頭発表（一般）
- 受胎率向上SIG第1回会合, 2014年12月, 日本語, 東京, 国内会議低繁殖症雄ウシの精子における欠陥型タンパク質の検出および特性解析[招待有り]シンポジウム・ワークショップパネル（指名）
- World Congress of Reproductive Biology 2014, 2014年09月, 英語, Edinburgh, UK, 国際会議The association between spatial distribution patterns of SPACA1 in human ejaculated sperms and outcomes of conventional IVFポスター発表
- 第107回日本繁殖生物学会大会, 2014年08月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 帯広, 国内会議黒毛和種精子でのチロシンリン酸化タンパク質の分布状態が先体の安定性に及ぼす影響ポスター発表
- 第107回日本繁殖生物学会大会, 2014年08月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 帯広, 国内会議ブタ胚盤胞におけるタイトジャンクション関連タンパク質claudin familyの発現性口頭発表（一般）
- 第107回日本繁殖生物学会大会, 2014年08月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 帯広, 国内会議ブタ精子での先体反応に伴う頭部タンパク質「SPACA1」の分布および分子マスの変化ポスター発表
- 第107回日本繁殖生物学会大会, 2014年08月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 帯広, 国内会議ウシ凍結保存精子における先体の損傷・離脱が頭部でのIZUMO1の分布に及ぼす影響ポスター発表
- 第107回日本繁殖生物学会大会, 2014年08月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 帯広, 国内会議ウシ精巣におけるcAMP依存性転写調節因子CREMの発現パターンの解析ポスター発表
- 日本アンドロロジー学会第33回学術大会 シンポジウム 1 「Capacitation の最前線を極める」, 2014年06月, 日本語, 軽井沢プリンスホテルウエスト, 国内会議家畜精子のハイパーアクチベーションに先立つ部位特異的なキャパシテーション[招待有り]シンポジウム・ワークショップパネル（指名）
- 第2回関西生殖医学集談会, 2014年03月, 日本語, 兵庫医科大学産婦人科学講座, 大阪市, 国内会議ブタ精子の鞭毛に分布するカルパイン2の役割口頭発表（一般）
- 第2回関西生殖医学集談会, 2014年03月, 日本語, 兵庫医科大学産婦人科学講座, 大阪市, 国内会議ヒト射出精子の頭部におけるSPACA1の分布状態の個体差 －先体主部での分布状態と体外受精成績との関係－口頭発表（一般）
- 日本畜産学会第118回大会, 2014年03月, 日本語, 日本畜産学会, つくば, 国内会議Full-type hyperactivationの誘起に伴う家畜精子の頸部および中片部における変化口頭発表（一般）
- 第106回日本繁殖生物学会大会, 2013年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 府中市, 国内会議人工授精で雌を受胎させにくい精子を産生する黒毛和種雄個体の検出法 －凍結保存後の精子先体の正常性と体内受精由来の移植可能胚率の関係－口頭発表（一般）
- 第106回日本繁殖生物学会大会, 2013年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 府中市, 国内会議ブタ精子におけるカルパインの検出および機能解析ポスター発表
- 第106回日本繁殖生物学会大会, 2013年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 府中市, 国内会議ヒト射出精子におけるSPACA1の検出 －先体での検出パターンと体外受精成績との相関性－ポスター発表
- 関西畜産学会第63回大会, 2013年09月, 日本語, 関西畜産学会, 彦根市, 国内会議ウシ精子の鞭毛におけるタンパク質チロシンリン酸化および超活性化運動の誘起口頭発表（一般）
- 日本畜産学会第116回大会, 2013年03月, 日本語, 日本畜産学会, 広島市, 国内会議ブタ精子での後帽部タンパク質の脱リン酸化および先体反応におけるcAMP-EPACシグナリングの役割口頭発表（一般）
- 日本畜産学会第116回大会, 2013年03月, 日本語, 日本畜産学会, 広島市, 国内会議ウシのハイパーアクチベーション精子における鞭毛タンパク質のリン酸化状態口頭発表（一般）
- 第105回日本繁殖生物学会大会, 2012年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, つくば市, 国内会議哺乳類精子の細胞内cAMPシグナル伝達機構に関する研究[招待有り]口頭発表（招待・特別）
- 第105回日本繁殖生物学会大会, 2012年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, つくば市, 国内会議黒毛和種精子先体前部におけるチロシンリン酸化型SPACA1の解析－サンプル間差および精子成熟に伴う変化について－ポスター発表
- 第62回関西畜産学会大会, 2012年09月, 日本語, 関西畜産学会, 和歌山市, 国内会議黒毛和種精子における先体の耐凍性マーカーの特性解析口頭発表（一般）
- 第105回日本繁殖生物学会大会, 2012年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, つくば市, 国内会議cAMP合成酵素ADCY10の異常型スプライスバリアントの検出によるウシ精子の新規の性状検査法口頭発表（一般）
- 日本アンドロロジー学会第31回学術大会, 2012年06月, 日本語, 日本アンドロロジー学会, 神戸市, 国内会議ブタの精巣および射出精子における活性型CREM（cAMP-responsive element modulator）の分子性状の解析口頭発表（一般）
- 日本畜産学会第115回大会, 2012年03月, 日本語, 日本畜産学会, 名古屋市, 国内会議黒毛和種精子における耐凍能マーカーの検出パターン口頭発表（一般）
- 日本畜産学会第115回大会, 2012年03月, 日本語, 日本畜産学会, 名古屋市, 国内会議ブタ雄性生殖細胞での活性型CREMの検出および分布解析口頭発表（一般）
- 第137回日本生殖医学会関西支部集談会, 2012年03月, 日本語, 大阪市, 国内会議ウシ精子における断片型ADCY10の合成メカニズム口頭発表（一般）
- 第104回日本繁殖生物学会大会, 2011年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 盛岡市, 国内会議ウシの可溶化型アデニル酸シクラーゼ (ADCY10) の断片型は精巣においてmRNAスプライスバリアントから合成されるポスター発表
- 第136回日本生殖医学会関西支部集談会, 2011年03月, 日本語, 大阪市, 国内会議ブタ精子でのcAMP依存的な鞭毛超活性化運動に及ぼすカルモジュリンアンタゴニストおよびカルパイン阻害剤口頭発表（一般）
- 日本動物学会第80回大会「第8回受精シンポジウム」, 2010年09月, 日本語, 日本動物学会, 静岡市, 国内会議哺乳類精子における部位特異的なcAMPシグナリング[招待有り]シンポジウム・ワークショップパネル（指名）
- 日本アンドロロジー学会第29回学術大会, 2010年07月, 日本語, 日本アンドロロジー学会, 東京, 国内会議ブタ精子中片部のAMPKはcAMP依存性ハイパーアクチベーションの発現制御に関与する口頭発表（一般）
- 11th International Symposium on Spermatology, 2010年06月, 英語, 宜野湾市, 国際会議Paternal exposure to 2,3,7,8-tetrachloro- dibenzo-p-dioxin (TCDD) affects the sex ratio of offspring at birth by change the sex ratio of fertilized eggポスター発表
- 11th International Symposium on Spermatology, 2010年06月, 英語, Naha, 国際会議Paternal exposure to 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) affects the sex ratio of offspring at birth by change the sex ratio of fertilized eggポスター発表
- 11th International Symposium on Spermatology, 2010年06月, 英語, Naha, 国際会議Immunodetection patterns of tyrosine-phosphorylated proteins in the head of frozen-thawed spermatozoa of Japanese Black bullsシンポジウム・ワークショップパネル（公募）
- 11th International Symposium on Spermatology, 2010年06月, 英語, Naha, 国際会議Identification of cAMP responsive element modulator (CREM) isoforms of the porcine testisポスター発表
- 日本畜産学会第112回大会, 2010年03月, 日本語, 日本畜産学会, 東京, 国内会議ブタ精巣におけるcAMP依存性転写調節因子CREMτの発現口頭発表（一般）
- 第135回日本生殖医学会関西支部集談会, 2010年03月, 日本語, 大阪市, 国内会議ブタの精子形成関連タンパク質の発現を制御するcAMPシグナリング構成分子の同定口頭発表（一般）
- 第135回日本生殖医学会関西支部集談会, 2010年03月, 日本語, 大阪市, 国内会議ウシ精巣におけるアデニル酸シクラーゼ10(ADCY10)mRNAsのスプライスバリアントの検出口頭発表（一般）
- International Symposium of Declining Fertility in Dairy Cows in the World; its Causes and Possible Solutions, 2010年02月, 英語, Miyazaki, 国際会議Subfertility in Japanese Black bulls and new methods to detect abnormal functionality of spermatozoaポスター発表
- 2009 Japan-Taiwan Joint Symposium on Cell Signaling and Gene Regulation, 2009年11月, 英語, Kobe, 国際会議Active protein kinase A (PKA) is required for the meiotic resumption of pig oocytesポスター発表
- 第102回日本繁殖生物学会大会, 2009年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 奈良市, 国内会議ブタ単為発生2倍体の胚盤胞への発生に及ぼすヘキソースの影響ポスター発表
- 第102回日本繁殖生物学会大会, 2009年09月, 英語, 日本繁殖生物学会, 奈良市, 国内会議Changes in protein kinase A (PKA) activity during meiotic resumption of pig oocytesポスター発表
- 日本アンドロロジー学会第28回学術大会, 2009年07月, 日本語, 日本アンドロロジー学会, 富山市, 国内会議ブタ精巣におけるcAMP依存性転写調節因子(CREM)ファミリーアイソフォームの発現口頭発表（一般）
- 日本アンドロロジー学会第28回学術大会, 2009年07月, 日本語, 日本アンドロロジー学会, 富山市, 国内会議ブタ精子におけるADCY10の検出口頭発表（一般）
- 34th Annual Meeting of the American Society of Andrology, 2009年04月, 英語, The American Society of Andrology, Philadelphia, 国際会議Detection of soluble adenylyl cyclase (ADCY10) homolog proteins in boar spermatozoaポスター発表
- 日本畜産学会第110回大会, 2009年03月, 日本語, 日本畜産学会, 藤沢市, 国内会議ブタ精子でのハイパーアクチベーションの発現制御における解糖系の役割口頭発表（一般）
- 第134回日本生殖医学関西支部集談会, 2009年03月, 日本語, 大阪市, 国内会議cAMPアナログ処理により鞭毛超活性化運動が誘起されたブタ精子でのAMPKサブユニットの分子変化口頭発表（一般）
- 第40回精子研究会シンポシウム, 2009年01月, 日本語, 精子研究会, 吹田市, 国内会議哺乳類精子の頚部特異的なcAMPシグナリングによるハイパーアクチベーションの制御[招待有り]シンポジウム・ワークショップパネル（指名）
- 第101回日本繁殖生物学会大会, 2008年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 福岡市, 国内会議低受胎率を示した黒毛和種あるいは正常な個体における凍結－融解精子鞭毛の超活性化運動口頭発表（一般）
- 日本アンドロロジー学会第27回学術大会, 2008年07月, 日本語, 日本アンドロロジー学会, 京都市, 国内会議cAMP-Epacシグナリングを介したブタ精子キャパシテーションの新規制御メカニズム口頭発表（一般）
- 33rd Annual Meeting of American Society of Andrology, 2008年04月, 英語, American Society of Andrology, Albuquerque, 国際会議Cyclic AMP-induced inactivation of PDK1 is linked to the enhancement of protein tyrosine phosphorylation and flagellar hyperactivation in boar spermatozoaポスター発表
- 第109回日本畜産学会大会, 2008年03月, 日本語, 日本畜産学会, 水戸市, 国内会議ウシ精子のハイパーアクチベーション発現制御に関与する候補分子の特定口頭発表（一般）
- 第100回日本繁殖生物学会大会, 2007年10月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 東京, 国内会議マウス精巣上体尾精子の鞭毛主部においてプロテインホスファターゼはPKA活性を抑制する口頭発表（一般）
- 第100回日本繁殖生物学会大会, 2007年10月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 東京, 国内会議ブタ精子頭部でのcAMP依存性細胞内カルシウム濃度上昇およびキャパシテーションにおけるEpacの役割口頭発表（一般）
- 第100回日本繁殖生物学会大会, 2007年10月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 東京, 国内会議ブタ精子の部位特異的な細胞内cAMPシグナリング：ハイパーアクチベーション誘起に伴う鞭毛主部でのPKAおよびPDK1のcAMP依存的な変化ポスター発表
- 第100回日本繁殖生物学会大会, 2007年10月, 日本語, 東京, 国内会議ウシ，ブタおよびマウスの精子でのタンパク質チロシンリン酸化に及ぼすcAMPアナログとタンパク質チロシンホスファターゼの影響ポスター発表
- 日本アンドロロジー学会第26回学術大会, 2007年07月, 日本語, 浦安市, 国内会議ブタ精子の部位特異的な細胞内cAMPシグナリング：頚部のcAMP-PKA-PKCシグナリングはハイパーアクチベーションの発現調節に関与する口頭発表（一般）
- 日本アンドロロジー学会第26回学術大会, 2007年07月, 日本語, 浦安市, 国内会議ウシおよびブタの精子におけるcAMP依存性タンパク質チロシンリン酸化口頭発表（一般）
- 環境科学総合研究所成果報告会, 2007年05月, 日本語, 熱海, 国内会議人間との共生環境の回復を目的とした有害野生動物の繁殖抑制公開講演，セミナー，チュートリアル，講習，講義等
- 日本畜産学会第107回大会, 2007年03月, 日本語, 相模原市, 国内会議凍結融解処理されたブタ精子における32 kDaチロシンリン酸化タンパク質Tyr32の出現メカニズム口頭発表（一般）
- 第100回日本繁殖生物学会大会, 2007年03月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 東京, 国内会議ブタ着床前胚におけるタイトジャンクション関連タンパク質―Occludin の発現性ポスター発表
- 日本畜産学会第107回大会, 2007年03月, 日本語, 相模原市, 国内会議ブタ精子のキャパシテーションにおけるcAMP-Epac-カルシウムシグナリングの役割口頭発表（一般）
- 33rd Annual Conference of the International Embryo Transfer Society, 2007年01月, 英語, Kyoto, JAPAN, 国際会議Localization of claudin family proteins in pig embryos during preimplantation developmentポスター発表
- 33rd Annual Conference of the International Embryo Transfer Society, 2007年01月, 英語, Kyoto, Japan, 国際会議Fertilization-related parameters of frozen-thawed spermatozoa from subfertile Japanese Black cattleポスター発表
- The 3rd Asian Reproductive Biotechnology Conference, 2006年11月, 英語, Asian Reproductive Biotechnology Conference, Hanoi, Vietnam, 国際会議Assembly of nuclear membrane proteins in bovine IVF and activated oocytes.口頭発表（招待・特別）
- 第99回日本繁殖生物学会大会, 2006年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 名古屋, 国内会議マウス精巣上体精子におけるcAMP-Epacシグナリング経路の検出ポスター発表
- 第99回日本繁殖生物学会大会, 2006年09月, 日本語, Japanese Society of Animal Reproduction, 名古屋, 国内会議ブタ精子におけるcAMP-PKAシグナリング依存的なPKCの活性化は鞭毛の超活性化運動の発現制御に関与する口頭発表（一般）
- 第99回日本繁殖生物学会大会, 2006年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 名古屋, 国内会議ブタおよびマウス着床前胚のタイトジャンクション関連タンパク質の発現性ポスター発表
- 第13回日本胚移植研究会, 2006年08月, 日本語, 日本胚移植研究会, 広島, 国内会議着床前胚におけるタイトジャンクション構造タンパク質Claudin-1の核移行性口頭発表（一般）
- 第56回関西畜産学会大会, 2006年08月, 日本語, 関西畜産学会, 大阪, 国内会議ブタ精子の頭部におけるcAMP依存性細胞内カルシウム濃度上昇に及ぼす炭酸水素ナトリウムおよびPKA阻害剤の影響口頭発表（一般）
- 31st Annual meeting of American Society of Andrology, 2006年04月, 英語, American Society of Andrology, Chicago, USA, 国際会議Role of protein kinase C in the cyclic adenosine 3',5'-monophosphate-dependent hyperactivation of boar spermatozoaポスター発表
- 日本畜産学会第106回大会, 2006年03月, 日本語, 日本畜産学会, 福岡, 国内会議低繁殖能力雄黒毛和種の凍結精子における時期尚早なキャパシテーション・先体反応ポスター発表
- 日本畜産学会第106回大会, 2006年03月, 日本語, 日本畜産学会, 福岡, 国内会議ブタ精子後帽部におけるSer/Thrリン酸化タンパク質のcAMP依存的減少に及ぼすcalyculin Aの影響ポスター発表
- 日本畜産学会第106回大会, 2006年03月, 日本語, 日本畜産学会, 福岡, 国内会議ブタおよびマウスの精子におけるCa2+ストアマーカータンパク質の検出口頭発表（一般）
- Kobe University The 21st Century COE Program Symposium: Japan-Taiwan Symposium on Cell Signaling and Gene Expression (Program and Abstract,18), 2005年11月, 英語, Kobe University COE Program "Signaling Mechanisms by Protein Modification Reactions", Kobe, 国際会議Low progressive motility and premature expression of fertilizing ability of frozen-thawed spermatozoa from subfertile Japanese Black cattle口頭発表（一般）
- 第98 回日本繁殖生物学会大会(J.Reprod. Dev., Vol. 51(Suppl.), j120), 2005年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 静岡, 国内会議低繁殖能力雄ウシ由来の凍結精子で認められる低前進運動性および時期尚早なキャパシテーション・先体反応ポスター発表
- 第98 回日本繁殖生物学会大会(J. Reprod. Dev., Vol.51(Suppl.),j89), 2005年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 静岡, 国内会議ブタ精子頭部におけるcAMP依存性細胞内カルシウム濃度上昇に及ぼすPKA 阻害剤の影響口頭発表（一般）
- 平成17 年度（第55 回）関西畜産学会大会(関西畜産学会報Vol. 157, 20), 2005年09月, 日本語, 関西畜産学会, 松山, 国内会議ブタ精子の後帽部におけるcAMP依存的な糖鎖およびリン酸化タンパク質の変化口頭発表（一般）
- 8th International Congress of Andrology (Int. J. Androl., Vol. 28(Suppl. 1), 79), 2005年06月, 英語, International Society of Andrology, Seoul, Korea, 国際会議Low progressive motility, low PKA activity and premature capacitation of frozen-thawed spermatozoa from subfertile bullsポスター発表
- 8th International Congress of Andrology (Int. J. Androl., Vol. 28(Suppl. 1), 78), 2005年06月, 英語, International Society of Andrology, Seoul, Korea, 国際会議A cyclic AMP-dependent tyrosine phosphorylation of phospholipase C in boar spermatozoa口頭発表（一般）
- 日本畜産学会第104 回大会(講演要旨集、124), 2005年03月, 日本語, 日本畜産学会, 東京, 国内会議マウス精子におけるcAMP シグナリング経路の解析口頭発表（一般）
- 日本畜産学会第104回大会(講演要旨集、124), 2005年03月, 日本語, 日本畜産学会, 東京, 国内会議ブタ精子のcAMP依存的チロシンキナーゼによるホスホリパーゼCγ1 の活性化口頭発表（一般）
- 第82回日本養豚学会大会, 2004年10月, 日本語, 日本養豚学会, 家畜改良センター, 国内会議ブタ精子チロシンキナーゼSYKの活性化はカルシウム非依存性cAMPシグナリングにより制御される口頭発表（一般）
- 第97回日本繁殖生物学会大会, 2004年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 広島, 国内会議ブタ精子の非受容体型チロシンキナーゼSYKにおけるcAMP依存的活性化ポスター発表
- 第97回日本繁殖生物学会大会, 2004年09月, 日本語, 日本繁殖生物学会, 広島, 国内会議キャパシテーション過程のブタ精子におけるPKA基質タンパク質のリン酸化口頭発表（一般）
- 第11回日本胚移植研究会大会, 2004年08月, 日本語, 日本胚移植研究会, 松山, 国内会議ウシ体外受精卵母細胞の核膜形成ならびにヒストンH3の脱リン酸化状態による前核形成異常の検出口頭発表（一般）
- The American Society of Andrology, 29th Annual Meeting., 2004年04月, 英語, The American Society of Andrology, USA, Baltimore, 国際会議cAMP-induced increase of 32-kDa tyrosine-phosphorylated protein (TyrP32) is related to the calcium-dependent disintegration of the acrosome in boar sperm.ポスター発表
- 日本畜産学会第103回大会, 2004年03月, 日本語, 日本畜産学会, 東京農工大学, 国内会議ウシ受精卵母細胞におけるLys9でメチル化されているヒストンH3の局在性口頭発表（一般）
- 日本畜産学会第103回大会, 2004年03月, 日本語, 日本畜産学会, 東京農工大学, 国内会議cAMPによりブタ精子で誘起されるTyrP32の増加および先体崩壊におけるカルシウムの役割口頭発表（一般）
- 第27回日本分子生物学会年会, 2004年, 日本語, 日本分子生物学会, 未記入, 国内会議ウシ受精ならびに活性化卵母細胞におけるLAP2βの局在とその凝集時期口頭発表（一般）
- The AmericanSociety of Andrology 28th Annual Meeting,, 2003年, 英語, 未記入, Washington. DC, 国際会議Viability and protein phosphorylation state of boar sperm undergoing cAMP analogue-induced head-to-head agglutination口頭発表（一般）
- Theriogenology, 2003年, 英語, 未記入, 未記入, 国際会議Localization of LAP2beta in oocytes and embryos during early development in cattle, The Annual Conference of the International Embryo Transfer Society口頭発表（一般）
- 36th Annual Meeting of the Society for the Study of Reproduction, 2003年, 英語, 未記入, 未記入, 国際会議Behavior of chromatins in pronuclei in the cattle and mouse口頭発表（一般）
- 関西アンドロロジーカンファレンス
- 関西生殖医学集談会
- 精子研究会
- 日本生殖医学会
- The Society for the Study of Reproduction
- 関西畜産学会
- 日本アンドロロジー学会
- 日本繁殖生物学会
- 日本畜産学会
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(C), 大阪公立大学, 2024年04月01日 - 2027年03月31日ウシの生殖子成熟・受精・胚発育におけるINSL3の役割と情報伝達系の解明
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(C), 神戸大学, 2022年04月 - 2025年03月ウシでの人工授精成績を向上させるための新規の精子鞭毛機能検査法の確立と普及
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(C), 大阪府立大学, 2021年04月 - 2025年03月雌ウシのINSL3分泌動態および生殖器・生殖細胞における受容体発現と役割の解明2021年度は、１）ウシの発情周期の主席卵胞と黄体および卵胞嚢腫のINSL3分泌能を調べることを目的とし、主席卵胞と嚢腫卵胞の卵胞液および黄体組織のINSL3と性ステロイド（テストステロン、エストラジオール-17β、プロジェステロン）量を解析するとともに、培養黄体細胞からのINSL3とプロジェステロンの分泌能を分析した。同時に、２）正常雌ウシと卵胞嚢腫牛の血中INSL3濃度の動態を解明するために、雌ウシの血中INSL3濃度を測定できるサンドイッチ時間分解蛍光免疫測定（TRFIA）法の開発に取り組んだ。 １）については、食肉処理場において雌ウシの卵巣を採取し、発情周期中の主席卵胞の卵胞液と黄体の黄体組織のINSL3と性ステロイド量を測定した。その結果、主席卵胞のINSL3分泌はその成熟にともなって増加することが示唆された。卵胞のテストステロンとエストラジオール-17β量は卵胞の嚢腫化により低下するが、INSL3量は増加することが示唆された。黄体組織のINSL3とプロジェステロン含量はその開花期に増加することが示された。一方、黄体から黄体細胞を分離して培養し、培養液のINSL3濃度を測定した結果、INSL3分泌能は開花期に上昇するが、その分泌は黄体形成ホルモン（LH）に依存しないことが示された。 ２）については、サンドイッチTRFIA法に必要な検出用の抗ウシINSL3ペプチド抗体を作成し、そのビオチン標識を実施した。さらに補足用ウシINSL3抗体、ウシINSL3標準品、ビオチン標識検出用抗体およびユーロピウム標識ストレプトアビジンを用いてサンドイッチTRFIAの測定法の諸条件の検討を行った。その結果、最小検出濃度が0.1 ng/mLの高感度測定法を確立することができた。雌ウシ血漿サンプルを本法で測定したところ、血中INSL3濃度を無抽出で測定できることが判明した。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(B), 2020年04月 - 2024年03月融合因子SOFの機能解析を通した精子－卵子の細胞膜融合機構の解明sperm-oocyte fusion required (SOF)2～3を特異的に認識する抗体を得ることができなかったが、バックアッププランとして作製していたSOF2や3のC末端側にアフィニティータグを融合させたタンパク質を発現するトランスジェニックマウスを用いて、免疫染色法によりSOF2や3が先体反応後の精子頭部に局在することを明らかにできた。さらに、IP/MS解析によりSOF2や3と相互作用する因子の同定にも成功した。そこで、マウスの心臓、肝臓、脾臓、腎臓、脳、精巣、卵巣、および子宮を採取し、得られた各組織由来のcDNAを使ってPCRを行ったところ、これらの遺伝子は精巣や精巣上体で発現することが明らかになった。
正常および低繁殖症を示す雄ウシの生殖細胞（精巣や成熟精子など）を採取して、ウェスタンブロティングを行ったところ、両者の間で差がある受精関連遺伝子を見出した。
マウス既知融合関連遺伝子の機能が種を超えて保存されているかを調べる目的で、他動物種の融合関連遺伝子を発現するトランスジェニックマウスの作製に成功した。 - 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 挑戦的研究(萌芽), 挑戦的研究(萌芽), 神戸大学, 2019年06月 - 2021年03月, 研究代表者ウシ精子の鞭毛機能の評価基準の見直しを目的とした3次元ローテーション運動の解析本研究では，ウシ凍結保存射出精子用の鞭毛機能検査法の評価項目（新規候補）「3次元ローテーション」について，発生機構の解明，生物学的な位置づけ，および利用の検討を行い，次の成果を得た。 （1.発生機構）凍結保存に伴う3次元ローテーションの発生に，頸部細胞内Ca2+ストアのタプシガルギン感受性Ca2+ポンプにおける機能の低下，およびそれに伴う細胞内Ca2+濃度の上昇が関与することを示した。（2.位置づけ）3次元ローテーションが受精能獲得途上の精子で観察される運動様式であることを示唆した。（3.利用）鞭毛機能検査法での新規の評価項目として3次元ローテーションが有用である可能性を示した。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 岐阜大学, 2017年04月 - 2020年03月, 研究分担者コレステロールによるブタ夏季不妊症精子の治療効果メカニズムの解明豚の夏季不妊症では，夏季に精子の受精能獲得が時期尚早に発現し，タイムリーに受精に関与できなくなることにより受胎性が低下することが示唆されている．先行研究では，精液の冷蔵保存中にコレステロールを添加することにより，時期尚早の受精能獲得発現を減少させることが示されているが，その機序が未解明であったので，本研究では，この解明を目的としている．昨年度は保存後カルシウムイオノホアにより誘起した先体反応進行中におけるシグナル分子である cAMP とジアシルグリセロール（DAG）の変化を解析していたが，シグナル分子として DAG の分離と定量を行ったところ，未知のバンドが検出されたので，分離方法の再検討を行った．本年度は，分離方法（展開溶媒及び展開方法）を改善し問題を解決した． 一方，豚精子の夏季における時期尚早の受精能獲得を緩和する目的で，コレステロール以外の物質を検討した結果，硫酸マグネシウムあるいは塩化マグネシウムを保存中あるいは保存後洗浄した精子へ添加した場合，カルシウムイオノホアにより誘起された先体反応を遅延させることが明らかになった．また，同様に受精能獲得を遅延させることのできる物質の候補としてカルモジュリンやタンパクキナーゼCの阻害剤であるポリミキシンBを保存中あるいは保存後洗浄した精子へ添加した結果，カルシウムイオノホアにより誘起された先体反応は逆に増強された． 本年度は cAMP アナログである cBiMPS により誘起したハイパーアクチベーションへ及ぼす保存中のコレステロール添加の影響に関する検討目的としていたが，比較の目的で牛凍結融解精子を用いて，cBiMPS によるハイパーアクチベーション誘起を行ったところ，誘起率が低い個体の存在することが明らかとなった．このことから，豚精子のハイパーアクチベーション誘起においてサンプル間の差を考慮に入れる必要があると思われた．
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 神戸大学, 2016年04月 - 2019年03月, 研究代表者ウシ凍結前精子の耐凍能判定法の確立を目的としたSPACA1タンパク質の解析と利用本研究の目的は，ウシ凍結前精子の先体耐凍能判定法を確立すること，およびこの判定法を普及させるための基盤づくり（技術的信頼性の構築）であった。本研究での取り組みにより，SPACA1タンパク質の分布状態を指標とするウシ（黒毛和種）新鮮射出精子の耐凍能判定法を開発した。またSPACA1タンパク質の分布異常は精巣上体の通過時における精子の成熟変化の不全と関連すること，およびSPACA1タンパク質の正常分布率の低い凍結保存精子を人工授精に使用した際の雌ウシの低受胎は精子の受精能力の低さに起因することを示唆した。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 岐阜大学, 2014年04月 - 2017年03月, 研究分担者ブタ夏季不妊症精子の発症要因解析と新規治療法の開発夏季にブタ精子の先体反応が過敏誘起される原因の一つは精子内cAMP 濃度 （[cAMP]i ）が上昇することであると思われた．希釈液へのコレステロール添加あるいは希釈液からの重炭酸除去は冷蔵保存した精子の[cAMP]i に影響しなかった．コレステロール添加が先体反応を遅延する機序は，反応進行中である可能性が考えられた．マグネシウムの添加は先体反応を濃度依存的に低下させた．FITC-PNA 染色の方法に改良を加えた． 脂肪幹細胞の存在下で前培養した精子は体外受精能力が上昇した．今後コレステロール，マグネシウムおよび脂肪幹細胞が夏季不妊症精子の治療へ応用される可能性が切り開かれた．
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(B), 基盤研究(B), 神戸大学, 2013年04月 - 2016年03月, 研究分担者ブタ着床前発生胚におけるシーリングタンパク質クローディンの発現性と胚の発生能ブタ胚盤胞はclaudin-1, -4, -6, -7, -8, -9, -12, -14を発現し，claudin-4, -6, -7はTJ上に，他のclaudinsは細胞質性のTJ異所性に分布しており，ブタ胚盤胞には claudin-4, -6, -7が重要である。claudin-1, -4のKDは初期分割率を著しく低下させることが分かった。 claudinsの発現変化から胚の潜在的発生能力を評価するための基礎データとして，ブタ着床前発生によるグルコースの代謝特性を調べ，糖質代謝特性は4細胞前後で異なること，ヘキソース生合成経路とGlcNAc修飾が着床前発生に重要な役割を持つことが分かった。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 神戸大学, 2013年04月 - 2016年03月, 研究代表者受精能力制御因子で派生する欠陥分子をマーカーとする家畜精子の分子性状検査法の開発本研究の目的は，家畜の人工授精で雌を受胎させにくい精子を産生する雄個体（低繁殖症雄個体）を正確に選び出すための新しい精子分子性状検査法の開発であった。本研究での取り組みにより，ウシ（黒毛和種）の凍結保存精子および新鮮射出精子における先体チロシンリン酸化タンパク質の分布状態を指標とする検査法の開発に成功した。またこの検査法により人工授精および体外受精での成績を予測できることを示した。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究, 挑戦的萌芽研究, 神戸大学, 2011年 - 2012年, 研究代表者ブタおよびマウスの精子の育て直し処理による体外保存耐性の強化哺乳類精子の耐凍性には大きな動物種間差が存在する。ウシでは精子の高い耐凍性により,産子生産のための人工授精プログラムに凍結精液を利用できる。本研究では,ウシ精子に高い耐凍性をもたらす精巣上体成熟に伴う精子細胞膜の安定化の分子メカニズムを示唆した。また,この分子メカニズムに基づき精子の耐凍性を向上させるための体外培養系の開発を試みた。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 岐阜大学, 2009年 - 2011年, 研究分担者ブタの夏季不妊症を引き起こす精子の受精機能不全に対する臨床的治療法の開発夏季に悪化するブタ精液性状を改善し,年間を通して安定的な精液の供給およびひいては安定的な豚肉生産を確保するための方法を開発することを目的として,ブタにおける希釈液の改良および比較の目的でウシ凍結融解精子の性状を検査する新規方法の開発とその受精能力を上昇させる方法を検討した.その結果,改良したブタ希釈液により受胎率が上昇し,ウシ精子の新規検査法を見いだし,また,ウシ精液の凍結に使用する希釈液を改良することにより精子機能の改善が可能であった.
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 神戸大学, 2008年 - 2010年, 研究代表者家畜の雄性不妊症を引き起こす精子の受精機能不全に対する分子標的治療法の開発家畜繁殖の最初のステップである体内受精が成功するためには,精子は正確なタイミングで受精能力を発現しなければならない。本研究では,家畜の雄性低繁殖症を引き起こす時期尚早な精子の受精能力の発現を分子レベルで抑制するための有効なターゲットを,細胞内情報伝達系や糖代謝制御系の中核分子に見出した。また雄性低繁殖症雄個体由来の精子での構造的脆弱性にタンパク質のチロシンリン酸化不全が関与することを示唆した。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 神戸大学, 2006年 - 2007年, 研究代表者精子鞭毛の超活性化運動能力を指標とした黒毛和種の繁殖能力評価法の開発H18年度検討内容(1):様々な濃度のcBiMPSを含むBO-H液に精子を浮遊させ,38.5℃で1〜3時間インキュベートしたところ,0.1mM cBiMPS添加およびインキュベーション3時間が好適で,37%の精子で鞭毛超活性化運動(HA)が誘起された。この結果はcAMPシグナリングを活性化することにより黒毛和種精子で効率的にHAを誘起できることを実証している。 H18年度検討内容(2)と(3):上述の好適条件で処理した精子では少なくとも9種類のタンパク質でcAMP依存的なチロシンリン酸化(pY)反応が認められたが,pYの程度はブタ精子よりかなり低レベルであった。また黒毛和種精子ではcAMP-PKA-SYKシグナリングは検出されなかったが,これとは別にcAMP-FAK様pYタンパク質シグナリングが存在することを指摘した。以上の結果は,黒毛和種精子でのHAがブタ精子とは異なる細胞内シグナリングにより制御されることを示唆している。 H19年度検討内容(1):岐阜県産低繁殖症個体の精子ではcBiMPSに対する反応(HAへの変化途上の運動様式円運動の発現)に明瞭な遅延が見られ,この遅延を調べることで個体の繁殖能力を予測できる可能性を見出した。他方,兵庫県産低繁殖症個体の精子では上述の遅延現象を見出せなかったが,精子の運動保持性が繁殖能力評価法の生物学的指標となりうることを示唆した。 H19年度検討内容(2):高HA精子では105kDaと130kDaのpYタンパク質が対照区(中HA精子)よりも有意に高い強度で検出された。また,94kDapYタンパク質も高HA精子でより強く検出される傾向にあった。つまり,これらのpYタンパク質は繁殖能力評価法の生化学的指標になりうる分子である。なお94kDapYタンパク質は鞭毛主部に分布するFAK様タンパク質として同定した。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 神戸大学, 2004年 - 2005年, 研究代表者ブタ胚生産システムの確立を目的とした精子受精能力発現の人為的抑制法の開発1.cAMP依存性PTKの同定:精子の頚部と鞭毛主部ではSYKがcAMP-PKAシグナリング依存的に活性化されることを見出した。この活性化機構はリンパ球での機構と全く相違することから,精子SYKの活性化は新規の機序により制御されていると考えられる。 2.SYKの活性化と精子受精能力発現状態との相関性の観察:活性化型SYKが出現するcAMPアナログ処理2〜3時間後の精子では超活性化運動の発現が認められた。超活性化運動は精子の卵母細胞への侵入に必要な推進力を生み出すという事実を考え合わせると,SYKは精子の受精能力発現制御因子のひとつといえる。 3.精巣SYKのcDNA配列解析:精巣cDNAを鋳型として増幅したPCR産物(590塩基)は脾臓由来syk遺伝子のC末端触媒領域の配列と完全に一致した。これは精巣でSYKが産生されることを実証している。 4.精子SYK基質分子の特定と機能解析:精子SYKの基質分子はPLCγ1であった。SYKは自身のY352をcAMP依存的にリン酸化することでPLCγ1と結合可能となり,その後にPLCγ1に対してY783をリン酸化することで活性化を誘起することを示した。また,U-73122によるPLCγ1活性の化学的阻害は鞭毛での受精能力の過剰発現の抑制に有効なことを見出した。 5.PLCγ1ペプチド断片の精子への導入法の検討:2種類の市販キットを用いて検討したが,いずれも試薬や導入操作に精子の運動を低下させる要因が存在し,本研究の条件を満たすペプチド導入法を見出せなかった。 6.SYK-PLCγ1以外の精子受精能力発現制御因子の特定と機能解析:cAMP-PKAシグナリングの下流因子としてPKCが見出された。またPKC活性をRo-32-0432で化学的に阻害することで,鞭毛での受精能力過剰発現を適度に抑制できることを明らかにした。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(B), 基盤研究(B), 神戸大学, 1999年 - 2001年, 研究分担者ブタ精子の受精能獲得過程におけるAnti-Agglutininの動態および機能本研究では,1.受精能獲得に伴う精子結合Anti-Agglutinin(AA)の動態,2.AAの精製方法の検討ならびに媒液へのAA含有精漿成分の添加が精子の受精能獲得に及ぼす影響,および3.精子の頭部間凝集を制御する細胞内情報伝達経路の3テーマについて検討し,テーマ1および3において有意義な結果が得られた。本要約ではこれらの2テーマの概要を示す。 受精能獲得誘起処理に伴う精子結合AAの変化を観察した。ウエスタンブロッティングにより検出されたAAをデンシトメーターで解析したところ,精子結合AAは処理開始当初の45分間で処理前の試料の約半分まで減少したが,その後の減少は緩慢であった。間接蛍光抗体法による観察結果によると,処理に伴う精子結合AAの減少は精子頭部の先体において認められた。以上の結果から,精子結合AAの多くは受精能獲得過程の初期段階において精子先体から解離することが明らかになった。 精子での頭部間凝集反応において炭酸水素イオン・アデニール酸シクラーゼ(AC)・cAMP・タンパク質キナーゼ(PK)系が果たす役割について頭部間凝集アッセイにより検討した。試料に100μM forskolin(AC活性化剤)を添加した場合の凝集精子率は対照区と比べて有意に高い値であった。またforskolinの代りにPKA活性化剤のdbcAMP(1〜1,000μM)を添加すると,凝集精子率は濃度依存的に有意に上昇した。しかしながら,dbcAMP(1,000μM)とともに,PKA阻害剤のRp-cAMPS(1,000μM)またはH-89(5μM)を添加すると,dbcAMPの作用により上昇した凝集精子率は優位に低下した。以上の結果から,炭酸水素イオン・AC・cAMP・PK系は精子の頭部間凝集を制御する細胞内情報伝達経路として機能すると考えられる。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 奨励研究(A), 奨励研究(A), 神戸大学, 1999年 - 2000年, 研究代表者ブタ精子のキャパシテーション過程での頭部間凝集に及ぼすカルシウムの影響実験1.カルモジュリン(CaM)の役割:既報(Chan and Dukelow,1985;Leclerc et al.,1990,1992)によると,精子におけるCaM濃度およびCaMの特異タンパク質への結合性はキャパシテーションとともに低下することから,CaMはキャパシテーションに抑制的に作用していると推察されている.そこで,本研究では成分からキャパシテーション誘起因子を除去した媒液中で精子をインキュベートした際のCaM阻害剤の影響について検討した.予備実験においてCalmidazoliumとTrifluoperazineを用いたが,これらの薬剤は精子に対する毒性が強く,本実験での使用には不適切であった.そこで,比較的毒性の低かったW7(5〜10μM)を用いたところ,頭部間凝集精子率は著しく上昇した.この結果から,CaMは精子の頭部間凝集に抑制的に作用していると考えられる. 実験2.電位依存性カルシウムチャンネル(VDCCs)の役割:昨年度の研究において10〜100μMの濃度では精子の頭部間凝集に有意な抑制作用を示さなかったL型VDCCs阻害剤のNifedipineとNitrendipineをより高い濃度(1mM)で添加したところ,頭部間凝集率は有意に低下した.他方,T型VDCCsの役割については,予備実験で精子に対する毒性が比較的少ないことが判明した阻害剤のPimozideとAmiloride(いずれも0.1〜10μM)を用いて検討したが,いずれも凝集精子率に有意な変動は認められなかった.以上の結果から,精子の頭部間凝集の発生においてVDCCsが機能している可能性が示唆されたが,L型阻害剤で抑制効果が認められた濃度は1mMと高く,またT型阻害剤(0.1〜10μM)には効果が認められなかったことから,VDCCsの種類を特定するには至っていない.
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(B), 基盤研究(B), 神戸大学, 1997年 - 1999年, 研究分担者ブタ活性化卵子の初期発生能ならびに単為発生胚の初期胚特異タンパク質の発現性電気刺激により高率に活性化したブタ単為発生2倍体を用いて,1.ブタ初期胚の培養系を確立するために,浸透圧,アミノ酸の胚盤胞への発生に及ぼす影響,2.単為発生2倍体の体内発生限界と単為発生胎子の生産効率,3.ブタにおけるインプリント侯補遺伝子の単為発生胎子における発現性の3点について検討し,以下の点について明らかにした。 1.(1)全培養期間同一の培地を使用する場合,等浸透圧系培地(309mOsm)では,コンパクションならびに胚盤胞形成が阻害され,低浸透圧(256mOsm)系培地の方が適している。これはNa+/K+比の問題ではなく,たんに浸透圧の影響である。(2)活性化48時間までは,逆に等浸透圧系(280〜320mOsmol)の方が分割率が高く,72時間以降は低浸透圧(220〜270mOsmol)の方が適している。(3)培養液に含まれるウシ血清アルブミン(BSA)を合成高分子化合物の0.5mg/ml以上のポリビニルアルコール(PVA)に置換しても,胚盤胞までの発生率はBSAと同等であるが,拡張胚盤胞に発生する胚はPVAでは有意に低い。(4)必須(EA)ならびに非必須(NEA)アミノ酸の混合液(AA)を培養の初めから添加すると著しい。4-細胞ブロックが誘起され,無添加より発生率が低い。これはEAの添加が原因で,NEAはEAの4-細胞ブロックを緩和する。 2.(1)ブタ単為発生体は,体内で着床初期の25日齢胎子までの高い発生能力(41%)を示すが,発育遅延,小頭,尿嚢発育遅延などの異常が認められる。(2)28〜29日齢に流産が起こりやすく,体内での発生限界は30日付近である。(3)NMR画像により,頭部に泡状構造の存在が示唆されている。 3.25日齢の2倍体単為発生胎子におけるインプリント候補遺伝子の発現性を検討した結果,(1)マウスやヒトで明らかになっている大部分のインプリント関連遺伝子の配列が,ブタでは不明なことから,PCR用プローブを検討した結果,p57KIP2,PEG1/MEST,SNRPN,H19の4つの遺伝子においてブタ正常胎子からの増幅産物が得られる。(2)配列既知のIGF2,IGF2R,WT1ならびに上記の4つの遺伝子について,ノーザンハイブリダイゼーションと半定量的PCR法により正常と単為発生胎子で比較したところ,IGF2は単為発生で発現量がかなり低く,父性発現を示唆し,p57KIP2では同等であることから,母性発現,もしくは非インプリントを示唆している。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(B), 基盤研究(B), 神戸大学, 1997年 - 1999年, 研究分担者ブタ未発育卵母細胞からの胚生産技術の開発に関する研究本研究は,ブタ卵巣内に存在する多数の未発育卵母細胞を体外培養により発育させ,成熟卵母細胞として有効に利用する技術を開発する目的で行われた。屠体または生体から得たブタ卵巣を用い,それより採取した卵胞をコラーゲンゲルに包埋し,ウシ胎児血清,FSH,エストラジオールを含むウエイマス培地を基本培地として発育培養を行った。ついで,卵胞から卵母細胞-卵丘細胞複合体を切り出し,成熟培養と体外受精に供した。得られた主な結果は,次の通りである。 直径75μm以下の卵母細胞を体外で発育させるべく,発育培地の組成の改変をいくつか試みたが,いずれの培地においても有意な効果を得るにはいたらなかった。卵母細胞のサイズと発育・成熟・受精能力の関係については,受精卵子を得るための最小サイズは,本研究の発育培養条件を用いる限り,90μm前後であると推定された。また,卵母細胞の体外発育においては卵母細胞と顆粒膜細胞との相互作用が重要な働きをすることも明らかにされた。卵胞腔形成については,初期胞状卵胞から切り取った卵母細胞-卵丘細胞-顆粒膜細胞複合体であっても,コラーゲンゲルに包埋してFSHの存在下で培養すれば,再構築されること,その間に顆粒膜細胞内のcAMP含量が増加することや,培地にdbcAMPを加えても卵胞腔形成が誘起されるが,エストラジオール-17 βは無効であることなどを明らかにし,FSHの刺激によって顆粒膜細胞内で合成されたcAMPが顆粒膜細胞の増殖,形態変化,さらには卵胞液の分泌を促し,卵胞腔が形成されると結論した。さらに,卵母細胞の減数分裂再開過程においてcdc2キナーゼとMAPキナーゼの活性化が起こることや,cdc2キナーゼあるいはカゼインキナーゼを阻害すると,減数分裂の再開が起こらないことなどを明確にした。MPF活性の阻害因子であるweelキナーゼ活性は,卵母細胞が最大サイズになると急激に上昇するが,第二減数分裂中期で再び低下する。また,減数分裂過程におけるγ-tubulin,nuclear mitotic aparatus protein(NuMA)の局在,受精の過程でサイクリンB1の分解がMAPキナーゼの脱リン酸化に先立って起こることなど,興味ある基礎的知見が得られた。これらは,卵母細胞の発育-成熟培養系の開発に大きく寄与する貴重な資料と考えられる。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 奨励研究(A), 奨励研究(A), 神戸大学, 1997年 - 1998年, 研究代表者Anti-Agglutinin出現機序の生化学的および免疫組織学的解析3頭の成熟雄ブタから採取した精巣上体を頭2部位,体2部位および尾1部位の合計5部位に区分し,パラホルムアルデヒド固定,凍結およびクリオスタットによる薄切の後に各部位でのAnti-Agglutininの分布を免疫組織学的に観察した。その結果,はじめてAnti-Agglutininが検出されたのは精巣上体の体近位部で,精巣上体管の上皮と管腔内容物の両方において認められた。また,精巣上体体遠位部においてもほぼ同様の検出結果が得られた。さらに,精巣上体尾の管腔内容物においてもAnti-Agglutininは検出されたが,管上皮にはほとんど認められなかった。他方,3頭の成熟雄ブタから12種類の臓器(精巣上体,精巣,精のう腺,前立腺,心臓,肝臓,腎臓,脾臓,胃,小腸,肺および筋肉)を採取し,臓器組織の一部を1mMAPMSF,1mMEDTAおよび1%TritonX-100添加リン酸緩衝生理食塩水中でホモジネートにした後,そのホモジネートを用いてSDSポリアクリルアミドゲル電気泳動およびウエスタンブロッティングを行ったところ,Anti-Agglutininが検出されたのは精巣上体のみで,中でも精巣上体体において最も強い反応が得られた。以上の結果から,精巣上体においてAnti-Agglutininを生産および分泌する部位は体であると考えられる。なお,精巣上体管腔内に分泌されたAnti-Agglutininの一部は精子の先体と結合することを細胞免疫学的手法により合わせて明らかにした。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業 奨励研究(A), 奨励研究(A), 神戸大学, 1996年 - 1996年, 研究代表者精巣上体液中の精子頭部間凝集抑制タンパク質を修飾する糖鎖の特性解析1.研究実績の概要:哺乳動物の精巣上体における精子の成熟変化のひとつである頭部間凝集性低下の分子機構を明らかにする目的で、精子頭部間凝集抑制タンパク質(Anti-Agglutinin:以下AAとする)を修飾する糖鎖の特性を解析し、以下の結果を得た。 2.糖鎖修飾の違いがAAの精子への結合性に及ぼす影響:AAにおいて、分子不均一性が精子への結合性に大きく影響するが、この分子不均一性の原因を明らかにする目的で、精巣上体尾液(30μg)を尿素存在下で2次元電気泳動した後、レクチンブロッティング法に従ってコムギ胚芽凝集素(WGA)との反応性について調べた。その結果、精子との結合性を備える等電点5.8のスポットはWGAと反応したが、精子と結合しない等電点5.6および5.95のスポットは反応しなかった。従って、糖鎖のシアル酸化の有無が分子不均一性の一因であり、また精子への結合性に影響すると考えられる。 3.修飾糖鎖の分子量測定:AAからGlycoFree-Kitを用いて糖鎖を完全に除去し、その際の分子量の変化をMALDI-TOF-Mass Spectrometric Analysisにより測定したところ、無処理のAAは分子量18900-19600においてブロードしたピークとして検出されたが、糖鎖除去後の試料は最高700小さい分子量においてシャープやピークを示した。このことから、総分子量で700以下の糖鎖がAAを修飾しており、その修飾糖鎖は多種類存在すると考えられる。 4.脱シアル酸がAAの生理活性に及ぼす影響:ノイラミニダーゼ(0.5U/ml)を用いて脱シアル酸化したAAを洗浄精子浮遊液に添加し37℃で5時間インキュベートしたところ、AAの精子凝集抑制作用は若干低下する傾向を示した。
研究シーズ
■ 研究シーズ- 家畜精子の受精制御分子の探索と利用シーズカテゴリ：環境・農学研究キーワード：畜産 人工授精 黒毛和種 精子研究の背景と目的：家畜（ウシおよびブタ）精子の受精メカニズムの解明を目的とし、家畜精子の受精を制御する分子を探索しています。また発見された受精制御分子をマーカーとして利用する「精子機能の精密検査法」を開発することで、家畜の繁殖成績（人工授精の受胎率）を向上させることを目指しています。研究内容：受精制御分子の探索：家畜精子には部位特異的な環状アデノシン1リン酸（cAMP）シグナル伝達経路が存在し、受精を制御していることを明らかにしました。またウシ精子では頸部のプロテインホスファターゼがcAMPシグナル伝達経路の調節に重要な役割を果たすことを見いだしました。 精子機能の精密検査法の開発：精巣上体での成熟とともに先体に配置されるチロシンリン酸化型Sperm associated 1（SPACA1）タンパク質をマーカーとする精子機能の精密検査法をウシにおいて確立しました。すなわち、この検査で不合格となったウシは低繁殖能力個体（凍結保存精子を用いた人工授精での成績が低い個体）と判別できます。また精密検査法のマーカーとして利用可能な分子として、mRNAのスプライシングエラーによりcAMPの合成能力が低下した異常型アデニル酸シクラーゼ10をウシ精子で見いだしました。
期待される効果や応用分野：家畜の繁殖（人工授精）成績および生産性を飛躍的に向上させることで、食肉や乳畜産製品の供給体制の改善に貢献できると期待しています。関係する業績：Harayama et al. Protein biomarkers for male artificial insemination subfertility in bovine spermatozoa. Reprod Med Biol. 2017 20;16(2):89-98. doi: 10.1002/rmb2.12021