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佐伯 圭一大学院農学研究科 資源生命科学専攻准教授
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■ 論文- Public Library of Science (PLoS), 2022年04月, PLOS ONE, 17(4) (4), e0261802 - e0261802研究論文(学術雑誌)
- 2017年03月, JOURNAL OF VETERINARY MEDICAL SCIENCE, 79(3) (3), 644 - 648, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2017年01月, JOURNAL OF VETERINARY MEDICAL SCIENCE, 79(1) (1), 100 - 107, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2015年, FEBS OPEN BIO, 5, 445 - 453, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2011年09月, JOURNAL OF VETERINARY MEDICAL SCIENCE, 73(9) (9), 1195 - 1197, 英語Development of a New Selective Medium for Isolation of Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2009年05月, LIFE SCIENCES, 84(19-20) (19-20), 678 - 687, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2008年08月, Bull Soc Fr-Jpn Biol, 45/46, 37, 日本語正常プリオン蛋白質におけるアポトーシス抑制機能部位に関する研究
- 2008年05月, EXPERIMENTAL PARASITOLOGY, 119(1) (1), 80 - 86, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2007年03月, Parasitol Int., 56(3) (3), 231 - 234, 英語Accumulation of macrophages expressing MRP8 and MRP14 in skin lesions during Leishmania major infection in BALB/c and RAG-2 knockout mice.[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2007年02月, Int. J. Mol. Med., 20(2) (2), 169 - 176, 英語Late-onset olfactory deficits and mitral cell loss in mice lacking prion protein with ectopic expression of Doppel.[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2007年02月, Int. J. Mol. Med., 20(2) (2), 177 - 185, 英語Detection of proteolytic cleavages of diabetes-associated protein IA-2beta in the pancreas and the brain using novel anti-IA-2beta monoclonal antibodies.[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- Abnormal olfactory function caused by ectopic expression of Doppel in the olfactory bulb of prion protein-deficient mice.2007.2007年, Int. J. Mol. Med., 20, 169-176.
- Lack of alternations of IA-2β protevtive cleavages in non-obese diabetic (NOD) mice.2007.2007年, Int. J. Mol. Med., 20, 177-185.
- Neurotoxic prion protein (PrP) fragment 106-126 requires the N-terminal half of the hydrophobic region of PrP in the PrP-deficient neuronal cell line.The cytotoxicity of aged PrP(106-126) was examined using an immortalized prion protein (PrP) gene-deficient neuronal cell line. The N-terminal half of the hydrophobic region (HR) but not the octapeptide repeat (OR) of PrP was required for aged PrP(106-126) neurotoxicity, suggesting that neurotoxic signals of aged PrP(106-126) are mediated by this region.2007年, Protein and peptide letters, 14(1) (1), 1 - 6, 英語, 国際誌[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2007年, INTERVIROLOGY, 50(3) (3), 190 - 196, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- Serum withdrawal-induced apoptosis in ZrchI prion protein (PrP) gene-deficient neuronal cell line is suppressed by PrP, independent of Doppel.Previous studies have shown that cellular prion protein (PrP(C)) plays anti-apoptotic and antioxidative role against cell death induced by serum-deprivation (SDP) in an immortalized prion protein gene-deficient neuronal cell line derived from Rikn prion protein (PrP) gene-deficient (Prnp(-/-)) mice, which ectopically produce excess Doppel (Dpl) (PrP-like glycoprotein). To investigate whether PrP(C) inhibits apoptotic neuronal cell death without Dpl, an immortalized cell line was established from the brain of ZrchI Prnp(-/-) mice, which do not show ectopic expression of Dpl. The results using a ZrchI neuronal Prnp(-/-) cell line (NpL2) showed that PrP(C) potently inhibited SDP-induced apoptotic cell death. Furthermore, PrP(C) expression enhanced the superoxide dismutase (SOD) activity in NpL2 cells. These results indicate that Dpl production did not affect anti-apoptotic and anti-oxidative functions of PrP, suggesting that PrP(C) may be directly correlated with protection against oxidative stress.2007年, Microbiology and immunology, 51(4) (4), 457 - 66, 英語, 国際誌[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2006年05月, MINI-REVIEWS IN MEDICINAL CHEMISTRY, 6(5) (5), 589 - 601, 英語Recent advances in clarifying prion protein functions using knockout mice and derived cell lines[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2006年, Microbiol Immunol., 50(3) (3), 203 - 209, 英語Fusion of Doppel to Octapeptide Repeat and N‐Terminal Half of Hydrophobic Region of Prion Protein Confers Resistance to Serum Deprivation[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2006年, 医薬ジャーナル, 22, 49 - 54, 日本語BSEの分子生物学研究論文(学術雑誌)
- Bovine spongiform encephalopathy in Japan: history and recent studies on oxidative stress in prion diseases.With the respect to BSE and vCJD, compliance with the following three rules should strictly be observed: (i) Identification and destruction of all clinically affected cattle; (ii) destruction of all mammalian proteins used in feeding ruminant livestock; and (iii) destruction of all high-risk tissues for use in human consumption. Scrapie in sheep has been documented in the 18th century in the United Kingdom. Through studies of brain-to-brain transmission in the same species in 1935, Cuille et al. successfully isolated the culprit protein from the sheep brain. To transmit said protein from an animal to another, intracerebral inoculation was much more efficient than intraperitoneal or oral route in certain species; i.e. the hamster and mouse. Since discovery of the more efficacious infection route, studies and development of prion research have undergone 4 developmental phases. Phase I depicted discoveries of the pathological features of Creutzfeldt-Jakob disease (CJD) and scrapie with typical lesions of spongiform encephalopathy, while Phase II revealed individual-to-individual (or cross-species) transmissions of CJD, kuru and scrapie in animals. Phases I and II suggested the possible participation of a slow virus in the infection process. In Phase III, Prusiner et al. proposed the 'prion' theory in 1982, followed by the milestone development of the transgenic or gene-targeted mouse in prion research in Phase IV. By strain-typing of prions, CJD has been classified as type 2 or 4 by Parchi et al. and Wadsworth as type-2 or -4 and type-1 or -2, respectively. Wadsworth type 1 is detected in the cerebellum, while Wadsworth type 2 was detected in the prefrontal cortex of 10% of sporadic CJD patients. In 1999, Puoti et al. have reported the co-existence of two types of PrP(res) in a same patient. These reports indicated that PrP(res)-typing is a quantitative rather than a qualitative process, and the relationship between the molecular type and the prion strain is rather complex. In fact, previous findings of Truchot have correlated type-1 distribution with synaptic deposits, and type-2 with arrangement of diffuse deposits in neurons. Although the normal function of PrP(C) has not been fully understood, recent studies have shown that PrP(C) plays a role in copper metabolism, signal transduction, neuroprotection and cell maturation. Further search of PrP(C)-interacting molecules and detailed studies using Prnp(-/-) mice and various type of Prnp(-/-) cell lines under various conditions are the prerequisites in elucidating PrP functions. In the pathogenesis of prion diseases, present results support the hypothesis that 'loss-of-function' of PrP(C) decreases resistance to oxidative stress, and 'gain-of-function' of PrP(Sc) increases oxidative stress. The mechanisms of (i) the 'loss-of-function' of PrP(C) in enhanced susceptibility to oxidative stress and (ii) the 'gain-of-function' of PrP(Sc) in generation of oxidative stress remain to be elucidated, although their mechanisms of action, at least in part, involve the decrease and increase in SOD activity, respectively.2006年, Microbiology and immunology, 50(8) (8), 565 - 78, 英語, 国際誌[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2005年12月, EXPERIMENTAL AND MOLECULAR PATHOLOGY, 79(3) (3), 229 - 235, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 獣医生化学会, 2005年12月, 獣医生化学, 42, 19 - 23, 日本語正常型プリオンタンパクの抗-アポトーシス機能における構造的な機能中心の解析研究論文(学術雑誌)
- 2005年07月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 333(2) (2), 448 - 454, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2005年06月, JOURNAL OF NEUROSCIENCE RESEARCH, 80(6) (6), 887 - 894, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2005年06月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 332(1) (1), 75 - 82, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2005年05月, Biochem Biophys Res Commun., 328(1) (1), 14 - 19, 英語PrP cooperates with STI1 to regulate SOD activity in PrP-deficient neuronal cell line.[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2005年03月, Jpn J Infect Dis, 58(2) (2), 78 - 82, 英語Infection route-independent accumulation of splenic abnormal prion protein.[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2005年, Prions: Food and Drug Safety, 205 - 205, 英語Cellular prion protein suppressess the apoptotic cell death by mediating the intracellular H2O2 in primary culture and immortalized neuronal cells研究論文(国際会議プロシーディングス)
- 2005年, Prions: Food and Drug Safety, 203 - 203, 英語Cellular prion protein suppresses the apoptosis in a neuronal cell line established from type-1 prion protein gene-deficient mice研究論文(国際会議プロシーディングス)
- 2005年, 日本水産學會誌, 69(2) (2), 257 - 258, 日本語動物の検疫および水際対策 : 牛海綿状脳症(BSE)に関する防疫措置研究論文(研究会,シンポジウム資料等)
- 2005年01月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 326(3) (3), 600 - 606, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2004年10月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 323(1) (1), 218 - 222, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2004年07月, DIABETES, 53(7) (7), 1684 - 1691, 英語Targeted disruption of the IA-2 beta gene causes glucose intolerance and impairs insulin secretion but does not prevent the development of diabetes in NOD mice[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2004年04月, CELLULAR AND MOLECULAR NEUROBIOLOGY, 24(2) (2), 257 - 268, 英語Hyperbaric oxygen enhances the expression of prion protein and heat shock protein 70 in a mouse neuroblastoma cell line[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2004年, MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY, 48(1) (1), 7 - 13, 英語Effects of tacrolimus (FK506) on encephalomyocarditic virus-induced diabetes in mice[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2004年01月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 313(4) (4), 850 - 855, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2004年, MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY, 48(9) (9), 629 - 638, 英語Serum thymic factor prevents LPS-induced pancreatic cell damage in mice via up-regulation of Bcl-2 expression in pancreas[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2003年12月, JOURNAL OF GENERAL VIROLOGY, 84, 3495 - 3502, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2003年11月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 311(2) (2), 501 - 505, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2003年10月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 310(3) (3), 725 - 729, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2003年10月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 310(3) (3), 791 - 795, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2003年08月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 307(3) (3), 678 - 683, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2003年08月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 307(4) (4), 810 - 813, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2003年08月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 308(3) (3), 660 - 667, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2003年, 日仏生物学会誌, 43(1) (1), 英語神経内分泌組織におけるIA-2発現解析研究論文(研究会,シンポジウム資料等)
- 2003年, 最新医学, 58(5) (5), 1008 - 1013, 日本語動物のプリオン病[招待有り]研究論文(学術雑誌)
- スクレイピー (〔2002年〕12月第1土曜特集 プリオン蛋白関連疾患)2002.医歯薬出版, 2002年12月, 医学のあゆみ, 203(10) (10), 951 - 954, 日本語
- 2002年10月, 医学のあゆみ, 203(10) (10), 951 - 954, 日本語スクレイピー研究論文(学術雑誌)
- 2002年08月, MOLECULAR NEUROBIOLOGY, 26(1) (1), 1 - 12, 英語Molecular modulation of expression of prion protein by heat shock[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2002年06月, DIABETES, 51(6) (6), 1842 - 1850, 英語Targeted disruption of the protein tyrosine phosphatase-like molecule IA-2 results in alterations in glucose tolerance tests and insulin secretion[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2001年10月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 288(1) (1), 165 - 171, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2001年, Biochem. Biophys. Res. Commun., 282(1) (1), 103 - 107, 英語研究論文(学術雑誌)
- 2001年, Intervirology, 44(6) (6), 359 - 363, 英語[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2000年11月, DIABETOLOGIA, 43(11) (11), 1429 - 1434, 英語Genomic structure of mouse IA-2: comparison with its human homologue[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2000年07月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 273(3) (3), 890 - 893, 英語Analysis of prion protein mRNA by in situ hybridization in brain and placenta of sheep[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2000年04月, JAPANESE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES, 53(2) (2), 56 - 61, 英語Japanese scrapie cases[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2000年02月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 268(3) (3), 763 - 766, 英語Enhanced expression of cellular prion protein gene by insulin or nerve growth factor in immortalized mouse neuronal precursor cell lines[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 2000年, 日仏生物学会誌, 40(1) (1), 英語プリオンレスマウス不死化神経細胞におけるEMCV-Bの増殖研究論文(研究会,シンポジウム資料等)
- 1999年07月, NATURE, 400(6741) (6741), 225 - 226, 英語Prions prevent neuronal cell-line death[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 1999年, 日仏生物学会誌, 39(1) (1), 10 - 10, 英語膵島β細胞系MIN6のTNF-α誘発アポトーシスに対する血清胸腺因子(FTS)の効果[査読有り]研究論文(研究会,シンポジウム資料等)
- 1999年, ARCHIVES OF VIROLOGY, 144(10) (10), 2041 - 2049, 英語Difference in Bgp-independent fusion activity among mouse hepatitis viruses[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 1998年, Anim. Biochem, 35, 19 - 23, 日本語Expression of ovine PrPc mRNA by in situ hybridization.研究論文(学術雑誌)
- 1998年, CORONAVIRUSES AND ARTERIVIRUSES, 440, 77 - 80, 英語Differential receptor-functionality of the two distinct receptor proteins for mouse hepatitis virus研究論文(学術雑誌)
- 1998年, CORONAVIRUSES AND ARTERIVIRUSES, 440, 11 - 16, 英語Isolation and characterization of murine coronavirus mutants resistant to neutralization by soluble receptors研究論文(学術雑誌)
- 1997年12月, JOURNAL OF VIROLOGY, 71(12) (12), 9024 - 9031, 英語Identification of spike protein residues of murine coronavirus responsible for receptor-binding activity by use of soluble receptor-resistant mutants[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 1997年, Bull. Soc. Franco-Japonais Sci. Vet., 8(1) (1), 3 - 7, 英語Epidemiological analysis of ovine scrapie in Japan.研究論文(国際会議プロシーディングス)
- 1996年02月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 219(1) (1), 47 - 52, 英語Identification of a promoter region in the rat prion protein gene[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 1996年, VIRUS GENES, 12(1) (1), 15 - 20, 英語Three-exon structure of the gene encoding the rat prion protein and its expression in tissues[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 1995年11月, INTERVIROLOGY, 38(6) (6), 309 - 315, 英語Analysis of PrPc mRNA by in situ hybridization in brain, placenta, uterus and testis of rats[査読有り]研究論文(学術雑誌)
- 1995年, JOURNAL OF NEUROCHEMISTRY, 65, S101 - S101, 英語ESTABLISHMENT OF HIPPOCAMPAL CELL-LINES OF MICE HOMOZYGOUS FOR TARGETED DELETION OF THE PRN-P GENE研究論文(国際会議プロシーディングス)
- 1994年, Anim. Biochem, 31, 37 - 42, 日本語Molecular cloning of the prion protein cDNA and its gene expression in rat brain and immortalized neuronal cells.研究論文(学術雑誌)
- 1993年, CORONAVIRUSES, 342, 171 - 175, 英語FUSOGENIC PROPERTIES OF UNCLEAVED SPIKE PROTEIN OF MURINE CORONAVIRUS JHMV研究論文(国際会議プロシーディングス)
- (公社)日本獣医学会, 2019年08月, 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 162回, 401 - 401, 日本語日本国内で発見されたダニ媒介性オルビウイルス、ムコウイルスのリバースジェネティクス系の樹立
- (公社)日本獣医学会, 2012年08月, 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 154回, 254 - 254, 日本語テネイシンC欠損がおよぼすプリオン蛋白遺伝子発現への影響
- (公社)日本獣医学会, 2004年03月, 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 137回, 98 - 98, 日本語ZchI型(FVB/Prnp-/-)不死化神経細胞株の樹立および,PrPCのアポトーシス抑制能の解析
- (公社)日本獣医学会, 2004年03月, 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 137回, 98 - 98, 日本語正常型プリオン蛋白質による細胞内銅濃度維持
- 2004年, プリオン病及び遅発性ウイルス感染に関する調査研究 平成15年度研究報告書, 158 - 162, 日本語プリオン病及び遅発性ウイルス感染に関する調査研究 正常プリオン蛋白質のアポトーシス抑制機能に関する研究
- (公社)日本獣医学会, 2003年03月, 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 135回, 132 - 132, 日本語欠損変異プリオン蛋白を用いた正常型プリオン蛋白の機能解析
- (公社)日本獣医学会, 2002年03月, 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 133回, 100 - 100, 日本語アポトーシス抑制因子Bcl-2 family,Superoxide dismutase(SOD)遺伝子及びプリオン遺伝子の導入による不死化プリオンレス神経細胞死の解析
- (公社)日本獣医学会, 2001年09月, 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 132回, 51 - 51, 日本語プリオン研究の進展 アポトーシス抑制因子Bcl-2 family遺伝子の導入による不死化プリオンレス神経細胞死の解析
- (公社)日本獣医学会, 2001年03月, 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 131回, 76 - 76, 日本語アポトーシス抑制因子Bcl-2,Bcl-xL,Superoxide dismutase(SOD)遺伝子の導入による不死化プリオンレス神経細胞死の解析
- (公社)日本獣医学会, 2001年03月, 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 131回, 76 - 76, 日本語プリオン蛋白質(PrP)遺伝子欠損マウス及び神経細胞株におけるPrP様蛋白質(Dpl)遺伝子の発現
- (公社)日本獣医学会, 1999年03月, 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 127回, 93 - 93, 日本語リーシュマニア原虫を用いた哺乳動物遺伝子発現系の検討
- 監修, 聯經出版公司, 2015年04月, 中国語, 今天開始練菌!:與可怕又有趣的好菌壞菌和平相處今日から「菌トレ」! オソロしくてオモロい、菌とのくらし 中国語版一般書・啓蒙書
- 監修, 小学館, 2013年07月, 日本語, ISBN: 9784093883108今日から「菌トレ」!~オソロしくてオモロい、菌とのくらし~一般書・啓蒙書
- その他, 朝倉書店, 2007年05月, 日本語生体防御医学事典学術書
- 共著, 朝倉書店, 2001年09月, 日本語脳とプリオン―狂牛病の分子生物学 (シリーズ・応用動物科学バイオサイエンス)一般書・啓蒙書
- その他, 世界文化社, 2000年03月, 日本語農学21世紀への挑戦~地球を救う50の提案~一般書・啓蒙書
- 環境ホルモン学会研究発表会要旨集, 2021年09月, 日本語, 日本内分泌撹乱物質学会ネオニコチノイド系農薬クロチアニジンの胎子・授乳期曝露による次世代マウスの免疫系および腸内細菌叢の変化
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2021年09月, 日本語, (公社)日本獣医学会ネオニコチノイド系農薬クロチアニジンの胎子・授乳期曝露が次世代マウスの免疫系および腸内細菌叢に及ぼす影響
- International Union of Microbiological Societies (IUMS), 2020年11月, 英語The influence of the transcriptional regulatory motifs within the 5′ upstream region of mouse prion protein gene on the transcriptional activity.口頭発表(一般)
- 第73回細菌学会関西支部総会, 2020年11月, 日本語マウスプリオン蛋白質遺伝子エクソン1上流域内のHES-1結合配列が遺伝子発現に及ぼす影響口頭発表(一般)
- 第73回細菌学会関西支部総会, 2020年11月, 日本語オルビウイルス複製におけるタンパク質翻訳機構の解析口頭発表(一般)
- 第73回細菌学会関西支部総会, 2020年11月, 日本語オルビウイルス構造タンパク質VP6の機能解析口頭発表(一般)
- 第73回細菌学会関西支部総会, 2020年11月, 日本語流行性出血病(イバラキ病様疾病)発生牧場におけるウイルス中和抗体の追跡調査口頭発表(一般)
- 第163回日本獣医学会学術集会, 2020年09月, 日本語, DVO-49(井上).pdf, 発表資料, パスワードが無いマウスプリオン蛋白質遺伝子エクソン1上流域における転写制御領域の解析口頭発表(一般)
- 第163回日本獣医学会学術集会, 2020年09月, 日本語, DVO-52(藤山).pdf, パスワードが無いCCAATエンハンサー結合蛋白質ファミリーによるプリオン蛋白質 遺伝子発現への影響
- 第163回日本獣医学会学術集会, 2020年09月, 日本語, DVO-52(藤山).pdf, パスワードが無いニホンジカプリオン蛋白質遺伝子における翻訳領域とプロモーター領域に関する研究口頭発表(一般)
- 第163回日本獣医学会学術集会, 2020年09月, 日本語流行性出血病(イバラキ病様疾病)発生牧場におけるウイルス中和抗体の追跡調査口頭発表(一般)
- 神戸大学研究基盤センター若手フロンティア研究会, 2019年12月, 日本語細胞型プリオン蛋白質のα開裂に関する研究ポスター発表
- 第72回 日本細菌学会関西支部総会, 2019年11月, 日本語日本国内で発見されたダニ媒介性オルビウイルス、ムコウイルスのリバースジェネティクス系の樹立口頭発表(一般)
- 第67回日本ウイルス学会学術集会, 2019年10月, 日本語Fuzzy self-recognition mechanisms of orbivirus during core assembly in virus inclusion body
- 第162回日本獣医学会学術集会, 2019年09月, 日本語日本国内で発見されたダニ媒介性オルビウイルス、ムコウイルスのリバースジェネティクス系の樹立口頭発表(一般)
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2019年日本国内で発見されたダニ媒介性オルビウイルス,ムコウイルスのリバースジェネティクス系の樹立
- 第71回日本細菌学会関西支部総会, 2018年10月, 日本語, 大阪大学中之島センター10F 佐治敬三メモリアルホール, 国内会議新規遺伝子組換え技術を用いた流行性出血病ウイルス各血清型に対する迅速な中和抗 体検出法の開発口頭発表(一般)
- 第66回日本ウイルス学会学術集会, 2018年10月, 英語, 京都テルサ, 国内会議Visualization of Epizootic hemorrhagic Disease Virus Entry and Protein Synthesis口頭発表(一般)
- 第161回 日本獣医学会学術集会, 2018年09月, 日本語, つくば国際会議場, 国内会議新規遺伝子組換え技術を用いた流行性出血病ウイルス各血清型に対する迅速な中和抗 体検出法の開発口頭発表(一般)
- 13th International dsRNA Virus Symposium, 2018年09月, 英語, Houffalize, Belgium, 国際会議Further analysis of Ibaraki virus VP6 to produce fluorescence-labeled orbivirusesポスター発表
- 手フロンティア研究会2017, 2017年12月, 日本語, 神戸大学百年記念館, 国内会議マウス肝細胞におけるイバラキウイルス(IBAV)増殖抑制に関する研究ポスター発表
- 第70回細菌学会関西支部総会, 2017年11月, 日本語, 大阪府立大学 I-siteなんば 2F, 国内会議オルビウイルス構造タンパク質VP6の細胞内局在とgenome packaging機能に関する研究口頭発表(一般)
- 第65回日本ウイルス学会学術集会, 2017年10月, 日本語, 大阪国際会議場, 国内会議マウス肝細胞におけるイバラキウイルス(IBAV)増殖抑制に関する研究ポスター発表
- 第65回日本ウイルス学会学術集会, 2017年10月, 英語, 大阪国際会議場, 国内会議Biological roles of a loop region of orbivirus VP6 in virus replication口頭発表(一般)
- 第4回 関西ウイルスクラブ(KVC), 2017年02月, 日本語, 大阪医科大学, 国内会議Enhancement of Ibaraki virus replication by a viral non-structural protein NS2[招待有り]シンポジウム・ワークショップパネル(指名)
- 若手フロンティア研究会2016, 2016年12月, 日本語, 神戸大学百年記念館, 国内会議イバラキウイルスの構造タンパク質VP3の機能解析口頭発表(一般)
- 第69回 日本細菌学会関西支部総会, 2016年11月, 日本語, 大阪市立大学 杉本キャンパス 田中記念館, 国内会議蛍光標識イバラキウイルス粒子を用いた新規cell binding assay系の確立口頭発表(一般)
- 第69回 日本細菌学会関西支部総会, 2016年11月, 日本語, 大阪市立大学 杉本キャンパス 田中記念館, 国内会議オルビウイルス構造タンパク質VP6の機能解析口頭発表(一般)
- 第69回 日本細菌学会関西支部総会, 2016年11月, 日本語, 大阪市立大学 杉本キャンパス 田中記念館, 国内会議イバラキウイルス非構造タンパク質NS2のウイルス複製促進作用に関する研究口頭発表(一般)
- 第64回 日本ウイルス学会学術集会, 2016年10月, 英語, 札幌コンベンションセンター, 国内会議Further analysis of Ibaraki virus VP6 to produce fluorescence-labeled orbiviruses口頭発表(一般)
- 第68回 日本細菌学会関西支部総会, 2015年11月, 日本語, 京都薬科大学 愛学館, 国内会議Reverse Genetics Systemを用いたイバラキウイルス粒子形成機序の解析口頭発表(一般)
- 第63回日本ウイルス学会学術集会, 2015年11月, 英語, 福岡国際会議場, 国内会議Reverse genetics system for Ibaraki virus reveals the essential mechanisms of VP6 in its replication口頭発表(一般)
- The 12th International Double Stranded RNA Virus Symposium, 2015年10月, 英語, Goa Marriott Resort & Spa, Goa, India, 国際会議Development of Reverse Genetics for Ibaraki Virus to Produce a Viable VP6-Tagged IBAV口頭発表(一般)
- The 14th Awaji International Forum on Infection and Immunity, 2015年09月, 英語, 淡路夢舞台国際会議場, 国際会議Mechanisms of Resistance to Ibaraki Virus Replication and Its Persistent Infection in a Murine Hepatocyte Cell Lineポスター発表
- Eighth International Virus Assembly Symposium, 2015年05月, 英語, Dubrovnik, Croatia, 国際会議Development of reverse genetics for Ibaraki virus to produce viable VP6-tagged IBAVポスター発表
- 第67回日本細菌学会関西支部総会・学術集会, 2014年11月, 日本語, 兵庫医科大学 3-3講義室(3号館4階), 国内会議マウス肝細胞におけるイバラキウイルスの持続感染について口頭発表(一般)
- 第67回日本細菌学会関西支部総会・学術集会, 2014年11月, 日本語, 兵庫医科大学 3-3講義室(3号館4階), 国内会議イバラキウイルス(IBAV)における新規遺伝子改変法(Reverse Genetics System) を用いた、VP6 変異IBAV の作出口頭発表(一般)
- 第62回日本ウイルス学会学術集会, 2014年11月, 日本語, パシフィコ横浜 会議センター, 国内会議イバラキウイルス(IBAV)におけるReverse Genetics Systemの開発とその応用口頭発表(一般)
- 第67回日本細菌学会関西支部総会・学術集会, 2014年11月, 日本語, 兵庫医科大学 3-3講義室(3号館4階), 国内会議イバラキウイルス(IBAV)コアタンパク質VP6 とVP3 の相互作用に関する研究口頭発表(一般)
- 第157回日本獣医学会学術集会, 2014年09月, 日本語, 北海道大学高等教育推進機構, 国内会議広溶菌域ブドウ球菌ファージに関する研究口頭発表(一般)
- 第157回日本獣医学会学術集会, 2014年09月, 日本語, 北海道大学高等教育推進機構, 国内会議マウス由来株化培養細胞におけるプリオン蛋白遺伝子の発現とDNAメチル化状態口頭発表(一般)
- 第157回日本獣医学会学術集会, 2014年09月, 日本語, 北海道大学高等教育推進機構, 国内会議マウス肝細胞におけるイバラキウイルスの持続感染について口頭発表(一般)
- 第157回日本獣医学会学術集会, 2014年09月, 日本語, 北海道大学高等教育推進機構, 国内会議ブルータングウイルス(BTV)VP6の構造解析を用いた増殖可能なVP6-truncated BTVの作出口頭発表(一般)
- The 13th Awaji International Forum on Infection and Immunity in Nara, 2014年09月, 英語, Nara Prefectural New Public Hall, 国際会議The essential interaction of VP6 protein with VP3 for recruitment of the replicase complex into orbivirus particle口頭発表(一般)
- 日本癌学会総会記事, 2013年10月, 英語, (一社)日本癌学会腫瘍におけるプリオン蛋白遺伝子発現は間質由来テネイシンCによって調整されている(Stromal tenascin C regulates a prion protein gene expression in tumor tissues)
- 第72回日本癌学会学術総会, 2013年10月, 日本語, パシフィコ横浜, 国内会議Stromal tenascin C regulates a prion protein gene expression in tumor tissues.ポスター発表
- 第156回日本獣医学会学術集会, 2013年09月, 日本語, 岐阜大学, 国内会議マウスプリオン蛋白遺伝子発現制御領域のメチル化に関する研究口頭発表(一般)
- 第155回日本獣医学会, 2013年03月, 日本語, 日本獣医学会, 東京, 国内会議生体内における感染動態解析のためのEGFP発現大腸菌の作製ポスター発表
- 第155回日本獣医学会学術集会, 2013年03月, 日本語, 東京, 国内会議異なる細胞種におけるイバラキウイルスの複製能力の比較口頭発表(一般)
- 第155回日本獣医学会学術集会, 2013年03月, 日本語, 東京, 国内会議オルビウイルスコアタンパク質VP6とVP3の相互作用に関する研究口頭発表(一般)
- 第65回日本細菌学会関西支部総会, 2012年11月, 日本語, 神戸, 国内会議ブルータングウイルス(BTV)コアタンパク質VP3とVP6の結合に関する研究口頭発表(一般)
- 第60回日本ウイルス学会学術集会, 2012年11月, 日本語, 大阪, 国内会議ブルータングウイルス(BTV)コアタンパク質VP3とVP6の結合に関する研究口頭発表(一般)
- 第154回日本獣医学会学術集会, 2012年09月, 日本語, 盛岡, 国内会議ブルータングウイルス(BTV)コアタンパク質VP3とVP6の結合に関する研究口頭発表(一般)
- 第154回日本獣医学会学術集会, 2012年09月, 日本語, 岩手大学, 国内会議テネイシンC欠損がおよぼすプリオン蛋白遺伝子発現への影響口頭発表(一般)
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2012年08月, 日本語, (公社)日本獣医学会テネイシンC欠損がおよぼすプリオン蛋白遺伝子発現への影響
- 第153回日本獣医学会学術集会, 2012年03月, 日本語, 大宮ソニックシティ, 国内会議複製能力欠損ブルータングウイルスを用いた新規ワクチンの開発ポスター発表
- 第156回日本獣医学会学術集会, 2010年09月, 日本語, 帯広畜産大学, 国内会議新規MRSA分離選択培地の開発口頭発表(一般)
- 第156回日本獣医学会学術集会, 2010年09月, 日本語, 帯広畜産大学, 国内会議腫瘍組織におけるプリオン蛋白(PrP)遺伝子発現量の比較口頭発表(一般)
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2007年03月, 日本語乳飲みマウスにおける微粒子の腸上皮への取込み
- 日本生体防御学会学術総会講演抄録集, 2006年, 英語Expression of hamster PrP and bovine PrP can not prevent murine prion protein gene-deficient cells from apoptosis
- 日本ウイルス学会学術集会プログラム・抄録集, 2004年11月, 日本語欠損変異プリオン蛋白質の作成によるプリオン蛋白機能解明の試み
- 日本ウイルス学会学術集会プログラム・抄録集, 2004年11月, 日本語プリオン遺伝子欠損神経細胞株におけるアポトーシス経路の解析
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2004年03月, 日本語, (公社)日本獣医学会正常型プリオン蛋白質による細胞内銅濃度維持
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2004年03月, 日本語, (公社)日本獣医学会ZchI型(FVB/Prnp-/-)不死化神経細胞株の樹立および,PrPCのアポトーシス抑制能の解析
- 日本生体防御学会学術総会講演抄録集, 2003年07月, 日本語欠損変異プリオン蛋白を用いた正常型プリオン蛋白の機能解析
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2003年03月, 日本語, (公社)日本獣医学会欠損変異プリオン蛋白を用いた正常型プリオン蛋白の機能解析
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2002年03月, 日本語, (公社)日本獣医学会アポトーシス抑制因子Bcl-2 family,Superoxide dismutase(SOD)遺伝子及びプリオン遺伝子の導入による不死化プリオンレス神経細胞死の解析
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2001年09月, 日本語, (公社)日本獣医学会プリオン研究の進展 アポトーシス抑制因子Bcl-2 family遺伝子の導入による不死化プリオンレス神経細胞死の解析
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2001年03月, 日本語プリオン蛋白質(PrP)遺伝子欠損マウスおよび神経細胞株におけるPrP様蛋白質(Dpl)遺伝子の発現
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 2001年03月, 日本語, (公社)日本獣医学会アポトーシス抑制因子Bcl-2,Bcl-xL,Superoxide dismutase(SOD)遺伝子の導入による不死化プリオンレス神経細胞死の解析
- 日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集, 2000年11月, 日本語プリオン蛋白質(PrP)遺伝子ノックアウト神経細胞株におけるPrP様蛋白質(Dpl)遺伝子(Prnd)の発現
- 日本分子生物学会年会プログラム・講演要旨集, 1999年11月, 日本語アポトーシス抑制因子Bcl‐2による不死化プリオンレス神経細胞死の抑制
- 日本獣医学会学術集会講演要旨集, 1999年03月, 日本語, (公社)日本獣医学会リーシュマニア原虫を用いた哺乳動物遺伝子発現系の検討
■ 共同研究・競争的資金等の研究課題
- 科学研究費補助金/基盤研究(C), 2012年04月 - 2015年03月, 研究代表者競争的資金
- 日本学術振興会, 科学研究費補助金/基盤研究(C), 基盤研究(C), 神戸大学, 2009年 - 2011年, 研究代表者腫瘍におけるプリオンタンパク質(PrP)の機能解明を目的として、ヌードマウスおよびテネイシンC(TNC)遺伝子欠損型ヌードマウスに移植した各種腫瘍におけるPrP遺伝子の発現について解析を行った。ヌードマウス移植腫瘍におけるPrP遺伝子発現レベルは細胞株によって様々であった。本研究では移植腫瘍実質および間質におけるPrP遺伝子発現の影響について、初めての情報を提供した。PrPの機能を解明する上で、本研究が提供した情報は有用であると考えられる。競争的資金
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(B), 東京大学, 2005年 - 2007年牛海綿状脳症の発病機構及び高感度検出に関する研究プリオン病は異常プリオン蛋白(PrPsc)が因子となり、経口的に感染するが、その取込みおよび動態は多くが不明である。腸での微量な取込みの検出が困難で、感染性研究の為にウシを用いた大型施設を要する研究は進んでいない。したがって、マウスモデルにおいて、蛋白分解酵素に抵抗性のβアミロイド蛋白と蛍光蛋白との融合蛋白(Aβ-EGFP)を作製して、体内動態を解析した。同時に、別のマウスに筑波1株をマウスに経口投与して、PrPscの動態を免疫組織化学的に検索した。Aβ-EGFPはβシート構造が45.89%と非常に豊富であった。Aβ-EGFPは乳飲み期に吸収円柱上皮細胞と一部M細胞から取り込まれた。しかし、離乳するにつれて、絨毛からの取込みは、徐々に減少した。また乳清存在下でより取込まれ、母乳内の移行抗体等に紛れて取込まれた可能性が考えられた。PrPscの経口投与後の免疫組織学的においても、PrPscは乳飲み期に吸収円柱上皮細胞より取込まれるのが観察された。したがって、プリオン病の伝達は、パイエル板が未発達な離乳時期では、腸陰窩部での蓄積後に末梢神経に伝達する可能性が示唆された。これらの研究に併せて、Aβ-EGFPを投与したウシの腸管における動態、スクレイピー感染マウス脳におけるアポトーシス、活性酸素産生関連蛋白の動態についても研究を行った。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(B), 東京大学, 2005年 - 2006年イタリアにおける非定型BSEの現地調査イタリア・トリノ市の家畜衛生研究所のカラメリ部長、インスブリア大(バレセ市)のトニオロ教授、ベロナ大学医学部のザヌソ教授のグループとともに、イタリアのヤコブ病、BSE材料を用いて、日本のモノクローナル抗体との反応性を見た。 日本のモノクローナル抗体は日本生物化学研究所の上田所長の研究グループにより開発されたものを用いた。モノクローナル抗体の反応性は、免疫組織化学及びウエスタン・プロッティングにより検討した。モノクローナル抗体の内、立体エピトープに反応するものが、マウス、羊、牛、サル、ヒトのプリオン病に対し、反応する事が明らかにされた。その中でクローン6C4抗体は、2型クロイツフェルトヤコブ病、クールー斑の周辺部のみと反応する事が明らかにされた。それに対し、クローンT2抗体は、クールー斑全体と反応するのが見られた。したがって、クールー斑の成熟には、様々な段階の存在することが明らかにされた。線上(liner)エピトープに対する抗体は、細胞質内のプリオン蛋白を染色した。それに対し、立体エピトープに対する1D12抗体は、核内に存在する正常プリオン蛋白を染色した。今まで核内における正常プリオン蛋白染色の結果は、他に報告されていない。したがって、1D12抗体はプリオン遺伝子の核内発現産物を研究する上で有用と考えられる。この内容は、Journal of Nero Virologyと、Journal of Microbiology and Immunologyに投稿され、現在審査中である。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 若手研究(A), 東京大学, 2002年 - 2004年免疫担当細胞におけるプリオン蛋白質の作用機構に関する研究[プリオン蛋白(PrP)の機能とアポトーシスの抑制に関する解析] Zn-1型PrP遺伝子欠損マウスおよびRikn型PrP遺伝子欠損マウスおよび野生型マウスより得られた神経細胞初代を用いて銅イオンによって誘導されるアポトーシスについて解析した結果、PrP遺伝子欠損マウス由来神経細胞が有為に高いアポトーシスを起こした。 また、Zn-1型PrP遺伝子欠損マウス、Rikn型PrP遺伝子欠損マウスおよび野生型マウスより得られた脾細胞を用いて無刺激および刺激後の細胞の増殖能について比較検討を行った結果、PMA、イオノマイシン刺激後において野生型マウス由来脾細胞と比較してZn-1型PrP遺伝子欠損マウスおよびRikn型PrP遺伝子欠損マウス由来脾細胞において増殖能が低い結果が得られた。ConA、リポ多糖刺激においては野生型マウス由来脾細胞とPrP遺伝子欠損マウス由来脾細胞間で有為な差は認められなかった。アポトーシス細胞についても解析を行ったが有為な差は認められなかった。 [ウイルス感染時におけるプリオン蛋白の機能解析] Zn-1型、Rikn型PrP遺伝子欠損マウスおよび野生型マウスを用いて、脳心筋炎ウイルス-B株感染について解析した結果、アポトーシス細胞の出現頻度においてPrP遺伝子欠損マウスのほうが、野生型マウスと比較して高頻度であった。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(B), 東京大学, 2002年 - 2004年牛海綿状脳症病原体の高感度検出系の開発伝達性海綿状脳症(Transmissible spongiform Encephalopathy, TSE)は、病原体が明らかになる前は様々な名前で呼ばれていた。現在それらの病気は様々な動物およびヒトに観察される。しかし共通の発病機構(プリオンの増殖)によって起こると考えられている為にTSE、あるいはプリオン病と共通の概念で呼ばれている。 この病気は、羊では1759年に報告され、スクレイピーと呼ばれていた。この病気はヒトには伝達性が無いと考えられる。自然における病原体感染は、羊・山羊(スクレイピー)、鹿、大鹿(慢性消耗性疾患、chronic wasting disease, CWD)と考えられている。羊はスクレイピー病原体を、胎盤感染、あるいは病原体で汚染されたワクチンにより、他の羊・山羊に感染させたと考えられている。また、内臓を飼料として用いることにより、ミンクや牛に伝達したのが最大の可能性として、伝達性ミンク脳症状(TME)、ウシ海綿状脳症(BSE)が発生したと考えられている 白オリックスのプリオン遺伝子を、プリオン遺伝子欠損マウスに導入する事により、オリックス型プリオン遺伝子マウスを作製した。このマウスは、プリオン遺伝子を、脳、心筋、骨格筋に発現しているのが、ウエスタン・ブロッティングにより明らかにされた。スクレイピー病原体は、トランスジェニックマウス脳内で増殖する事が確認されたが、心筋、骨格筋での増殖は確認されなかった。 一方、このオリックス型プリオン遺伝子マウスは、老齢において、拡張性心筋症および、骨格筋の硝子様変性を示した。したがって、これらのマウスは、病原体を感染させなくとも、心疾患のモデル動物と考えられた。 現在、プリオン遺伝子欠損細胞株に、ウシ、ハムスタープリオン遺伝子を導入して、病原体高感度検出系を確立しようとしている。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 特定領域研究, 東京大学, 2002年 - 2002年プリオン蛋白質関連神経細胞死発現機構に関する研究プリオン蛋白質(PrP)の再発現に伴い細胞のSuperoxide dismutase (SOD)活性を上昇させたとの前年度の結果から、本年度はPrPと酸化ストレスとの関連について調べた。無血清培養条件下におけるPrP欠損神経細胞とPrP再発現細胞株の活性酸素関連分子の量を調べた。SODは2O_2・^-+2H^+→H_2O_2+O_2の反応を触媒する酵素であり、活性酸素(O_2・^-)を消去して過酸化水素(H_2O_2)に変換する。血清除去下での活性酸素の発生量をフリーラジカル特異的蛍光プローブを用いたフローサイトメトリー解析により調べた。Dihydroethidium (DH)により、細胞内活性酸素を蛍光染色しフローサイトメトリーにより測定したところ、PrP欠損神経細胞で見られる活性酸素の発生がPrP再発現細胞株では抑制された。さらに2',7'-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA)染色により過酸化水素量の測定をおこなったところ、PrP再発現細胞株において過酸化水素の蓄積が認められた。PrP再発現に伴い細胞内の活性酸素が消去され、過酸化水素が蓄積していたことからPrPがSOD活性を調整していかまたはPrP自身がSOD様の酵素活性を持っていることが示唆された。PrPは銅と結合することが報告されているが、銅代謝を制御することによりSODの活性を制御し、活性酸素の消去に関わっている可能性が考えられた。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 特定領域研究(C), 東京大学, 2001年 - 2001年プリオン蛋白質関連神経細胞死発現機構に関する研究プリオン病で見られる神経変性の発現機構には正常型のプリオン蛋白と病原体の本体と見られる異常型のプリオン蛋白の機能が密接に関係していると考えられている。本研究ではプリオン蛋白遺伝子欠損不死化神経細胞株におけるアポトーシス抑制能について検討した。特にアポトーシス抑制関連因子(Bcl-2,Bcl-XL, SOD及びTNF-alpha)との相互作用について検討した。また、プリオン蛋白遺伝子欠損マウス、野生型マウス、プリオン蛋白遺伝子欠損不死化神経細胞株およびプリオン蛋白遺伝子再構築不死化神経細胞株を用いて、EMC-B株、コクサッキーB1,B2,B3,B5,B6株感染時における宿主細胞内プリオン蛋白の機能を推定、検討を行なった。プリオン蛋白遺伝子欠損不死化神経細胞株に上記のBcl-2,Bcl-XL, SOD-1 cDNAを導入したところ、PrP cDNAを導入した細胞株で認められる無血清培地下でのアポトーシス抑制効果が認められた。プリオン蛋白遺伝子を再導入した細胞株におけるBcl-2,Bcl-XL及びSOD蛋白の産生を検討したところ、産生に変化は認められなかった。ところが、細胞内成分および細胞膜成分のSOD活性を測定したところ、SOD活性の上昇を認めた。正常プリオン蛋白は銅結合蛋白であることから、SOD分子に銅を供給する銅シャペロン分子であることが推測され、プリオン蛋白を発現によって細胞内SOD活性が上昇したと考えられた。また、細胞膜成分のSOD活性も上昇したことから、プリオン蛋白自体が膜上でSOD様の活性を持っていると予想された。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 奨励研究(A), 東京大学, 2000年 - 2001年ウイルス誘発性アポトーシスにおける正常プリオン蛋白の機能に関する研究プリオン蛋白欠損不死化神経細胞株を用いてコクサキーウイルスおよび脳心筋炎ウイルスB株(EMC-B)の感受性を検討するとともに、プリオン蛋白遺伝子再導入株を作製し、ウイルスの感受性変化について解析を行なった。プリオン蛋白欠損不死化神経細胞株と他のウイルス分離に一般的に使われている細胞株を比較したところ、プリオン蛋白欠損不死化神経細胞株は脳心筋炎ウイルス及びコクサッキーウイルスそれぞれの感染において感受性を有していた。また、ウイルス増殖が他の細胞株と比較し早く、最終的なウイルス力価も高かった。さらに細胞変性効果出現時期においても他の細胞株と比較して早く、ウイルス分離のための細胞株としてプリオン蛋白欠損不死化神経細胞株の有用性が示された。感染時におけるプリオン蛋白欠損不死化神経細胞の細胞変性効果誘導が、プリオン蛋白の再発現化に伴い影響を受けるのかを解析したところ、プリオン蛋白遺伝子を再導入した細胞は細胞変性効果の出現が遅れ、また、アポトーシス抵抗性を示した。このことより、ウイルス誘発性のアポトーシスにおいてプリオン蛋白が抑制的に働いていることが示唆された。ウイルス感染時における宿主細胞プリオン蛋白の機能を推定するために、EMC-Bウイルス感染後経時的にマウスを屠殺・剖検し、組織標本を作製した後、細胞組織学的、ウイルス病理学的に脳炎症反応の解析を行なった。アポトーシス神経細胞の出現時期は、野生型マウスよりもプリオン蛋白欠損マウスで早期に観察された。また、浸潤細胞のアポトーシスもプリオン蛋白欠損マウスで早期に観察された。これらのことからプリオン蛋白の機能として抗酸化作用が考えられ酸化ストレスによるアポトーシスと密接に関連していることが示唆された。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(B), 東京大学, 2000年 - 2001年プリオン様遺伝子(Prnd)に対するプリオン蛋白の作用に関する研究プリオン病で見られる神経変性の原因については、正常型プリオン蛋白が病原型に変換され、正常型プリオン蛋白の機能が失われるloss of functionによるものとする考え方がある。実際、マウススクレイピー感染の末期においては、正常プリオン蛋白の脳内分布量が1/10以下になる事が観察される。一方病原性プリオン蛋白によるgain of functionとする考え方も存在する。正常型プリオン蛋白のloss of functionについては、プリオン蛋白欠損マウスにおいて記憶や学習の異常、活動性日内周期異常や睡眠周期異常、あるいは小脳Purkinje細胞や脊髄の変性などが報告されている。我々は、これらのプリオン遺伝子欠損マウスにおいては活性酸素分解酵素(SOD)の活性が欠損する事を明らかにし、これが様々な免疫疾患・神経疾患の原因とする可能性を2001年の日本分子生物学会に報告した。つまり正常プリオン蛋白質はCuのtransporterであり、PrPCに結合した形でCuが細胞内に輸送される。その結果、細胞内のCu/Zn SODが活性化され、細胞内活性酸素が除去される。実際にプリオン遺伝子ノックアウトマウス及び、ノックアウト細胞株ではSOD活性が40%に低下していた。また、Prnd遺伝子にコードされるDoppel蛋白質は毒性を持ち、活性酸素による細胞破壊や細胞死を増幅していると我々は予想しているが、今後の研究が必要である。
- 日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(A), 国立精神・神経センター, 1996年 - 1998年発生工学的手法を用いたマウス肝炎ウイルス抵抗性マウスの作出本研究では、マウス肝炎ウイルス(MHV)抵抗性のマウスを作出することを最終目標に、まずMHV抵抗性マウスSJLの抵抗性機構を研究することから始めた。MHVに対してBALB/c等の殆どのマウスが感受性を示すが、SJLは抵抗性を示す。このMHV抵抗性は、単一の第7染色体に存在するMHV抵抗性遺伝子に依ること、感受性が優性であることが報告されている。このことは、BALB/cがMHVの感染増殖に必要な因子を発現しているが、SJLマウスにはその因子が発現されていないか、または因子のMHV増殖に及ぼす効果が低いことを示している。我々は、SJL由来MHV受容体(R2)がBALB/c由来受容体(R1)と比べ、ウイルス結合活性が10-30倍低いことを発見した。また、MHV受容体はMHV抵抗性遺伝子と同様第7常染色体に存在する。これらのことから、MHV受容体がMHV抵抗性遺伝子と同一ではないかと考え、BALB/c x SJLのF2、backcrossマウスを用いて、これらの遺伝子のlinkageを調べたところ、これらの遺伝子は0.94cM以内の非常に近傍に存在することが判明した。更に、microsatellite markerを用いたMHV受容体遺伝子のmappingからも、MHV抵抗性遺伝子とMHV受容体遺伝子は第7染色体のほぼ同位置に存在することが明らかにされた。これらのことは、MHV抵抗性遺伝子とMHV受容体遺伝子が同一である可能性をも示唆している。現在、MHV受容体の置換マウス(R1を持つSJL及びR2を持つBALB/c)を作成し、これらのマウスのMHV感受性を調べることにより、上述の可能性について検討中である。MHV抵抗性マウスの作出方法として、SJLマウスの受容体を持つマウス及びMHV受容体の欠損マウスが考えられ、これらの実験も現在進行中である。