研究活動情報

• 2004年03月 日本薬理学会, 日本薬理学会奨励賞, ライブイメージングを用いたプロテインキナーゼＣおよびジアシルグリセロールキナーゼの機能解析

  白井 康仁


• 2004年 日本薬理学会, 薬理学会奨励賞, ライブイメージングを用いたプロテインキナーゼＣ及びジアシルグリセロールキナーゼの機能解析

  白井 康仁

• Tocotrienols activate diacylglycerol kinase a via 67 KDa laminin receptor

  難波朋花, 林大輝福田伊津子, 上田修司, 白井康仁

  2025年05月, Functional Food Science, 5(5) (5), 160 - 169, パスワードが無い

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）

  添付ファイルのURL


• Metabolites and Free Fatty Acids in Japanese Black Beef During Wet Aging.

  Shuji Ueda, Yuka Yoshida, Yuka Tateoka, Biniam Kebede, Masakazu Shinohara, Hiroki Nakanishi, Itsuko Fukuda, Yasuhito Shirai

  Background: Japanese Black beef is known for its high intramuscular fat content, an important factor in its distinctive Wagyu aroma. Wet aging, which involves vacuum-packing meat and storing it at low temperatures, enhances flavor, texture, and tenderness and is essential for maintaining and improving meat quality. In this study, changes in metabolites and lipid profiles were investigated during the wet aging of Japanese Black and Holstein beef. Methods/Results: Gas chromatography-mass spectrometry identified 113 metabolites in Japanese Black beef and 94 in Holstein beef, with significant increases in metabolites like aspartic acid and maleic acid over the aging period. Regarding lipid composition, total free fatty acids significantly increased with wet aging, with Japanese Black beef showing significantly higher concentrations of oleic and linoleic acids than Holstein beef. Additionally, lipid analysis by liquid chromatography-mass spectrometry revealed a reduction in specific phospholipids, particularly lysophosphatidylcholine (LPC) and lysophosphatidylethanolamine (LPE), with notable decreases in LPC (18:1), LPC (18:2), LPE (18:1), and LPE (18:2). Conclusions: These results suggest that wet aging influences the stability of membrane lipids, facilitating the degradation of phospholipids into free fatty acids, and improving the flavor of Japanese Black beef.

  2025年02月, Metabolites, 15(2) (2), 英語, 国際誌

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Evaluating functionalities of food components by a model simulating human intestinal microbiota constructed at Kobe University.

  Ro Osawa, Itsuko Fukuda, Yasuhito Shirai

  In this era of pandemics, reducing the risk of lifestyle-related diseases (LRD) by functional foods is of paramount importance. The conventional process of functional food development almost invariably involves in vitro, animal, and human intervention trials, but differences in intestinal environments between humans and experimental animals make it difficult to develop functional foods that are truly effective in humans. Thus, it is necessary to construct a model that simulates the human intestinal environment to evaluate the functionality of any food component before subjecting it to a human intervention trial. In this review, we provide an overview of a model simulating human intestinal microbiota constructed at Kobe University and its use as a tool to identify food components that contribute to the prevention and treatment of LRD.

  2024年03月, Current opinion in biotechnology, 87, 103103 - 103103, 英語, 国際誌

  研究論文（学術雑誌）


• New Implications of Metabolites and Free Fatty Acids in Quality Control of Crossbred Wagyu Beef during Wet Aging Cold Storage.

  Shuji Ueda, Yuka Yoshida, Biniam Kebede, Chiaki Kitamura, Ryo Sasaki, Masakazu Shinohara, Itsuko Fukuda, Yasuhito Shirai

  Efficient cold-chain delivery is essential for maintaining a sustainable global food supply. This study used metabolomic analysis to examine meat quality changes during the "wet aging" of crossbred Wagyu beef during cold storage. The longissimus thoracic (Loin) and adductor muscles (Round) of hybrid Wagyu beef, a cross between the Japanese Black and Holstein-Friesian breeds, were packaged in vacuum film and refrigerated for up to 40 days. Sensory evaluation indicated an increase in the umami and kokumi taste owing to wet aging. Comprehensive analysis using gas chromatography-mass spectrometry identified metabolite changes during wet aging. In the Loin, 94 metabolites increased, and 24 decreased; in the Round, 91 increased and 18 decreased. Metabolites contributing to the umami taste of the meat showed different profiles during wet aging. Glutamic acid increased in a cold storage-dependent manner, whereas creatinine and inosinic acid degraded rapidly even during cold storage. In terms of lipids, wet aging led to an increase in free fatty acids. In particular, linoleic acid, a polyunsaturated fatty acid, increased significantly among the free fatty acids. These results provide new insight into the effects of wet aging on Wagyu-type beef, emphasizing the role of free amino acids, organic acids, and free fatty acids generated during cold storage.

  2024年01月, Metabolites, 14(2) (2), 英語, 国際誌

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Isolation and identification of hyaluronan-degrading bacteria from Japanese fecal microbiota.

  Hazuki Akazawa, Itsuko Fukuda, Haruna Kaneda, Shoichi Yoda, Mamoru Kimura, Ryohei Nomoto, Shuji Ueda, Yasuhito Shirai, Ro Osawa

  Hyaluronan (HA) is a high-molecular-weight glycosaminoglycan and widely distributed in all connective tissues and organs with diverse biological functions. HA has been increasingly used as dietary supplements targeted to joint and skin health for humans. We here first report isolation of bacteria from human feces that are capable of degrading HA to lower molecular weight HA oligosaccharides (oligo-HAs). The bacteria were successfully isolated via a selective enrichment method, in which the serially diluted feces of healthy Japanese donors were individually incubated in an enrichment medium containing HA, followed by the isolation of candidate strains from streaked HA-containing agar plates and selection of HA-degrading strains by measuring HA using an ELISA. Subsequent genomic and biochemical assays identified the strains as Bacteroides finegoldii, B. caccae, B. thetaiotaomicron, and Fusobacterium mortiferum. Furthermore, our HPLC analysis revealed that the strains degraded HA to oligo-HAs of various lengths. Subsequent quantitative PCR assay targeting the HA degrading bacteria showed that their distribution in the Japanese donors varied. The evidence suggests that dietary HA is degraded by the human gut microbiota with individual variation to oligo-HAs components, which are more absorbable than HA, thereby exerting its beneficial effects.

  2023年, PloS one, 18(5) (5), e0284517, 英語, 国際誌

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Vitamin E functions by association with a novel binding site on the 67 kDa laminin receptor activating diacylglycerol kinase.

  Daiki Hayashi, Varnavas D Mouchlis, Seika Okamoto, Tomoka Namba, Liuqing Wang, Sheng Li, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Hirofumi Tachibana, Hiroyuki Arai, Hitoshi Ashida, Edward A Dennis, Yasuhito Shirai

  It is generally recognized that the main function of α-tocopherol (αToc), which is the most active form of vitamin E, is its antioxidant effect, while non-antioxidant effects have also been reported. We previously found that αToc ameliorates diabetic nephropathy via diacylglycerol kinase alpha (DGKα) activation in vivo, and the activation was not related to the antioxidant effect. However, the underlying mechanism of how αToc activates DGKα have been enigmatic. We report that the membrane-bound 67 kDa laminin receptor (67LR), which has previously been shown to serve as a receptor for epigallocatechin gallate (EGCG), also contains a novel binding site for vitamin E, and its association with Vitamin E mediates DGKα activation by αToc. We employed hydrogen-deuterium exchange mass spectrometry (HDX/MS) and molecular dynamics (MD) simulations to identify the specific binding site of αToc on the 67LR and discovered the conformation of the specific hydrophobic pocket that accommodates αToc. Also, HDX/MS and MD simulations demonstrated the detailed binding of EGCG to a water-exposed hydrophilic site on 67LR, while in contrast αToc binds to a distinct hydrophobic site. We demonstrated that 67LR triggers an important signaling pathway mediating non-antioxidant effects of αToc, such as DGKα activation. This is the first evidence demonstrating a membrane receptor for αToc and one of the underlying mechanisms of a non-antioxidant function for αToc.

  2022年12月, The Journal of nutritional biochemistry, 110, 109129 - 109129, 英語, 国際誌

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• The Role of Diacylglycerol Kinase in the Amelioration of Diabetic Nephropathy.

  Daiki Hayashi, Yasuhito Shirai

  The drastic increase in the number of patients with diabetes and its complications is a global issue. Diabetic nephropathy, the leading cause of chronic kidney disease, significantly affects patients' quality of life and medical expenses. Furthermore, there are limited drugs for treating diabetic nephropathy patients. Impaired lipid signaling, especially abnormal protein kinase C (PKC) activation by de novo-synthesized diacylglycerol (DG) under high blood glucose, is one of the causes of diabetic nephropathy. DG kinase (DGK) is an enzyme that phosphorylates DG and generates phosphatidic acid, i.e., DGK can inhibit PKC activation under diabetic conditions. Indeed, it has been proven that DGK activation ameliorates diabetic nephropathy. In this review, we summarize the involvement of PKC and DGK in diabetic nephropathy as therapeutic targets, and its mechanisms, by referring to our recent study.

  2022年10月, Molecules (Basel, Switzerland), 27(20) (20), 英語, 国際誌

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Polo-Like Kinase 2 Plays an Essential Role in Cytoprotection against MG132-Induced Proteasome Inhibition via Phosphorylation of Serine 19 in HSPB5.

  Shuji Ueda, Moeka Nishihara, Yuuki Hioka, Ken-Ichi Yoshino, Soichiro Yamada, Minoru Yamanoue, Yasuhito Shirai

  Protein homeostasis, including protein folding, refolding, and degradation, is thought to decline with aging. HSPB5 (also known as αB-crystallin) prevents target protein aggregation as a molecular chaperone and exhibits a cytoprotective function against various cell stresses. To elucidate the effect of HSPB5 on endoplasmic reticulum (ER) stress, we searched for novel binding proteins of HSPB5 using the proximity-dependent biotin labeling method. Proteins presumed to interact with HSPB5 in cells treated with the proteasome inhibitor MG132 were identified by a reversible biotin-binding capacity method combining tamavidin2-REV magnetic beads and mass spectrometry. We discovered a new binding protein for HSPB5, polo-like kinase 2 (PLK2), which is an apoptosis-related enzyme. The expression of PLK2 was upregulated by MG132 treatment, and it was co-localized with HSPB5 near the ER in L6 muscle cells. Inhibition of PLK2 decreased ER stress-induced phosphorylation of serine 19 in HSPB5 and increased apoptosis by activation of caspase 3 under ER stress. Overexpression of HSPB5 (WT) suppressed the ER stress-induced caspase 3 activity, but this was not observed with phospho-deficient HSPB5 (3A) mutants. These results clarify the role of HSPB5 phosphorylation during ER stress and suggest that the PLK2/HSPB5 pathway plays an essential role in cytoprotection against proteasome inhibition-induced ER stress.

  2022年09月, International journal of molecular sciences, 23(19) (19), 英語, 国際誌

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Application of Mass Spectrometry for Determining the Geographic Production Area of Wagyu Beef

  Shuji Ueda, Yasuharu Takashima, Yunosuke Gotou, Ryo Sasaki, Rio Nakabayashi, Takeshi Suzuki, Shinji Sasazaki, Ituko Fukuda, Biniam Kebede, Yuki Kadowaki, Maiko Tamura, Hiroki Nakanishi, Yasuhito Shirai

  Japanese Black cattle (Japanese Wagyu) beef is attracting attention for its aroma and marbling, and its handling is increasing worldwide. Here, we focused on the origin discrimination of Wagyu beef and analyzed the nutritional components of Japanese Wagyu (produced in multiple prefectures of Japan), Hybrid Wagyu (a cross between Angus and Wagyu cattle born in Australia and transported to Japan), and Australian Wagyu beef using mass spectrometry (MS). Triple-quadrupole liquid chromatography–MS was used to clarify the molecular species of lipids in Wagyu beef. Fourteen classes of lipids were separated, and 128 different triacylglycerides (TGs) were detected. A simple comparative analysis of these TGs using high-performance liquid chromatography revealed significantly higher levels of triolein (C18:1/C18:1/C18:1; abbreviated OOO) and C18:1/C18:1/C16:1 (OOPo) in Japanese Wagyu. Wagyu elements beef were comprehensively analyzed using inductively coupled plasma (ICP)–MS and ICP–optical emission spectrometry. We found significant differences in the rubidium, cesium, and lithium levels of Japanese and Australian Wagyu beef. On comparing metabolites using gas chromatography–MS, we identified significant differences in the levels of amino acids and other components of the Japanese and Australian Wagyu beef. These results suggest the possibility of determining the origin of Wagyu cattle breeds using MS and genetic discrimination.

  MDPI AG, 2022年08月, Metabolites, 12(9) (9), 777 - 777

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Almond Skin Polyphenol Extracts Stimulate the Activation of Diacylglycerol Kinase alpha via a 67 kDa Laminin Receptor

  Boonyaporn Chinthammit, Seika Okamoto, Yasuhito Shirai

  Background: Almond skins are the byproduct of the almond industry that are rich in dietary fibers and polyphenols. Recently, there has been an increasing interest in utilizing the phenolic compounds from almond skins for their functional benefits. Galloylated catechins activate diacylglycerol kinase α (DGKα) which is involved in the amelioration of diabetic nephropathy. Therefore, in this study, we investigated whether almond skin polyphenol extracts can also induce the activation of DGKα. Methods: Phenolic contents in the almond skin polyphenol extracts were identified by liquid chromatography (LC)-time of flight mass spectrometry (TOFMS). Using confocal microscopy, the translocation of green fluorescent protein (GFP)-DGKα to the cell membrane was observed upon stimulation with almond skin polyphenol extracts. To check the involvement of 67 kDa laminin receptor (67LR), pre-treatment of anti-67LR antibody was used.Results: We identified that naringenin and flavanone (2,3-dihydroflavone), which are among the phenolic contents in the almond skin polyphenol extracts identified, can also induce the activation of DGKα. In addition, we also investigated whether the pathway involves the same receptor as that of epigallocatechin-3-gallate (EGCg); the 67LR. Naringenin stimulated through the 67LR, while flavanone mainly used the 67LR-independent pathways.Conclusion: These findings were additional function of almond skin polyphenol extracts and may implicate the benefits of the intake of nuts in daily diets. Polyphenols can be extracted from almond skins as an inexpensive source. The various health benefits of polyphenols can be applied to functional foods and supplements.Keywords: flavonoid, lipid kinase, imaging, catechin, vitamin E, diabetic nephropathy

  Functional Food Center, 2022年04月, Functional Foods in Health and Disease, 12(4) (4), 151 - 160

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Production of Hydroxy Fatty Acids, Precursors of γ-Hexalactone, Contributes to the Characteristic Sweet Aroma of Beef.

  Shuji Ueda, Mana Hosoda, Kumi Kasamatsu, Masahiro Horiuchi, Rio Nakabayashi, Bubwoong Kang, Masakazu Shinohara, Hiroki Nakanishi, Takayo Ohto-Nakanishi, Minoru Yamanoue, Yasuhito Shirai

  Aroma is an essential factor for meat quality. The meat of Japanese Black cattle exhibits fine marbling and a rich and sweet aroma with a characteristic lactone composition. The mechanism of lactone formation associated with beef aroma has not been elucidated. In this study, we examined the precursors of γ-hexalactone, an indicator of the sweet aroma of beef and identified the mechanism underlying γ-hexalactone production. A low-temperature vacuum system was used to prepare beef tallow from Japanese Black cattle and Holstein cattle. The odor components were identified using headspace-gas chromatography. The analysis revealed that γ-hexalactone, γ-dodecalactone, δ-tetradecalactone, and δ-hexadecalactone were present as sweet aroma components of beef tallow prepared from marbling and muscle. Since we previously reported that γ-hexalactone formation correlates with linoleic acid content in beef, we analyzed ten oxidized fatty acids derived from linoleic acid by liquid chromatography-triple quadrupole mass spectrometry and detected two hydroxy-octadecadienoic acids (9S-HODE and 13S-HODE) in beef tallow. Significant differences in arachidonic acid 15-lipoxygenase and cyclooxygenase protein expression levels among subcutaneous fat, intramuscular fat, and muscle tissue were observed. Our results suggest that the combination of linoleic acid and the expression of lipid oxidase derived from beef muscle and intramuscular fat produce hydroxy fatty acids that result in a sweet aroma.

  2022年04月, Metabolites, 12(4) (4), 英語, 国際誌

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Combination therapy for hepatocellular carcinoma with diacylglycerol kinase alpha inhibition and anti-programmed cell death-1 ligand blockade.

  Naoki Okada, Ko Sugiyama, Shunsuke Shichi, Yasuhito Shirai, Kaoru Goto, Fumio Sakane, Hidemitsu Kitamura, Akinobu Taketomi

  Activation of diacylglycerol kinase alpha (DGKα) augments proliferation and suppresses apoptosis of cancer cells and induces T lymphocyte anergy. We investigated the dual effects of DGKα inhibition on tumorigenesis and anti-tumor immunity with the aim of establishing a novel therapeutic strategy for cancer. We examined the effects of a DGKα inhibitor (DGKAI) on liver cancer cell proliferation and cytokine production by immune cells in vitro and on tumorigenesis and host immunity in a hepatocellular carcinoma (HCC) mouse model. Oral DGKAI significantly suppressed tumor growth and prolonged survival in model mice. Tumor infiltration of T cells and dendritic cells was also enhanced in mice treated with DGKAI, and the production of cytokines and cytotoxic molecules by CD4+ and CD8+ T cells was increased. Depletion of CD8+ T cells reduced the effect of DGKAI. Furthermore, interferon-γ stimulation augmented the expression of programmed cell death-1 ligand (PD-L1) on cancer cells, and DGKAI plus an anti-PD-L1 antibody strongly suppressed the tumor growth. These results suggest that DGKα inhibition may be a promising new treatment strategy for HCC.

  2022年04月, Cancer immunology, immunotherapy : CII, 71(4) (4), 889 - 903, 英語, 国際誌

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• RalA, PLD and mTORC1 Are Required for Kinase-Independent Pathways in DGKβ-Induced Neurite Outgrowth.

  Takuya Kano, Ryosuke Tsumagari, Akio Nakashima, Ushio Kikkawa, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Nobuyuki Takei, Yasuhito Shirai

  Diacylglycerol kinase β (DGKβ) is an enzyme that converts diacylglycerol to phosphatidic acid and is mainly expressed in the cerebral cortex, hippocampus and striatum. We previously reported that DGKβ induces neurite outgrowth and spinogenesis, contributing to higher brain functions, including emotion and memory. To elucidate the mechanisms involved in neuronal development by DGKβ, we investigated the importance of DGKβ activity in the induction of neurite outgrowth using human neuroblastoma SH-SY5Y cells. Interestingly, both wild-type DGKβ and the kinase-negative (KN) mutant partially induced neurite outgrowth, and these functions shared a common pathway via the activation of mammalian target of rapamycin complex 1 (mTORC1). In addition, we found that DGKβ interacted with the small GTPase RalA and that siRNA against RalA and phospholipase D (PLD) inhibitor treatments abolished DGKβKN-induced neurite outgrowth. These results indicate that binding of RalA and activation of PLD and mTORC1 are involved in DGKβKN-induced neurite outgrowth. Taken together with our previous reports, mTORC1 is a key molecule in both kinase-dependent and kinase-independent pathways of DGKβ-mediated neurite outgrowth, which is important for higher brain functions.

  2021年12月, Biomolecules, 11(12) (12), 英語, 国際誌

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Milk oligosaccharide-mediated cross-feeding between Enterococcus gallinarum and lactobacilli in the gut microbiota of infant rats

  Saki MATSUI, Hazuki AKAZAWA, Yuji TSUJIKAWA, Itsuko FUKUDA, Yoshihiro SUZUKI, Yuji YAMAMOTO, Takao MUKAI, Yasuhito SHIRAI, Ro OSAWA

  We investigated bacteria that have a nutritional symbiotic relationship with respect to milk oligosaccharides in gut microbiota of suckling rats, with specific reference to sialyllactose (SL) degrading Enterococcus gallinarum. Our next generation sequencing analysis of the colonic contents of 12-day-old suckling rats revealed that almost half of the bacteria in the microbiota belonged to the Lactobacillaceae family. Major Lactobacillus species in the contents were identified as L. johnsonii, L. murinus, and L. reuteri. We then monitored changes in numbers of the above Lactobacillus species, E. gallinarum, and the bacteria belonging to the family Enterobacteriaceae (i.e., enterobacteria) in the colonic contents of infant rats at 7, 12, 21, 28, and 35 days of age by using real-time PCR assays targeting these bacterial groups. The 7-day-old infant rats had a gut microbiota in which enterobacteria were predominant. Such dominance was replaced by L. johnsonii and the concomitant E. gallinarum markedly increased in those of 12 and 21 days of ages. During this period, the number of enterobacteria declined dramatically, but that of L. reuteri surged dramatically. Our separate in vitro experiment showed that supplementation of culture media with SL promoted the growth of L. johnsonii and E. gallinarum, with marked production of lactic acid. These findings revealed possible milk oligosaccharide-mediated cross-feeding between E. gallinarum and L. johnsonii, with the former degrading SL to release lactose to be utilized by the latter.

  BMFH Press, 2021年10月, Bioscience of Microbiota, Food and Health, 40(4) (4), 204 - 211, 英語, 国内誌

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Gene Expression Analysis Provides New Insights into the Mechanism of Intramuscular Fat Formation in Japanese Black Cattle

  Shuji Ueda, Mana Hosoda, Ken-ichi Yoshino, Minoru Yamanoue, Yasuhito Shirai

  Japanese Black cattle (Japanese Wagyu) have a unique phenotype in which ectopic intramuscular fat accumulates in skeletal muscle, producing finely marbled beef. However, the mechanism of intramuscular fat formation in Japanese Black cattle remains unclear. To investigate the key genes involved in intramuscular fat accumulation, we comprehensively analyzed mRNA levels in subcutaneous and intramuscular fat tissues using RNA sequence (RNA-seq) analysis, which detected 27,606 genes. We identified eight key genes, namely carboxypeptidase E, tenascin C, transgelin, collagen type IV alpha 5 (COL4A5), cysteine and glycine-rich protein 2, PDZ, and LIM domain 3, phosphatase 1 regulatory inhibitor subunit 14A, and regulator of calcineurin 2. These genes were highly and specifically expressed in intramuscular fat tissue. Immunohistochemical analysis revealed a collagen network, including COL4A5, in the basement membrane around the intramuscular fat tissue. Moreover, pathway analysis revealed that, in intramuscular fat tissue, differentially expressed genes are related to cell adhesion, proliferation, and cancer pathways. Furthermore, pathway analysis showed that the transforming growth factor-β (TGF-β) and small GTPases regulators RASGRP3, ARHGEF26, ARHGAP10, ARHGAP24, and DLC were upregulated in intramuscular fat. Our study suggests that these genes are involved in intramuscular fat formation in Japanese Black cattle.

  MDPI AG, 2021年07月, Genes, 12(8) (8), 1107 - 1107

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Exploring the Lipids Involved in the Formation of Characteristic Lactones in Japanese Black Cattle

  Shuji Ueda, Ryo Sasaki, Rio Nakabayashi, Minoru Yamanoue, Yasuhito Sirai, Eiji Iwamoto

  The meat from Japanese Black cattle (Japanese Wagyu) is finely marbled and exhibits a rich and sweet aroma known as Wagyu beef aroma. To clarify the key metabolites involved in the aroma, we analyzed the correlation between lactone and lipid composition in Japanese Black cattle. Using gas chromatography-olfactometry, we identified 39 characteristic odorants of the intermuscular fat. Seven characteristic lactones considered to be involved in Wagyu beef aroma were quantified and compared in the marbled area and intermuscular fat using a stable isotope dilution assay. Among them, γ-hexalactone was the only lactone whose level was significantly higher in the marbled area. To explore the lipid species involved in lactone formation, we analyzed samples with different aroma characteristics. Liquid chromatography-mass spectrometry revealed eight lipid classes and showed significant differences in triacylglycerides (TAGs). To determine the molecular species of TAGs, we performed high-performance liquid chromatography analysis and identified 14 TAG species. However, these analyses showed that seven lactones had a low correlation with the TAGs. However, γ-hexalactone showed a positive correlation with linoleic acid. This study suggests that lipid composition affects the characteristic lactone profile involved in the Wagyu beef aroma.

  MDPI AG, 2021年03月, Metabolites, 11(4) (4), 203

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Motor Dyscoordination and Alteration of Functional Correlation Between DGKγ and PKCγ in Senescence-Accelerated Mouse Prone 8 (SAMP8)

  Ryosuke Tsumagari, Kenta Maruo, Takaaki Nakao, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Yasuhito Shirai

  Senescence-accelerated mouse prone 8 (SAMP8) is an animal model of age-related central nervous system (CNS) disorders. Although SAMP8 shows deficits in learning, memory, and emotion, its motor coordination has not been clarified. We have recently reported that DGKγ-regulated PKCγ activity is important for cerebellar motor coordination. However, involvement of the functional correlation between the kinases in age-related motor dyscoordination still remains unknown. Therefore, we have investigated the motor coordination in SAMP8 and involvement of the functional correlation between DGKγ and PKCγ in the age-related motor dyscoordination. Although 6 weeks old SAMP8 showed equivalent motor coordination with control mice (SAMR1) in the rotarod test, 24 weeks old SAMP8 exhibited significantly less latency in the rotarod test and more frequent slips in the beam test compared to the age-matched SAMR1. Furthermore, 24 weeks old SAMP8 showed the higher locomotor activity in open field test and Y-maze test. Western blotting revealed that DGKγ expression decreased in the cerebellum of 24 weeks old SAMP8, while PKCγ was upregulated. These results suggest that SAMP8 is a useful model of age-related motor dysfunction and that the DGKγ-regulated PKCγ activity is involved in the age-related motor dyscoordination.

  Frontiers Media SA, 2021年01月, Frontiers in Aging Neuroscience, 13

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Exploring the Characteristic Aroma of Beef from Japanese Black Cattle (Japanese Wagyu) via Sensory Evaluation and Gas Chromatography-Olfactometry

  Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Yasuhito Sirai, Eiji Iwamoto

  Beef from Japanese Black cattle (Japanese Wagyu) is renowned for its flavor characteristics. To clarify the key metabolites contributing to this rich and sweet aroma of beef, an omics analysis combined with GC-olfactometry (GC-O) and metabolomics analysis with gas chromatography–mass spectrometry (GC-MS) were applied. GC-O analysis identified 39 odor-active odorants from the volatile fraction of boiled beef distilled by solvent-assisted flavor evaporation. Eight odorants predicted to contribute to Wagyu beef aroma were compared between Japanese Black cattle and Holstein cattle using a stable isotope dilution assay with GC–tandem quadrupole mass spectrometry. By correlating the sensory evaluation values of retronasal aroma, γ-hexalactone, γ-decalactone, and γ-undecalactone showed a high correlation with the Wagyu beef aroma. Metabolomics data revealed a high correlation between the amounts of odorants and multiple metabolites, such as glutamine, decanoic acid, lactic acid, and phosphoric acid. These results provide useful information for assessing the aroma and quality of beef.

  MDPI AG, 2021年01月, Metabolites, 11(1) (1), 56

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Protective effect of Zingiber zerumbet Smith extract on thermotolerance

  Yasuhito Shirai, Hisakazu Kobayashi, Shuji Ueda, Yun Sang Soon, Akiho Kushiya, Ryosuke Tsumagari, Minoru Yamanoue

  Background: Global warming causes severe heat conditions. Heat stress contributes to higher morbidity of heatstroke in human and mortality in livestock. To protect them from heat stress, thermotolerance mechanisms were widely studied, and some studies suggest relationship between heat shock proteins (HSPs) and thermotolerance. HSPs were not induced by only heat shock but also some stimulations including bioactive compounds from plants. Zingiber zerumbet is a perennial herb found in many tropical countries, including Thailand. The rhizome of Zingiber zerumbet contains zerumbone that is a bioactive compound to induce HSPs expression in animal cells.Objective: To prevent higher morbidity of heatstroke in human and mortality in livestock by the heat stress, we investigated the effect of zerumbone, the extract of Zingiber zerumbet Smith, on thermotolerance, using a cell line and mice.Methods: The murine liver hepatoma cell line, Hepa1c1c7 cells, were incubated in medium supplemented with extract from rhizome of Zingiber zerumbet Simith containing zerumbone, and then the expression of heat shock proteins (HSP) 40, 70 and 90 were investigated by western blotting. Furthermore, we established the evaluation system of thermotolerance using mice, and studied the effect of the extract on the growth rate of mice under the heat shock treatment. Briefly, 4 weeks old C57BL6 mice were fed that with the extract (or vehicle) for a week before the first heat shock treatment (38 °C for an hour). Before and after five days heat treatment, body weights were measured. The protein expressions of heat shock proteins in liver were measured by western blotting using HSPs antibodies.Results: The extract of Zingiber zerumbet rhizome, equivalent to 50 μM zerumbone, significantly increased the expression of heat shock proteins (HSP40, HSP70, HSP90). The growth rate of the mice under the heat treatment were lower than control. The feeding with the extract containing 25 ppm zerumbone have significantly attenuated the decline of the growth rate led by the heat treatment, whereas there was little effect on mouse growth rate grown under normal conditions. The protein expression of HSP70 in the liver of zerumbone-fed mice was upregulated compared with control mice, equivalent to heat treatment without zerumbone. On the other hand, both treatments of zerumbone and heat resulted in highest HSP70 expression among four groups.Conclusion: Our study demonstrated that oral administration of the extract of Zingiber zerumbet Smith led to the attenuation of decline of growth rate induced by heat treatment. HSP70 expression in murine liver was enhanced by either feeding the extract or heat treatment. More interestingly, HSP70 expression was further enhanced by both treatments of zerumbone and heat. These results suggested that zerumbone may contribute to thermotolerance via, at least, HSP70 expression.Keywords: Zingiber zerumbet, thermotolerance, heat shock protein

  Functional Food Center, 2021年01月, Bioactive Compounds in Health and Disease, 4(1) (1), 1 - 1

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• The mechanisms of ameliorating effect of a green tea polyphenol on diabetic nephropathy based on diacylglycerol kinase α

  Daiki Hayashi, Liuqing Wang, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Hitoshi Ashida, Yasuhito Shirai

  Significant efforts have been made to ameliorate diabetic nephropathy (DN) by inhibiting protein kinase C. However, these efforts have not been successful in human trials, suggesting that novel therapeutic strategies are required. Thus far, it has been reported that green tea polyphenol epigallocatechin gallate (EGCg) improved albuminuria in DN in a human trial. Our previous study revealed that activation of diacylglycerol kinase α (DGKα) plays a crucial role in the amelioration of DN and that EGCg activates DGKα. Here, we investigated whether and how DGKα contributes to the amelioration of DN upon stimulation by EGCg by using streptozotocin-induced type 1 diabetic model mice. Our results revealed that EGCg ameliorated albuminuria in DN through DGKα in vivo, and methylated EGCg, which has higher absorption in the plasma improved albuminuria in DN effectively. Additionally, we showed that c-Src mediated EGCg-induced DGKα translocation and colocalized with the 67 kDa laminin receptor, which is an EGCg receptor. Furthermore, EGCg attenuated the loss of podocytes in DN by preventing a decrease in focal adhesion under high glucose conditions. Our results indicate that the DGKα pathway is an attractive therapeutic target and that activating this pathway is a novel strategy for treating DN.

  Springer Science and Business Media LLC, 2020年12月, Scientific Reports, 10(1) (1)

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Precise Regulation of the Basal PKCγ Activity by DGKγ Is Crucial for Motor Coordination.

  Ryosuke Tsumagari, Kenta Maruo, Sho Kakizawa, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Hiromitsu Saito, Noboru Suzuki, Yasuhito Shirai

  Diacylglycerol kinase γ (DGKγ) is a lipid kinase to convert diacylglycerol (DG) to phosphatidic acid (PA) and indirectly regulates protein kinase C γ (PKCγ) activity. We previously reported that the basal PKCγ upregulation impairs cerebellar long-term depression (LTD) in the conventional DGKγ knockout (KO) mice. However, the precise mechanism in impaired cerebellar LTD by upregulated PKCγ has not been clearly understood. Therefore, we first produced Purkinje cell-specific DGKγ KO (tm1d) mice to investigate the specific function of DGKγ in Purkinje cells and confirmed that tm1d mice showed cerebellar motor dysfunction in the rotarod and beam tests, and the basal PKCγ upregulation but not PKCα in the cerebellum of tm1d mice. Then, the LTD-induced chemical stimulation, K-glu (50 mM KCl + 100 µM, did not induce phosphorylation of PKCα and dissociation of GluR2 and glutamate receptor interacting protein (GRIP) in the acute cerebellar slices of tm1d mice. Furthermore, treatment with the PKCγ inhibitor, scutellarin, rescued cerebellar LTD, with the phosphorylation of PKCα and the dissociation of GluR2 and GRIP. In addition, nonselective transient receptor potential cation channel type 3 (TRPC3) was negatively regulated by upregulated PKCγ. These results demonstrated that DGKγ contributes to cerebellar LTD by regulation of the basal PKCγ activity.

  2020年10月, International journal of molecular sciences, 21(21) (21), 英語, 国際誌

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• 67kDaラミニンレセプターはビタミンEとの結合によりパルミトイル化修飾を受ける

  岡本 聖香, 林 大輝, 足立 直子, Varnavas Mouchlis, 上田 修司, 山之上 稔, Dennis Edward, 斎藤 尚亮, 伊藤 俊樹, 白井 康仁

  (公社)日本生化学会, 2020年09月, 日本生化学会大会プログラム・講演要旨集, 93回, [1Z09 - 161)], 日本語


• mTORC1 is involved in DGKβ-induced neurite outgrowth and spinogenesis.

  Hiroko Nakai, Ryosuke Tsumagari, Kenta Maruo, Akio Nakashima, Ushio Kikkawa, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Naoaki Saito, Nobuyuki Takei, Yasuhito Shirai

  Diacylglycerol kinase β (DGKβ) is an enzyme converting DG to phosphatidic acid (PA) and is specifically expressed in neurons, especially those in the cerebral cortex, hippocampus and striatum. We previously reported that DGKβ induces neurite outgrowth and spinogenesis, contributing to higher brain function including emotion and memory, and plasma membrane localization of DGKβ via the C1 domain and a cluster of basic amino acids at the C-terminus is necessary for its function. To clarify the mechanisms involved in neuronal development by DGKβ, we investigated whether DGKβ activity induces neurite outgrowth using human neuroblastoma SH-SY5Y cells. DGKβ induced neurite outgrowth by activation of mammalian target of rapamycin complex 1 (mTORC1) through a kinase-dependent pathway. In addition, in primary cultured cortical and hippocampal neurons, inhibition of mTORC1 abolished DGKβ induced-neurite outgrowth, branching and spinogenesis. These results indicated that DGKβ induces neurite outgrowth and spinogenesis by activating mTORC1 in a kinase-dependent pathway.

  2020年03月, Neurochemistry international, 134, 104645 - 104645, 英語, 国際誌

  [査読有り]


• Comparative Study of the Effects of Different Pretreatment Procedures on Beef Taste-traits Using an Electronic Taste Sensing System

  Yanan Zhao, Masahiro Nishida, Shuji Ueda, Yasuhito Shirai, Masaaki Habara, Hidekazu Ikezaki, Minoru Yamanoue

  Japanese Society for Food Science and Technology, 2020年, Food Science and Technology Research, 26(3) (3), 329 - 338

  研究論文（学術雑誌）


• Dgkg knock-out mice show impairments in cerebellar motor coordination, Ltd, and the dendritic development of purkinje cells through the activation of pkcg

  Ryosuke Tsumagari, Sho Kakizawa, Sakiko Kikunaga, Yoshitaka Fujihara, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Naoaki Saito, Masahito Ikawa, Yasuhito Shirai

  2020年, eNeuro, 7(2) (2)

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Screening of subtype-specific activators and inhibitors for diacylglycerol kinase.

  Hayashi D, Tsumagari R, Liu K, Ueda S, Yamanoue M, Sakane F, Shirai Y

  2019年06月, Journal of biochemistry, 165(6) (6), 517 - 522, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• DzMab-1: Anti-Human Diacylglycerol Kinaseζ Monoclonal Antibody for Immunocytochemistry.

  Nakano T, Ogasawara S, Tanaka T, Hozumi Y, Sano M, Sayama Y, Yamada S, Shirai Y, Kaneko MK, Kato Y, Goto K

  2019年, Monoclonal antibodies in immunodiagnosis and immunotherapy, 38, 179 - 182, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Comparative metabolomics of Japanese Black cattle beef and other meats using gas chromatography–mass spectrometry

  UEDA SYUJI, IWAMOTO EIJI, KATO YOSHIKI, SHINOHARA MASAKAZU, SHIRAI YASUHITO, YAMANOUE MINORU

  Progress in metabolomic analysis now allows the evaluation of food quality. This study aims to identify the metabolites in meat from livestock using a metabolomic approach. Using gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS), many metabolites were reproducibly detected in meats, and distinct differences between livestock species (cattle, pigs, and chickens) were indicated. A comparison of metabolites between tissues types (muscle, intramuscular fat, and intermuscular fat) in marbled beef of Japanese Black cattle revealed that most metabolites are abundant in the muscle tissue. Several metabolites (medium-chain fatty acids, etc.) involved in triacylglycerol synthesis were uniquely detected in fat tissue. Additionally, the results of multivariate analysis suggest that GC/MS analysis of metabolites can distinguish between cattle breeds. These results provide useful information for the analysis of meat quality using GC/MS-based metabolomic analysis.ABBREVIATIONS: GC/MS: gas chromatography-mass spectrometry; NMR: nuclear magnetic resonance; MS: mass spectrometry; IS: 2-isopropylmalic acid; MSTFA: N-Methyl-N-trimethylsilyltrifluoroacetamide; CV: coefficient of variation; TBS: Tris-buffered saline; MHC: myosin fast type; PCA: principal component analysis; OPLS-DA: orthogonal partial least-squares discriminant analysis; O2PLS: two-way orthogonal partial least-squares.

  日本農芸化学会, 2019年01月, Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, 83(1) (1), 137 - 147, 英語, 国際誌

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Lentinan Exerts its Anti-Inflammatory Activity by Suppressing TNFR1 Transfer to the Surface of Intestinal Epithelial Cells through Dectin-1 in an in vitro and mice model

  SAKAGUCHI KANA, SHIRAI YASUHITO, ITOH TOSHIKI, MIZUNO MASASHI

  2018年12月, Immunome Research, (14) (14), 165, 英語

  [査読有り][招待有り]

  研究論文（学術雑誌）


• DgMab-6: Antihuman DGKγ Monoclonal Antibody for Immunocytochemistry

  Nakano T, Ogasawara S, Tanaka T, Hozumi Y, Yamaki A, Sakane F, Shirai Y, Nakamura T, Yanaka M, Yamada S, Kaneko MK, Kato Y, Goto K

  Diacylglycerol kinase (DGK) phosphorylates diacylglycerol (DG) to produce phosphatidic acid (PA). Since both DG and PA serve as lipidic second messengers, DGK plays a pivotal role in regulating the balance of two signaling pathways mediated by DG and PA in cellular functions. Reportedly, DGKγ, one of the 10 mammalian DGK isozymes, is involved in leukemic cell differentiation, mast cell function, and membrane traffic. Transfection studies using tagged expression vectors and immunohistochemistry on rat tissues revealed that DGKγ localizes to the cytoplasm, plasma membrane, and Golgi apparatus. However, a limited number of studies reported the detailed localization of native protein of DGKγ in human tissues and cells. In this study, we developed a novel anti-DGKγ monoclonal antibody, DgMab-6, which is very useful in immunocytochemistry of human cultured cells.

  2018年11月, Monoclon Antib Immunodiagn Immunother, 37(5) (5), 229 - 232, 英語, 国際誌

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Comparative metabolomics of Japanese Black cattle beef and other meats using gas chromatography-mass spectrometry

  Ueda S, Iwamoto E, Kato Y, Shinohara M, Shirai Y, Yamanoue M

  2018年10月, Biosci Biotechnol Biochem, 18, 1 - 11, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• RhoA結合蛋白質として同定されたSTE20 like kinaseの筋細胞の肥大化における役割

  櫛谷 晃帆, 上田 修司, 前田 愛実, 加藤 良毅, 吉野 健一, 竹内 敦子, 山之上 稔, 白井 康仁

  (公社)日本生化学会, 2018年09月, 日本生化学会大会プログラム・講演要旨集, 91回, [1T14e - 370)], 日本語


• [Importance of diacylglycerol signaling in cerebellar motor coordination].

  Ryosuke Tsumagari, Yasuhito Shirai

  Brain can be roughly divided into two parts, cerebrum and cerebellum. Cerebrum controls higher brain functions including memory, emotion and cognition, while cerebellum is important for motor coordination. The only output neuron in cerebellum, Purkinje cell, regulates long term depression (LTD). LTD and morphology of Purkinje cells are important for motor function. So far, disorder of protein kinase C (PKC) α and γ, which are expressed in Purkinje cells, impaired LTD, morphology of Purkinje cells and motor coordination. Diacylglycerol kinase (DGK) γ phosphorylates diacylglycerol (DG) and is abundantly expressed in Purkinje cells. In other words, DGKγ can attenuate PKC activity by reducing amount of DG and may contribute to motor coordination. However, its physiological role has not been elucidated. Therefore, we developed DGKγ knockout (KO) mice and investigated their LTD, morphology of Purkinje cells, and cerebellar motor coordination. We found that cerebellar motor coordination and LTD were impaired in the DGKγ KO mice and the morphology of Purkinje cells from DGKγ KO mice was significantly retracted. Interestingly, abnormal activation of PKCγ was involved in impairment of the morphology of Purkinje cells from DGKγ KO mice. These results indicated that DGKγ was involved in cerebellar LTD and morphology of Purkinje cells, and DG signaling is important for cerebellar motor coordination.

  2018年, Nihon yakurigaku zasshi. Folia pharmacologica Japonica, 152(2) (2), 90 - 93, 日本語, 国内誌

  研究論文（学術雑誌）


• Epigallocatechin gallate induces GLUT4 translocation in skeletal muscle through both PI3K- and AMPK-dependent pathways.

  UEDA-WAKAGI Manabu, HAYASHIBARA Kaori, NAGANO Tomoya, IKEDA Masaki, YUAN Sihao, UEDA Shuji, SHIRAI Yasuhito, YOSHIDA Ken-ichi, ASHIDA Hitoshi

  Our previous report demonstrated that epigallocatechin gallate (EGCg) promotes translocation of glucose transporter 4 (GLUT4) in skeletal muscle. In this study, we investigated the molecular mechanism of GLUT4 translocation by EGCg at the physiological concentration range. In L6 cells, EGCg induced phosphorylation of phosphatidylinositide 3'-kinase (PI3K) and downstream protein kinase C (PKC) λ/ξ without affecting the phosphorylation of insulin receptor and Akt. EGCg-induced GLUT4 translocation was suppressed by RNA interference-mediated knockdown of PI3K and treatment with PKC inhibitor Go6983. Moreover, EGCg increased Rac1 activity and actin remodelling as downstream events of PKCλ/ξ. These results indicate that EGCg induced GLUT4 translocation through a PI3K-dependent pathway, but its mode of action differed from that of insulin. EGCg also induced GLUT4 translocation through a 5'-adenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK)-dependent pathway. 67 kDa laminin receptor, which is a target molecule of EGCg, was not involved in EGCg-induced glucose uptake in L6 cells. The oral administration of EGCg suppressed postprandial hyperglycaemia accompanied by GLUT4 translocation through both PI3K- and AMPK-dependent pathways, and promoted glycogen accumulation in skeletal muscle of ICR mice. EGCg promotes GLUT4 translocation through both PI3K- and AMPK-dependent pathways and glycogen accumulation in skeletal muscle.

  2018年, Food and Function, 9(8) (8), 4223 - 4233, 英語, 国際誌

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Amelioration of diabetic nephropathy by oral administration of d-α-tocopherol and its mechanisms

  HAYASHI Daiki, UEDA Shuji, YAMANOUE Minoru, ASHIDA Hitoshi, SHIRAI Yasuhito

  Japan Society for Bioscience Biotechnology and Agrochemistry, 2018年, Bioscience Biotechnology and Biochemistry, 82(1) (1), 65 - 73, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Diacylglycerol Kinase alpha is Involved in the Vitamin E-Induced Amelioration of Diabetic Nephropathy in Mice

  Daiki Hayashi, Keiko Yagi, Chihong Song, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Matthew Topham, Toshinobu Suzaki, Naoaki Saito, Noriaki Emoto, Yasuhito Shirai

  2017年06月, SCIENTIFIC REPORTS, 7, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Enzymatically synthesized glycogen inhibits colitis through decreasing oxidative stress.

  白井 康仁

  2017年02月, Free Radic Biol Med, 106, 355–367, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• 2)Effects of vitamin E and its derivatives on diabetic nephropathy in Rats and identification of diacylglycerol kinase subtype involved in the improvement of diabetic nephropathy

  Kakehi Tomoko, Yagi Keiko, Saito Naoaki, SHIRAI YASUHITO

  2017年, Functional Foods in Health and Disease, 7(10) (10), 816 - 832, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• A novel diacylglycerol kinase alpha-selective inhibitor, CU-3, induces cancer cell apoptosis and enhances immune response

  Ke Liu, Naoko Kunii, Megumi Sakuma, Atsumi Yamaki, Satoru Mizuno, Mayu Sato, Hiromichi Sakai, Sayaka Kado, Kazuo Kumagai, Hirotatsu Kojima, Takayoshi Okabe, Tetsuo Nagano, Yasuhito Shirai, Fumio Sakane

  2016年03月, JOURNAL OF LIPID RESEARCH, 57(3) (3), 368 - 379, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• A novel diacylglycerol kinase α-selective inhibitor, CU-3, induces cancer cell apoptosis and enhances immune response.

  K. Lui, N. Kunii N, M Sakuma, A Yamaki, S. Mizuno, M. Sato, H. Sakai, S..Kado, K. Kumagai, H. Kojima, T. Okabe, T. Nagano, Y.Shirai, F. Sakane

  2016年03月, Journal of lipid research, 57(3) (3), 368 - 379, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Epigallocatechin-3-gallate activates diacylglycerol kinase alpha via a 67 kDa laminin receptor: A possibility of galloylated catechins as functional food to prevent and/or improve diabetic renal dysfunctions

  Daiki Hayashi, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Naoki Saito, Hitoshi Ashida, Yasuhito Shirai

  2015年05月, JOURNAL OF FUNCTIONAL FOODS, 15, 561 - 569, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Chicken heat shock protein HSPB1 increases and interacts with αB-crystallin in aged skeletal muscle

  上田 修司, 小鍛冶 泰斗, 清水 俊作, 本田 和久, 吉野 健一, 上曽山 博, 白井 康仁, 山之上 稔

  2015年, Bioscience Biotechnology and Biochemistry, 79(11) (11), 1867 - 1875, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• 脂質結合ドメインを用いた新規ホスファチジン酸可視化プローブの開発

  沖本航, 中井寛子, 伊藤俊樹, 上田修司, 山之上稔, 白井康仁

  2014年12月, 日本農芸化学会関西支部講演会講演要旨集, 487th, 11, 日本語

  研究論文（その他学術会議資料等）


• 筋細胞におけるHSPB1の結合分子の探索とその機能解析

  小鍛治 泰斗, 上田 修司, 吉野 健一, 山之上 稔, 白井 康仁

  (公社)日本生化学会, 2014年10月, 日本生化学会大会プログラム・講演要旨集, 87回, [4P - 154], 日本語


• Diacylglycerol kinase as a possible therapeutic target for neuronal diseases

  Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2014年04月, JOURNAL OF BIOMEDICAL SCIENCE, 21, 28, 英語

  [査読有り][招待有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Both the C1 domain and a basic amino acid cluster at the C-terminus are important for the neurite and branch induction ability of DGKβ

  T. Kano, T. Kouzuki, S. Mizuno, UEDA SYUJI, YAMANOUE MINORU, SAKANE F, SAITO N, SHIRAI YASUHITO

  2014年04月, Biochemical and Biophysical Research Communications, 447(1) (1), 89 - 94, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Diacylglycerol kinase γ regulates antigen-induced mast cell degranulation by mediating Ca(2+) influxes.

  佐久間 恵, 白井 康仁, 上山 健彦, 齋藤 尚亮

  2014年02月, Biochem Biophys Res Commun, 445, 340 - 350, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• The expression of diacylglycerol kinase theta during the organogenesis of mouse embryos

  Shuji Ueda, Becky Tu-Sekine, Minoru Yamanoue, Daniel M. Raben, Yasuhito Shirai

  2013年10月, BMC DEVELOPMENTAL BIOLOGY, 13, 35, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Depression of type I diacylglycerol kinases in pancreatic -cells from male mice results in impaired insulin secretion

  金子 雪子, 小林 祐輔, 元木 慶介, 中田 邦人, 宮川 祥子, 山本 麻央, 林 大輝, 白井 康仁, 坂根 郁夫, 石川 智久

  Endocrinology, 2013年09月, Depression of type I diacylglycerol kinases in pancreatic -cells from male mice results in impaired insulin secretion, 154, 4089 - 4098, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• PKC-ε pseudosubstrate and catalytic activity are necessary for membrane delivery during IgG-Mediated Phagocytosis

  Wood, T.R, Chow, R.Y, Hanes, C.M, Zhang, X, Kashiwagi, K, 白井 康仁, Treback, M, Loegering, D.J, 齋藤 尚亮, Lennartz, M.R

  2013年07月, J. Leukocyte Biol., 94(1) (1), 109 - 122, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Both C1B domain and pseudosubstrate region are necessary for saturated fatty acid-induced translocation of PKC to the plasma membrane: Distinct role of intramolecular domains for different translocation

  西本 高明, 柏木 香保里, 齋藤 尚亮, 白井 康仁

  2013年03月, Biochem. Biophys. Res. Comm, 432(2) (2), 384 - 388, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Increased seizure susceptibility in a mouse with diacylglycerol kinase β deficiency

  石坂 光絵, 鶴間 一寛, 嶋澤 雅光, 白井 康仁, 齋藤 尚亮, 原 英彰

  2013年, Neuroscience & Medicine, 121, 181P - 181P, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Novel PKC alpha-mediated phosphorylation site(s) on cofilin and their potential role in terminating histamine release

  Megumi Sakuma, Yasuhito Shirai, Ken-ichi Yoshino, Maho Kuramasu, Tomofumi Nakamura, Toshihiko Yanagita, Kensaku Mizuno, Izumi Hide, Yoshihiro Nakata, Naoaki Saito

  2012年09月, MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL, 23(18) (18), 3707 - 3721, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• c-Abl Tyrosine Kinase Regulates Serum-induced Nuclear Export of Diacylglycerol Kinase alpha by Phosphorylation at Tyr-218

  Takehiro Matsubara, Momo Ikeda, Yuko Kiso, Megumi Sakuma, Ken-ichi Yoshino, Fumio Sakane, Isabel Merida, Naoaki Saito, Yasuhito Shirai

  2012年02月, JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 287(8) (8), 5507 - 5517, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Regulation of diacylglycerol kinase by phosphorylation

  Y. Shirai, M. Ikeda, N. Saito

  Elsevier Ltd, 2012年, Advances in Biological Regulation, 52(1) (1), 239 - 247, 英語

  [査読有り][招待有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Diacylglycerol kinase (DGK) as a regulator of PKC

  白井 康仁, 齋藤 尚亮

  2012年, Neuromethods, 68, 259 - 271, 英語

  [査読有り][招待有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Streptococcus mutans diacylglycerol kinase homologue: a potential target for anti-caries chemotherapy

  Yukie Shibata, Miki Kawada-Matsuo, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito, Dan Li, Yoshihisa Yamashita

  2011年05月, JOURNAL OF MEDICAL MICROBIOLOGY, 60(5) (5), 625 - 630, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Direct binding of RalA to PKC eta and its crucial role in morphological change during keratinocyte differentiation

  Shirai, Yasuhito, Morioka, Shoko, Sakuma, Megumi, Yoshino, Ken-ichi, Otsuji, Chihiro, Sakai, Norio, Kashiwagi, Kaori, Chida, Kazuhiro, Shirakawa, Ryutaro, Horiuchi, Hisanori e

  During differentiation, keratinocytes undergo a dramatic shape change from small and round to large and flat, in addition to production of proteins necessary for the formation of epidermis. It has been shown that protein kinase C (PKC) eta is crucial for keratinocyte differentiation. However, its role in this process has yet to be fully elucidated. Here, we show that catalytic activity is not necessary for enlarged and flattened morphology of human keratinocytes induced by overexpression of PKC eta, although it is important for gene expression of the marker proteins. In addition, we identify the small G protein RalA as a binding partner of PKC eta, which binds to the C1 domain, an indispensable region for the morphological change. The binding led activation of RalA and actin depolymerization associated with keratinocyte differentiation. siRNA techniques proved that RalA is involved in not only the keratinocyte differentiation induced by PKC eta overexpression but also normal keratinocyte differentiation induced by calcium and cholesterol sulfate. These results provide a new insight into the molecular mechanism of cytoskeletal regulation leading to drastic change of cell shape.

  AMER SOC CELL BIOLOGY, 2011年04月, MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL, 22(8) (8), 1340 - 1352

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Diacylglycerol Kinase beta Knockout Mice Exhibit Lithium-Sensitive Behavioral Abnormalities

  Kenichi Kakefuda, Atsushi Oyagi, Mitsue Ishisaka, Kazuhiro Tsuruma, Masamitsu Shimazawa, Koichi Yokota, Yasuhito Shirai, Kyoji Horie, Naoaki Saito, Junji Takeda, Hideaki Hara

  2010年10月, PLOS ONE, 5(10) (10), e13447, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Suppression mechanisms of flavonoids on aryl hydrocarbon receptor-mediated signal transduction

  Rie Mukai, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito, Itsuko Fukuda, Shin Nishiumi, Ken-ichi Yoshida, Hitoshi Ashida

  2010年09月, ARCHIVES OF BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS, 501(1) (1), 134 - 141, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Essential Role of Neuron-Enriched Diacylglycerol Kinase (DGK), DGK beta in Neurite Spine Formation, Contributing to Cognitive Function

  Yasuhito Shirai, Takeshi Kouzuki, Kenichi Kakefuda, Shigeki Moriguchi, Atsushi Oyagi, Kyoji Horie, Shin-ya Morita, Masamitsu Shimazawa, Kohji Fukunaga, Junji Takeda, Naoaki Saito, Hideaki Hara

  2010年07月, PLOS ONE, 5(7) (7), e11602, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• A critical role of conventional protein kinase C in morphological changes of rodent mast cells

  Yanase Y, Hide I, Mihara S, Shirai Y, Saito N, Nakata Y, Hide M, Sakai N

  2010年02月, Immunol. Cell. Biol, 89, 149 - 159, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Inflammatory Cytokine Tumor Necrosis Factor-alpha Enhances Nerve Growth Factor Production in Human Keratinocytes, HaCaT Cells

  Koji Takaoka, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2009年12月, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 111(4) (4), 381 - 391, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• An essential role of the aPKC-Aurora A-NDEL1 pathway in neurite elongation by modulation of microtubule dynamics

  Daisuke Mori, Masami Yamada, Yuko Mimori-Kiyosue, Yasuhito Shirai, Atsushi Suzuki, Shigeo Ohno, Hideaki saya, Anthony Wynshaw-Boris, Shinji Hirotsune

  2009年09月, NATURE CELL BIOLOGY, 11(9) (9), 1057 - U47, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Subcellular localization of flavonol aglycone in hepatocytes visualized by confocal laser scanning fluorescence microscope

  Rie Mukai, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito, Ken-ichi Yoshida, Hitoshi Ashida

  2009年04月, CYTOTECHNOLOGY, 59(3) (3), 177 - 182, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Kinase activity of the dgk gene product is involved in the virulence of Streptococcus mutans

  Yukie Shibata, Jan R. van der Ploeg, Takeshi Kozuki, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito, Miki Kawada-Matsuo, Toru Takeshita, Yoshihisa Yamashita

  2009年02月, MICROBIOLOGY-SGM, 155, 557 - 565, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Ca2+ oscillation induced by P2Y2 receptor activation and its regulation by a neuron-specific subtype of PKC (gamma PKC)

  Noriaki Ashida, Takehiko Ueyama, Kyoko Rikitake, Yasuhito Shirai, Mika Eto, Takeshi Kondoh, Eiji Kohmura, Naoaki Saito

  2008年12月, NEUROSCIENCE LETTERS, 446(2-3) (2-3), 123 - 128, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Reactive oxygen species derived from NOX1/NADPH oxidase enhance inflammatory pain

  Masakazu Ibi, Kuniharu Matsuno, Dai Shiba, Masato Katsuyama, Kazumi Iwata, Tomoko Kakehi, Takayuki Nakagawa, Kazunori Sango, Yasuhito Shirai, Takahiko Yokoyama, Shuji Kaneko, Naoaki Saito, Chihiro Yabe-Nishimura

  2008年09月, JOURNAL OF NEUROSCIENCE, 28(38) (38), 9486 - 9494, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Protein kinase C epsilon: function in neurons

  Yasuhito Shirai, Naoko Adachi, Naoaki Saito

  2008年08月, FEBS JOURNAL, 275(16) (16), 3988 - 3994, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Enzymological analysis of mutant protein kinase C gamma causing spinocerebellar ataxia type 14 and dysfunction in Ca2+ homeostasis

  Naoko Adachi, Takeshi Kobayashi, Hideyuki Takahashi, Takumi Kawasaki, Yasuhito Shirai, Takehiko Ueyama, Toshio Matsuda, Takahiro Seki, Norio Sakai, Naoaki Saito

  2008年07月, JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 283(28) (28), 19854 - 19863, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Lck-dependent tyrosine phosphorylation of diacylglycerol kinase alpha regulates its membrane association in T cells

  Ernesto Merino, Antonia Avila-Flores, Yasuhito Shirai, Ignacio Moraga, Naoaki Saito, Isabel Merida

  2008年05月, JOURNAL OF IMMUNOLOGY, 180(9) (9), 5805 - 5815, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Regulation of clathrin-dependent endocytosis by diacylglycerol kinase delta: importance of kinase activity and binding to AP2 alpha

  Takumi Kawasaki, Takeshi Kobayashi, Takehiko Ueyama, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2008年01月, BIOCHEMICAL JOURNAL, 409, 471 - 479, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• A novel PIP2 binding of epsilon PKC and its contribution to the neurite induction ability

  Yasuhito Shirai, Takuya Murakami, Maho Kuramasu, Leo Iijima, Naoaki Saito

  2007年09月, JOURNAL OF NEUROCHEMISTRY, 102(5) (5), 1635 - 1644, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• A regulated adaptor function of p40(phox): Distinct p67(phox) membrane targeting by p40(phox) and by p47(phox)

  Takehiko Ueyama, Toshihiko Tatsuno, Takumi Kawasaki, Satoshi Tsujibe, Yasuhito Shirai, Hideki Sumimoto, Thomas L. Leto, Naoaki Saito

  2007年02月, MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL, 18(2) (2), 441 - 454, 英語

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• A regulated adaptor function of p40(phox): Distinct p67(phox) membrane targeting by p40(phox) and by p47(phox)

  Takehiko Ueyama, Toshihiko Tatsuno, Takumi Kawasaki, Satoshi Tsujibe, Yasuhito Shirai, Hideki Sumimoto, Thomas L. Leto, Naoaki Saito

  2007年02月, MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL, 18(2) (2), 441 - 454, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）

  神戸大学リポジトリ（Kernel）へのリンク


• Phosphorylation and up-regulation of diacylglycerol kinase gamma via its interaction with protein kinase C gamma

  Yasuto Yamaguchi, Yasuhito Shirai, Takehiro Matsubara, Koichi Sanse, Masamitsu Kuriyama, Noriko Oshiro, Ken-ichi Yoshino, Kazuyoshi Yonezawa, Yoshitaka Ono, Naoaki Saito

  2006年10月, JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 281(42) (42), 31627 - 31637, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Phosphorylation and up-regulation of diacylglycerol kinase gamma via its interaction with protein kinase C gamma

  Yasuto Yamaguchi, Yasuhito Shirai, Takehiro Matsubara, Koichi Sanse, Masamitsu Kuriyama, Noriko Oshiro, Ken-ichi Yoshino, Kazuyoshi Yonezawa, Yoshitaka Ono, Naoaki Saito

  2006年10月, JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 281(42) (42), 31627 - 31637, 英語

  研究論文（学術雑誌）


• Nuclear transportation of diacylglycerol kinase gamma and its possible function in the nucleus

  T Matsubara, Y Shirai, K Miyasaka, T Murakami, Y Yamaguchi, T Ueyama, M Kai, F Sakane, H Kanoh, T Hashimoto, S Kamada, U Kikkawa, N Saito

  2006年03月, JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 281(10) (10), 6152 - 6164, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Nuclear transportation of diacylglycerol kinase gamma and its possible function in the nucleus

  T Matsubara, Y Shirai, K Miyasaka, T Murakami, Y Yamaguchi, T Ueyama, M Kai, F Sakane, H Kanoh, T Hashimoto, S Kamada, U Kikkawa, N Saito

  2006年03月, JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 281(10) (10), 6152 - 6164, 英語

  研究論文（学術雑誌）


• Targeting of protein kinase C-epsilon during Fc gamma receptor-dependent phagocytosis requires the epsilon C1B domain and phospholipase C-gamma 1

  KL Cheeseman, T Ueyama, TM Michaud, K Kashiwagi, D Wang, LA Flax, Y Shirai, DJ Loegering, N Saito, MR Lennartz

  2006年02月, MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL, 17(2) (2), 799 - 813, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Local disassembly of actin stress fibers induced by selected release of intracellular tension in Osteoblastic cell

  Katsuya Sato, Taiji Adachi, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito, Yoshihiro Tomita

  2006年, Journal of biomechanical science and engineering, 1, 204--214, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Spatiotemporal analysis of the molecular interaction between PICK1 and PKC

  Kenji Masukawa, Norio Sakai, Shiho Ohmori, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2006年, ACTA HISTOCHEMICA ET CYTOCHEMICA, 39(6) (6), 173 - 181, 英語

  研究論文（学術雑誌）


• Spatiotemporal analysis of the molecular interaction between PICK1 and PKC

  Kenji Masukawa, Norio Sakai, Shiho Ohmori, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2006年, ACTA HISTOCHEMICA ET CYTOCHEMICA, 39(6) (6), 173 - 181, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Immunocytochemical localization of a neuron-specific diacylglycerol kinase β and γ in the developing rat brain.

  Adachi Naoko, Oyasu Miho, Taniguchi Taizo, Yamaguchi Yasuto, Takenaka Rika, Shirai Yasuhito, Saito Naoaki

  2005年10月, Mol. Brain Res., 139(2) (2), 288 - 299, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Isoform-specific Membrane Targeting Mechanism of Rac During FcγR-mediated Phagocytosis.-- Positive charge-dependent and independent targeting mechanism of Rac to the phagosome.

  Ueyama Takehiko, Eto Mika, Kami Keiichiro, Tatsuno Toshihiko, Kobayashi Toshihiro, Shirai Yasuhito, Lennarzs R. Michelle, Takeya Ryu, Sumimoto Hideki, Saito Naoaki

  2005年08月, J. Immunol., 175(4) (4), 2381 - 2390, 英語

  研究論文（学術雑誌）


• Localization and functional interrelationships among cytosolic Group IV, secreted Group V, and Ca2+-independent group VI phospholipase A(2)s in P388D(1) macrophages using GFP/RFP constructs

  Y Shirai, J Balsinde, EA Dennis

  2005年07月, BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-MOLECULAR AND CELL BIOLOGY OF LIPIDS, 1735(2) (2), 119 - 129, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Protein kinase C-α mediates TNF release process in RBL-2H3 mast cells-Running title: aPKC mediates TNF release in RBL-2H3 cells-.

  Abdel-Raheem T. Ihab, Hide Izumi, Yanase Yuhki, Shigemoto-Mogami Yukari, Sakai Norio, Shirai Yasuhito, Saito Naoaki, Hamada M. Farid, El-Mahdy A. Nagh, Elisisy El-Din Alaa, Sokar S. Samya, Nakata Yoshihiro

  2005年06月, Br. J. Pharmacol, 145(4) (4), 415 - 423, 英語

  研究論文（学術雑誌）


• Importance of chroman ring and tyrosine phosphorylation in the subtype-specific translocation and activation of diacylglycerol kinase alpha by D-alpha-tocopherol

  R Fukunaga-Takenaka, Y Shirai, K Yagi, N Adachi, N Sakai, E Merino, Merida, I, N Saito

  2005年04月, GENES TO CELLS, 10(4) (4), 311 - 319, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Phosphorylation of PKC activation loop plays an important role in receptor-mediated translocation of PKC

  Takahiro Seki, Hiroaki Matsubayashi, Taku Amano, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito, Norio Sakai

  2005年03月, Genes to Cells, 10(3) (3), 225 - 239

  研究論文（学術雑誌）


• Activation and translocation of PKC delta is necessary for VEGF-induced ERK activation through KDR in FIEK293T cells

  M Kuriyama, T Taniguchi, Y Shirai, A Sasaki, A Yoshimura, N Saito

  2004年12月, BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, 325(3) (3), 843 - 851, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Superoxide production at phagosomal cup/phagosome through beta I protein kinase C during Fc gamma R-mediated phagocytosis in microglia

  T Ueyama, MR Lennartz, Y Noda, T Kobayashi, Y Shirai, K Kikitake, T Yamasaki, S Hayashi, N Sakai, H Seguchi, M Sawada, H Sumimoto, N Saito

  2004年10月, JOURNAL OF IMMUNOLOGY, 173(7) (7), 4582 - 4589, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Propagation of gamma PKC translocation along the dendrites of Purkinje cell in gamma PKC-GFP transgenic mice

  N Sakai, H Tsubokawa, M Matsuzaki, T Kajimoto, E Takahashi, Y Ren, S Ohmori, Y Shirai, H Matsubayashi, JS Chen, RS Duman, H Kasai, N Saito

  2004年10月, GENES TO CELLS, 9(10) (10), 945 - 957, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Phospholipase A2 products retain a neuron specific gamma isoform of PKC on the plasma membrane through the C1 domain - a molecular mechanism for sustained enzyme activity

  K Yagi, Y Shirai, M Hirai, N Sakai, N Saito

  2004年07月, NEUROCHEMISTRY INTERNATIONAL, 45(1) (1), 39 - 47, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• ライブイメージングを用いたプロテインキナーゼCおよびジアシルグリセロールキナーゼの機能解析

  白井 康仁

  プロテインキナーゼC（PKC）は様々な刺激に応答して細胞内局在を変化させる．その様式はサブタイプにより異なるだけでなく，同一サブタイプであっても刺激の種類によって様々である．その結果，もたらされる細胞応答も異なることが明らかになっている．これらの事実は，刺激に応じて細胞内の様々な部位に移動し特異的基質をリン酸化する機構（ターゲティング）こそが，PKCの多岐にわたる機能において重要であることを示唆している．また，PKCの活性を調節しうるジアシルグリセロールキナーゼもサブタイプ特異的に細胞内局在を変化させること，機能的に連関した両酵素のターゲティングが，直接的な相互作用により実に巧妙に調節されていることも明らかにされた．本稿では，これまでにGFPを用いたライブイメージングにより明らかになったPKCおよびDGKのターゲティングの多様性とその分子機序について紹介する．
  

  公益社団法人 日本薬理学会, 2004年03月, 日本薬理学雑誌 : FOLIA PHARMACOLOGICA JAPONICA, 123(3) (3), 189 - 196, 日本語


• Ceramide-induced apoptosis by translocation, phosphorylation, and activation of protein kinase Cdelta in the Golgi complex

  Kajimoto Taketoshi, Shirai Yasuhito, Sakai Norio, Yamamoto Toshiyoshi, Matsuzaki Hidenori, Kikkawa Ushio, Saito Naoaki

  2004年03月, The Journal Of Biological Chemistry, Vol. 279, No. 13, pp. 12668-12, 12668 - 12676, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Isoform-specific phosphorylation of metabotropic glutamate receptor 5 by protein kinase C (PKC) blocks Ca2+ oscillation and oscillatory translocation of Ca2+-dependent PKC

  M Uchino, N Sakai, K Kashiwagi, Y Shirai, Y Shinohara, K Hirose, M Iino, T Yamamura, N Saito

  2004年01月, JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 279(3) (3), 2254 - 2261, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Phosphorylation of PKC activation loop plays an important role in receptor-mediated translocation of PKC

  T Seki, H Matsubayashi, T Amano, N Saito, N Sakai

  2004年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 94, 97P - 97P, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• リチウム慢性投与は神経伝達物質によるαPKCのトランスロケーションを抑制する

  阪井一雄, 白井康仁, 斎藤尚亮, 前田潔

  2003年12月, 日本神経精神薬理学雑誌, 23巻, 6号, pp. 271-271, 日本語

  研究論文（国際会議プロシーディングス）


• Synthesis and phorbol ester binding of the cysteine-rich domains of diacylglycerol kinase (DGK) isozymes - DGK gamma and DGK gamma are new targets of tumor-promoting phorbol esters

  M Shindo, K Irie, A Masuda, H Ohigashi, Y Shirai, K Miyasaka, N Saito

  2003年05月, JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 278(20) (20), 18448 - 18454, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Novel variants of murine serotonin transporter mRNA and the promoter activity of its upstream site

  K Sakai, C Hasegawa, M Okura, O Morikawa, T Ueyama, Y Shirai, N Sakai, N Saito

  2003年05月, NEUROSCIENCE LETTERS, 342(3) (3), 175 - 178, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• プロテインキナーゼＣのターゲティング機構

  白井康仁, 斎藤尚亮

  2003年04月, 蛋白質 核酸 酵素, 48, 1241 - 1247

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• ターゲティングを指標としたプロテインキナーゼＣ(PKC)の機能解析

  白井康仁, 斎藤尚亮

  2003年04月, 日薬理誌, 121, 421 - 434

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• A role for PKC-ε in FcγR-mediated phagocytosis by RAW 264.7 cells

  Elaine C. Larsen, Takehiko Ueyama, Pamela M. Brannock, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito, Christer Larsson, Daniel Loegering, Peter B. Weber, Michelle R. Lennartz

  2002年12月, Journal of Cell Biology, 159(6) (6), 939 - 944, 英語

  研究論文（学術雑誌）


• Subtype- and species-specific knockdown of PKC using short interfering RNA.

  Irie N, Sakai N, Ueyama T, Kajimoto T, Shirai Y, Saito N

  2002年11月, Biochemical and biophysical research communications, 298(5) (5), 738 - 743

  [査読有り]


• 蛍光蛋白質融合プロテインキナーゼC(PKC)を用いたPKCの機能解析 (研究)

  酒井 規雄, 白井 康仁, 斎藤 尚亮

  神緑会, 2002年08月, 神戸大学医学部神緑会学術誌, 18, 88 - 92, 日本語


• Importance of C1B domain for lipid messenger-induced targeting of PKC.

  Kashiwagi, K, Shirai, Y, Kuriyama, M, Sakai, N, Saito, N

  2002年04月, J. Biol. Chem., 277, 18037 - 18045

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Distinct regulatory mechanism for p70 S6 kinase beta from that for p70 S6 kinase alpha.

  Taichi Minami, Kenta Hara, Noriko Oshiro, Sachiko Ueoku, Ken-ichi Yoshino, Chinaru Tokunaga, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito, Ivan Gout, Kazuyoshi Yonezawa

  BACKGROUND: A novel ribosomal S6 kinase, termed p70 S6 kinase beta (p70beta), has a highly homologous amino acid sequence to that of p70/p85 S6 kinase (p70alpha). This includes the critical phosphorylation sites, Thr252, Ser394 and Thr412 in p70alpha1, which correspond to Thr241, Ser383 and Thr401 in p70beta1, respectively. However, the regulatory mechanism for p70beta remains to be elucidated. RESULTS: We report here the expression and the mechanism of in vivo regulation of p70beta. Two isoforms, p70beta1 and p70beta2, were expressed in a variety of tissues at a different level. p70beta1 was mainly targeted to the nucleus, whereas p70beta2 dispersed throughout the cytoplasm including nucleoplasm. The kinase activity of p70beta1 was less sensitive to the inhibition induced by rapamycin, wortmannin and amino acid withdrawal than that of p70alpha. The portion of p70beta activity inhibited by rapamycin was rescued by the rapamycin-resistant mutant of the mammalian target of rapamycin (mTOR). Mutational analysis revealed that the phosphorylation of Thr241 and Thr401 in p70beta1 was indispensable for the kinase activity. In contrast, a p70beta1 mutant in which Ser383 was substituted with Gly (S383G) still retained nearly the half maximal activity. Sequential phosphorylation of wild-type and S383G mutant of p70beta1 with mTOR and 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1 (PDK1) in vitro synergistically activated their kinase activities. CONCLUSION: These results indicate that p70beta is regulated by the mTOR- and PDK1-signalling pathways through a synergistic interaction between phosphorylated Thr241 and Thr401, while Ser383 plays minor role in their activation mechanism. Activated p70beta may be less sensitive to dephosphorylation mediated by putative phosphatases activated by rapamycin, amino acid withdrawal, and probably wortmannin.

  2001年11月, Genes to Cells, 6(11) (11), 1003 - 1015, 英語, 国際誌, 国際共著している

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Subtype-specific translocation of the delta subtype of protein kinase C and its activation by tyrosine phosphorylation induced by ceramide in HeLa cells.

  Kajimoto T, Ohmori S, Shirai Y, Sakai N, Saito N

  2001年03月, Molecular and cellular biology, 21(5) (5), 1769 - 1783

  [査読有り]


• Subtype-specific translocation of diacylglycerol kinase alpha and gamma and its correlation with protein kinase C.

  Shirai Y, Segawa S, Kuriyama M, Goto K, Sakai N, Saito N

  2000年04月, The Journal of Biological Chemistry, 275(32) (32), 24760 - 24766

  [査読有り]


• Induction of 55 kDa protein of PKN by ischemia/reperfusion model of rat retina.

  Sumioka, K, Shirai, Y, Sakai, N, Hashimoto, T, Tanaka, C, Yamamoto M, Takahashi, M, Ono, Y, Saito, N

  2000年04月, Invest. Ophthal. Vis. Sci., 41, 29 - 35

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Phospholipase A2 and its products are involved in the purinergic receptor-mediated translocation of protein kinase C in CHO-K1 cells.

  Shirai, Y, Kashiwagi, K, Sakai, N, Saito, N

  2000年04月, J. Cell Sci., 113, 1335 - 1343

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Regulation of nuclear translocation of Forkhead transcription factor AFX by protein kinase B

  Hiroshi Takaishi, Hiroaki Konishi, Hidenori Matsuzaki, Yoshitaka Ono, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito, Tadahiro Kitamura, Wataru Ogawa, Masato Kasuga, Ushio Kikkawa, Yasutomi Nishizuka

  1999年10月, Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 96(21) (21), 11836 - 11841

  研究論文（学術雑誌）


• プロテインキナーゼＣのターゲッテイング機構の解析

  斎藤尚亮, 白井康仁

  1999年04月, 実験医学, 17, 1867 - 1873

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Molecular Cloning of cDNA for BRab from the Brain of Bombyx mori and Biochemical Properties of BRab Expressed in Escherichia coli

  Uno Tomohide, Ueno Mayumi, Nakajima Ayumi, SHIRAI Yasuhito, AIZONO Yasuo

  From a brain cDNA library of Bombyx mori, we cloned cDNA for BRab, which encoded a 202-amino-acid polypeptide sharing 60-80% similarity with rab1 family members. To characterize its biochemical properties, cDNA for BRab was inserted into an expression vector (pGEX2T) and expressed in Escherichia coli as a glutathione S-trans-ferase (GST) fusion protein. The recombinant protein was purified to homogeneity with glutathione S-Sepharose. The purified GST-BRab bound [^<35>S]-GTPγS and [^3H]-GDP with association constants of 1.5×10^6M^<-1> and 0.58×10^6M^<-1>, respectively. The binding of [^<35>S]-GTPγS was inhibited with GTP and GDP, but with no other nucleotides. The GTP-hydrolysis activity was evaluated to be 5 m mole/min/mole of BRab. In the presence of 6 mM MgCl_2,bound [^<35>S]-GTPγS and [^3H]-GDP were exchanged with GTPγS most efficiently. These results suggest that BRab, having a higher affinity for GTP than GDP, converts from the GTP-bound state into the GDP-bound state by intrinsic GTP hydrolysis activity and returns to the GTP-bound state with the exchange of GDP with GTP.

  社団法人日本農芸化学会, 1998年10月, Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 62(10) (10), 1885 - 1891, 英語


• Amyloid beta protein (25-35) phosphorylates MARCKS through tyrosine kinase-activated protein kinase C signaling pathway in microglia.

  Shirai Y, Kashiwagi K, Yagi K, Sakai N, Saito N

  1998年10月, J Cell Biol., 143(2) (2), 511 - 521, 英語

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• 神経系のトランスポーターと疾患 セロトニントランスポーターの転写及び機能の制御機構

  斎藤 尚亮, 白井 康仁, 酒井 規雄, 大倉 睦美, 上山 建彦

  日本神経化学会, 1998年09月, 神経化学, 37(3) (3), 283 - 283, 日本語


• Three distinct mechanisms for translocation and activation of δ-subspecies of protein kinase C.

  Ohmori, S, Shirai, Y, Sakai, N, Fujii, M, Konishi, H, Kikkawa, U, Saito, N

  1998年04月, Mol. Cell. Biol., 18, 5263 - 5271

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Subspecies-specific targeting mechanism of protein kinase C.

  Shirai, Y, Sakai, N, Saito, N

  1998年04月, Jpn J Pharmacol, 78, 411 - 417

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Distinct effects of fatty acids on translocation of γ- and ε- protein kinase C.

  Shirai, Y, Kashiwagi, K, Yagi, K, Sakai, N, Saito, N

  1998年04月, J. Cell Biol., 143, 511 - 521

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）


• Direct visualization of the translocation of the γ-subspecies of protein kinase C in living cells using fusion protein with green fluorescent protein.

  Sakai, N, Sasaki, K, Ikegaki, N, Shirai, Y, Ono, Y, Saito, N

  1997年04月, J. Cell Biol., 139, 1465 - 1476

  [査読有り]

  研究論文（学術雑誌）

• 筋細胞の小胞体ストレス応答におけるHSPB5の結合分子の探索と機能解析

  西原萌華, 上田修司, 吉野健一, 吉野健一, 竹内敦子, 山之上稔, 白井康仁

  2020年, 日本農芸化学会関西支部講演会講演要旨集, 512th


• Diacylglycerol kinase α-selective inhibitors induce apoptosis and reduce viability of melanoma and several other cancer cell lines.

  Atsumi Yamaki, Rino Akiyama, Chiaki Murakami, Saki Takao, Yuki Murakami, Satoru Mizuno, Daisuke Takahashi, Sayaka Kado, Akinobu Taketomi, Yasuhito Shirai, Kaoru Goto, Fumio Sakane

  Diacylglycerol (DG) kinase (DGK), which phosphorylates DG to generate phosphatidic acid (PA), consists of ten isozymes (α-к). Recently, we identified a novel small molecule inhibitor, CU-3, that selectively inhibits the activity of the α isozyme. In addition, we newly obtained Compound A, which selectively and strongly inhibits type I DGKs (α, β, and γ). In the present study, we demonstrated that both CU-3 and Compound A induced apoptosis (caspase 3/7 activity and DNA fragmentation) and viability reduction of AKI melanoma cells. Liquid chromatography-mass spectrometry revealed that the production of 32:0- and 34:0-PA species was commonly attenuated by CU-3 and Compound A, suggesting that lower levels of these PA molecular species are involved in the apoptosis induction and viability reduction of AKI cells. We determined the effects of the DGKα inhibitors on several other cancer cell lines derived from refractory cancers. In addition to melanoma, the DGKα inhibitors enhanced caspase 3/7 activity and reduced the viability of hepatocellular carcinoma, glioblastoma, and pancreatic cancer cells, but not breast adenocarcinoma cells. Interestingly, Western blot analysis indicated that the DGKα expression levels were positively correlated with the sensitivity to the DGK inhibitors. Because both CU-3 and Compound A induced interleukin-2 production by T cells, it is believed that these two compounds can enhance cancer immunity. Taken together, our results suggest that DGKα inhibitors are promising anticancer drugs.

  2019年06月, Journal of cellular biochemistry, 120(6) (6), 10043 - 10056, 英語, 国際誌


• BioID法を用いたHSPB5の新規相互作用分子の探索

  西原萌華, 上田修司, 吉野健一, 吉野健一, 竹内敦子, 山之上稔, 白井康仁

  2019年, 日本分子生物学会年会プログラム・要旨集(Web), 42nd


• ジアシルグリセロールキナーゼαの新規結合分子の探索

  木本裕子, 渡辺真以, 上田修司, 吉野健一, 山之上稔, 白井康仁

  2019年, 日本農芸化学会関西支部講演会講演要旨集, 507th


• リチウムによるDGKβKOマウスの記憶及び感情障害の改善には、PIP2の減少とPKCβの活性抑制が関与している

  沖本 航, 中井 寛子, 石坂 光絵, 中西 広樹, 森口 茂樹, 上田 修司, 山之上 稔, 福永 浩司, 佐々木 雄彦, 原 英彰, 白井 康仁

  日本脂質生化学会, 2016年05月, 脂質生化学研究, 58, 229 - 233, 日本語


• 多成分一斉解析技術による黒毛和種牛肉の食品成分の検討

  上田修司, 岩本英治, 正木達規, 谷元哲則, 渡代勝之, 白井康仁, 山之上稔

  2016年, 日本畜産学会大会講演要旨, 121st


• Screening of novel diacylglycerol kinase alpha (DGK alpha) activator to develop drugs improving diabetic nephropathy

  Hayashi Daiki, Liu Ka, Ueda Shuji, Yamanoue Minoru, Sakane Fumio, Shirai Yasuhito

  2015年07月, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 128(3) (3), S102

  [査読有り]


• ジアシルグリセロールキナーゼαの218番目のチロシンリン酸化はドメイン間相互作用と高次構造を変化させる

  脇阪昌明, 岩下智秋, 濱田大三, 濱田大三, 祇園景子, 上田修司, 山之上稔, 鶴田宏樹, 白井康仁

  2015年, 日本生化学会大会(Web), 88th


• チロシンリン酸化がジアシルグリセロールキナーゼαのドメイン間相互作用及び高次構造に与える影響

  脇阪昌明, 岩下智秋, 濱田大三, 濱田大三, 祇園景子, 上田修司, 山之上稔, 鶴田宏樹, 白井康仁

  2015年, 日本農芸化学会関西支部講演会講演要旨集, 492nd


• 脳におけるジアシルグリセロールキナーゼの機能

  白井 康仁

  2014年05月, 生化学, 86, 518 - 522, 日本語

  [査読有り][招待有り]

  記事・総説・解説・論説等（学術雑誌）


• DGKは記憶及び感情障害改善薬のターゲットになりえるか？－神経系におけるジアシルグリセロールキナーゼb(DGKbeta)の機能解析－

  白井 康仁

  ジアシルグリセロールキナーゼ（DGK）はジアシルグリセロール（DG）をリン酸化し，ホスファチジン酸（PA）に変換する脂質キナーゼであり，これまでに10種のサブタイプが報告されている．周知のようにDGはPKCの活性化因子であり，産生されるPAも様々な酵素の活性を調節することから，DGKはPKCの抑制やPAの産生を介して生体内において重要な働きをしていると考えられている．しかし，神経系に多く存在するβサブタイプの機能は長い間不明であった．そこで，我々はDGKβのノックアウト（KO）マウスを作製し，その神経系における機能を調べた．その結果，DGKβKOマウスは，記憶障害と感情障害を示した．また，この感情障害は10日間のリチウム処理で改善した．一方，DGKβKOマウスから調製した海馬および大脳皮質初代培養細胞は，突起の分岐の数およびスパイン数が有意に減少していたが，DGKβを過剰発現させることで形態異常は回復した．さらに， DGKβKOマウスの海馬および大脳皮質において，スパイン密度が減少していることを確認した．これらのことから，DGKβは神経細胞の形態を調節・維持することにより神経ネットワークの形成，ひいては記憶や感情などの脳高次機能において重要な働きをしていることが明らかになった．本総説では，このDGKβKOマウスから得られた知見を中心に，神経系におけるDGKβについて概説するとともに，DGKβの記憶障害や感情障害の予防薬および改善薬のターゲットとしての可能性と問題点について論ずる．

  公益社団法人 日本薬理学会, 2014年04月, 日本薬理学会誌, 143(3) (3), 131 - 136, 日本語

  [査読有り][招待有り]

  記事・総説・解説・論説等（学術雑誌）


• The effects of valproate on the abnormal behaviors in diacylglycerol kinase beta knockout mice

  Mitsue Ishisaka, Kazuhiro Tsuruma, Masamitsu Shimazawa, Yasuhito Shirai, Hideaki Hara

  2014年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 124, 214P - 214P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• mTOR is involved in both kinase activity-dependent and -independent pathways of DGK beta-regulated neurite and branch induction

  Takuya Kano, Hiroko Nakai, Akio Nakashima, Ushio Kikkawa, Naoaki Saito, Nobuyuki Takei, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Yasuhito Shirai

  2014年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 124, 100P - 100P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• ジアシルグリセロールキナーゼβによる特徴的な神経突起伸にはcPKCも関与する

  中井 寛子, 加野 拓也, 上田 修司, 山之上 稔, 斎藤 尚亮, 白井 康仁

  2013年05月28日, 脂質生化学研究, 55, 44 - 47, 日本語


• Involvement of mTOR in diacylglycerol kinase beta (DGK beta)-induced neurite blanching and spine formation

  H. Nakai, N. Takei, A. Nakashima, U. Kikkawa, N. Saito, S. Ueda, M. Yamanoue, Y. Shirai

  2012年09月, FEBS JOURNAL, 279, 383 - 384, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• ジアシルグリセロールキナーゼβによる特徴的な神経突起伸にはmTORが関与する

  白井 康仁, 中井 寛子, 中西 広樹, 中嶋 昭雄, 吉川 潮, 上田 修司, 山之上 稔, 斎藤 尚亮

  2012年05月28日, 脂質生化学研究, 54, 98 - 100, 日本語


• The role of diacylglycerol kinase in histamine release

  Megumi Sakuma, Yasuhito Shirai, Takehiko Ueyama, Naoaki Saito

  2012年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 118, 255P - 255P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• Physiological function of nuclear DGK alpha under serum depleted conditions

  Yuko Kiso, Yasuhito Shirai, Megumi Sakuma, Momo Ikeda, Naoaki Saito

  2012年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 118, 166P - 166P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• Diacylglycerol kinase as a possible drug target

  Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2012年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 118, 31P - 31P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• ジアシルグリセロールキナーゼαの核移行と細胞周期制御に関する研究2 : c-Ablによるチロシンリン酸化サイトの同定

  白井 康仁, 池田 もも, 木曽 裕子, 佐久間 恵, 齋藤 尚亮

  2011年04月28日, 脂質生化学研究, 53, 191 - 194, 日本語


• Novel binding of PKC eta to RalA and its crucial role in morphological change during keratinocytes differentiation

  Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2011年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 115, 32P - 32P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• c-Abl phosphorylates DGK alpha at Y218 during the serum-induced nuclear export

  Momo Ikeda, Yasuhito Shirai, Takehiro Matsubara, Megumi Sakuma, Yuko Kiso, Naoaki Saito

  2011年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 115, 167P - 167P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• The function of P40(phox) in Nox2 activation

  Jun-ya Nakakita, Takehiko Ueyama, Toshihiro Kobayashi, Takeshi Kobayashi, Jon-hyun Son, Mio Nakatsuji, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2010年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 112, 118P - 118P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• Novel phosphorylation site(s) of cofilin by PKC alpha and its role in the degranulation from RBL-2H3 mast cells

  Megumi Sakuma, Yasuhito Shirai, Ken-ichi Yoshino, Maho Kuramasu, Tomofumi Nakamura, Izumi Hide, Yoshihiro Nakata, Naoaki Saito

  2010年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 112, 54P - 54P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• Mania-like behavioural abnormalities of diacylglycerol kinase beta knockout mice

  K. Kakefuda, A. Oyagi, K. Tsuruma, M. Shimazawa, K. Yokota, Y. Shirai, K. Horie, N. Saito, J. Takeda, H. Hara

  2009年09月, EUROPEAN NEUROPSYCHOPHARMACOLOGY, 19, S471 - S471, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• ジアシルグリセロールキナーゼβノックアウトマウスはスパイン形成異常と記憶障害を示す : スパイン形成における脂質シグナリングの重要性

  白井 康仁, 上月 健, 掛札 賢一, 大八木 篤, 堀江 恭二, 森口 茂樹, 嶋澤 雅光, 福永 浩司, 竹田 潤二, 齋藤 尚亮, 原 英彰

  2009年07月10日, 脂質生化学研究, 51, 98 - 100, 日本語


• Role of diacylglycerol kinase beta in neural function

  Takeshi Kozuki, Yasuhito Shirai, Kenichi Kakefuda, Atsushi Ohyagi, Kyoji Horie, Masamitsu Shimazawa, Kohji Fukunaga, Junji Takeda, Naoaki Saito, Hideaki Hara

  2009年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 109, 70P - 70P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• Mood-disorder and neuron specific isoform of diacylglycerol kinase, DGK beta

  Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2009年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 109, 30P - 30P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• Diacylglycerol kinase beta (DGK beta) knock out mice show mania-like behaviors

  Kenichi Kakefuda, Atsushi Oyagi, Kazuhiro Tsuruma, Masamitsu Shimazawa, Koichi Yokota, Yasuhito Shirai, Kyoji Horie, Naoaki Saito, Junji Takeda, Hideaki Hara

  2009年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 109, 156P - 156P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• Cofilin is phosphorylated by cPKC in the degranulation from RBL-2H3 mast cells

  Megumi Sakuma, Yasuhito Shirai, Maho Kuramasu, Kenichi Yoshino, Tomofumi Nakamura, Izumi Hide, Yoshihiro Nakata, Naoaki Saito

  2009年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 109, 236P - 236P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• Important role of diacylglycerol kinase beta in spine formation and memory

  Yasuhito Shirai, Takeshi Kozuki, Kenichi Kakefuda, Atsushi Ohyagi, Kyouji Horie, Shigeki Moriguchi, Masamitsu Simazawa, Kohji Fukunaga, Jyunnji Takeda, Naoaki Saito, Hideaki Hara

  2009年, NEUROSCIENCE RESEARCH, 65, S68 - S68, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• Differential regulation of Dual oxidase 1 by Duox activator 1 splicing variants

  Satoshi Tsujibe, Takehiko Ueyama, Yasuhito Shirai, Leto Thomas, Naoaki Saito

  2008年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 106, 53P - 53P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• PKC induced phosphorylation of Orai1 regulates intracellular Ca2+ level from store operated channel

  Takumi Kawasaki, Takehiko Ueyama, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2008年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 106, 116P - 116P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• DG-PKCシグナル系の可視化とその異常による疾患

  斎藤 尚亮, 白井 康仁, 松原 岳大, 足立 直子, 高橋 英之, 酒井 規雄

  2007年06月05日, 脂質生化学研究, 49, 15 - 15, 日本語


• 核内脂質シグナル及び核移行蛋白質の可視化システムを用いた細胞周期機構の解明 : DGKの核-細胞質間移行機構と核内における機能に着目して

  白井 康仁, 松原 岳大, 齋藤 尚亮

  2007年06月05日, 脂質生化学研究, 49, 305 - 307, 日本語


• 脂質代謝酵素DGKαの核-細胞質間 shuttling 機構と細胞周期制御への関与

  松原 岳大, 白井 康仁, 斎藤 尚亮

  2007年06月05日, 脂質生化学研究, 49, 308 - 311, 日本語


• Diacylglycerol kinase(DGK) ジアシルグリセロールキナーゼ

  白井 康仁

  2007年03月, 日本薬理学会雑誌, 129巻, 4号, pp. 311-313, 日本語

  記事・総説・解説・論説等（学術雑誌）


• Analysis of inter- and intra-molecular interactions of phox proteins using a new fluorescent protein at cellular levels

  Tomoko Kusakabe, Aya Shimizu, Takehiko Ueyama, Takumi Kawasaki, Yasuhito Shirai, Satosi Karasawa, Atsusi Miyawaki, Naoaki Saito

  2007年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 103, 54P - 54P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• A regulated adaptor function of p40phox: a head-to-tail (PX-PB1 domain) intramolecular interaction of p40phox in its resting state

  Takehiko Ueyama, Toshihiko Tatsuno, Takumi Kawasaki, Satosi Tsujibe, Yasuhito Shirai, Hideki Sumimoto, Thomas. L. Leto, Naoaki Saito

  2007年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 103, 95P - 95P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• The functional relation between PKC and actin arrangement in the degranulation from RBL-2H3 cells.

  Maho Kuramasu, Yasuhito Shirai, Tomofumi Nakamura, Izumi Hide, Yoshihiro Nakata, Naoaki Saito

  2007年, JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, 103, 215P - 215P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• Spatial and temporal controls of PKC isoform activation

  Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2006年07月, ACTA PHARMACOLOGICA SINICA, 27, 3 - 3, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• プロテインキナーゼCεのフォスファチジルイノシトール2リン酸結合能と神経突起伸長能との相関

  白井 康仁, 村上 卓也, 倉増 真帆, 齋藤 尚亮

  2006年06月08日, 脂質生化学研究, 48, 181 - 183, 日本語


• 脂溶性リガンドの細胞質膜レセプター

  白井 康仁, 齋藤 尚亮

  2005年03月01日, 日本薬理学雑誌 : FOLIA PHARMACOLOGICA JAPONICA, 125(3) (3), 166 - 167, 日本語


• 糖尿病性血管合併症とPKC/DGKシグナリング

  白井 康仁, 竹中 利佳, 齋藤 尚亮

  2004年11月01日, 日本薬理学雑誌 : FOLIA PHARMACOLOGICA JAPONICA, 124, 35P - 36P, 日本語


• 糖尿病性血管合併症とジアシルグリセロールキナーゼ

  白井 康仁, 齋藤 尚亮

  2004年08月01日, 日本薬理学雑誌 : FOLIA PHARMACOLOGICA JAPONICA, 124(2) (2), 128 - 128, 日本語


• 脳部位特異的Tet制御γPKC-GFP発現トランスジェニックマウスを用いたγPKCの in vivo ライブイメージング

  酒井規雄, 坪川宏, 松崎政紀, 松林弘明, 梶本武利, 大森志保, 白井康仁, 河西春郎, 斎藤尚亮

  2003年12月25日, 日本神経精神薬理学雑誌 = Japanese journal of psychopharmacology, 23(6) (6)


• Analysis of PKC targeting mechanism using PKC fused with fluorescent proteins

  Norio Sakai, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2003年, Folia Pharmacologica Japonica, 121(6) (6), 421 - 434, 日本語

  書評論文,書評,文献紹介等


• Protein kinase Cγ (PKCγ): Function of neuron specific isotype

  Naoaki Saito, Yasuhito Shirai

  Japanese Biochemical Society, 2002年11月01日, Journal of Biochemistry, 132(5) (5), 683 - 687, 英語

  書評論文,書評,文献紹介等


• Activation mechanisms of protein kinase C: Maturation, catalytic activation, and targeting

  Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  Japanese Biochemical Society, 2002年11月01日, Journal of Biochemistry, 132(5) (5), 663 - 668, 英語

  書評論文,書評,文献紹介等


• The silencer activity of the novel human serotonin transporter linked polymorphic regions（共著）

  Kazuo Sakai, Masayuki Nakamura, Shu Ichi Ueno, Akira Sano, Norio Sakai, Yasuhito Shirai, Naoaki Saito

  2002年07月12日, Neuroscience Letters, 327(1) (1), 13 - 16

  [査読有り]


• Oscillatory translocation of gamma PKC by the activation of metabotropic glutamate receptor and its regulation by delta PKC in a subtype specific manner.

  M Uchino, N Sakai, Y Shirai, K Hirose, M Iino, Y Shinohara, S Nakanishi, N Saito

  2002年, JAPANESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY, 88, 175P - 175P, 英語

  研究発表ペーパー・要旨（国際会議）


• W2-1 Analysis of PKC targeting mechanism in living cells for understanding PKC signaling :

  Sakai Norio, Shirai Yasuhito, Saito Naoaki

  Japan Society of Histochemistry and Cytochemistry, 2001年, Acta histochemica et cytochemica, 34(1) (1), 53 - 53, 英語


• セロトニントランスポーター

  白井 康仁

  2000年10月, 生化学, 72(10) (10), 1215 - 1229, 日本語

  [査読有り][招待有り]

  書評論文,書評,文献紹介等


• W2-1 PKCシグナル伝達のさらなる理解を求めて : PKCターゲティング機構の解析(細胞内情報伝達への形態学的アプローチ:リン酸化酵素を中心として,ワークショップ2,第41回 日本組織細胞化学会総会・学術集会)

  酒井 規雄, 白井 康仁, 斎藤 尚亮

  日本組織細胞化学会, 2000年, 日本組織細胞化学会総会プログラムおよび抄録集, (41) (41), 59 - 59, 日本語


• 蛋白質キナーゼのターゲッティングのイメージングーGFP融合プロテインキナーゼＣを用いた研究を中心にー

  酒井 規雄, 白井 康仁, 齋藤 尚亮

  2000年, 脳の科学, 22, 783 - 789, 日本語

  [査読有り][招待有り]

  記事・総説・解説・論説等（学術雑誌）


• Analysis of signal transduction using GFP-tagged protein kinase C. :

  Shirai Yasuhito, Saito Naoaki

  Japan Society of Histochemistry and Cytochemistry, 1999年, Acta histochemica et cytochemica, 32(6) (6), 513 - 513, 英語


• Visualization of stimulus-and subtype-specific translocation of protein kinase C(PKC)in living cells : Molecular mechanism of PKC targeting :

  SAITO Naoaki, SAKAI Norio, SHIRAI Yasuhito

  Japan Society of Histochemistry and Cytochemistry, 1999年, Acta histochemica et cytochemica, 32(6) (6), 517 - 517, 英語


• WS I-2 プロテインキナーゼCのターゲッティング機構と生理機能

  斎藤 尚亮, 酒井 規雄, 白井 康仁

  日本組織細胞化学会, 1999年, 日本組織細胞化学会総会プログラムおよび抄録集, (40) (40), 122 - 122, 日本語


• S XI-4 GFP標識タンパク質を用いた細胞内情報伝達機構の解析

  白井 康仁, 斎藤 尚亮

  日本組織細胞化学会, 1999年, 日本組織細胞化学会総会プログラムおよび抄録集, (40) (40), 112 - 112, 日本語


• GFPを用いた細胞内情報伝達系の可視化--PKC translocationを中心として (日本電子顕微鏡学会第43回シンポジウム論文集--21世紀へ向けての新技術の展開--平成10年10月28日(水)〜30日(金),千葉大学けやき会館〔含 著者名索引〕) -- (ワ-クショップ(第6回コンフォ-カル488シンポジウム) 生細胞・生組織のイメ-ジング技術のフロンティア)

  斎藤 尚亮, 白井 康仁

  日本顕微鏡学会, 1998年, 電子顕微鏡, 33(2) (2), 177 - 180, 日本語

• ビタミンEの非抗酸化的な生理作用を仲介する受容体

  白井康仁, 林大輝

  建帛社, 2025年05月


• 小脳が司る協調運動におけるジアシルグリセロールシグナリングの重要性

  津曲 涼介, 白井 康仁

  共著, 日本薬理学雑誌, 2018年08月, 日本語

  学術書


• Nutritional and Therapeutic Interventions for Diabetes and Metabolic Syndrome

  Yasuhito Shirai, Daiki Hayashi

  共著, ELSEVIER, 2018年06月, 英語

  学術書


• 分子生物学

  白井 康仁

  共著, 化学同人, 2011年02月, 日本語

  教科書・概説・概論


• Determination of subcellular localization of flavonol in cultured cells by laser scanning. In "Laser Scanning, Theory and Applications!", Ed. by Chau-Chang Wang, pp.215-232.

  MUKAI Rie, TERAO Junji, SHIRAI Yasuhito, SAITO Naoaki, ASHIDA Hitoshi

  共著, Intec-Open Access Publisher, 2011年, 英語

  学術書


• ジアシルグリセロールキナーゼ

  白井 康仁

  日本生物工学会, 2008年08月, 日本語

  学術書


• プロテインキナーゼＣ及びジアシルグリセロールキナーゼのライブイメージング

  白井 康仁, 齋藤 尚亮

  共著, エヌ・テイー・エス, 2007年06月, 英語

  学術書


• ジアシルグリセロールキナーゼ

  白井 康仁, 齋藤 尚亮

  共著, 日本薬理学会誌, 2007年03月, 日本語

  その他


• プロテインキナーゼＣのターゲティング機構

  白井 康仁, 酒井 規雄, 齋藤 尚亮

  共著, 共立出版, 2003年11月, 日本語

  学術書


• 蛋白質・核酸･酵素 / プロテインキナーゼＣのターゲティング

  白井 康仁

  共著, 共立出版, 2003年, 日本語

  学術書


• シグナル伝達 総集編

  齋藤 尚亮, 酒井 規雄, 白井 康仁

  その他, 羊土社, 1999年08月, 日本語

  学術書


• 細胞のシグナリング

  白井 康仁, 齋藤 尚亮

  その他, 中山書店, 1999年05月, 日本語

  学術書


• 無脊椎動物のホルモン

  白井 康仁, 相園 泰夫

  その他, 学会出版センター, 1998年12月, 日本語

  教科書・概説・概論

• Effects of adding FFAs on beef taste-traits analyzed by electronic taste sensing system and sensory evaluation

  趙 婭楠, 狄 寅禘, 上田 修司, 白井 康仁, 羽原 正秋, 池崎 秀和, 山之上 稔

  日本畜産学会第125回大会, 2019年03月, 英語, 麻布大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Methylated epigallocatechin gallate (EGCg) as functional food for diabetic nephropathy

  白井 康仁

  the 25th International conference of functional food center, 2018年10月, 英語, Ritsumeikan Univ, 国際会議

  [招待有り]

  口頭発表（招待・特別）


• Effect of Zingiber Zerumbet Smith extract on thermotolerance

  Kobayashi H, Ueda S, Kato Y, Yun Sang Soon, Tsumagari R, Yamanoue M, Shirai Y

  the 25th International conference of functional food center, 2018年10月, 英語, Ritsumeikan Univ, 国際会議

  ポスター発表


• Effects of intramuscular FFAs on beef taste-traits analyzed by electronic taste sensing system and sensory evaluation

  趙 婭楠, 中田 悠介, 上田 修司, 白井 康仁, 市村 さやか, 吉田 由香, 羽原 正秋, 池崎 秀和, 山之上 稔

  The 64th ICoMST, 2018年08月, 英語, Melbourne, Australia, 国際会議

  ポスター発表


• ジアシルグリセロールキナーゼをターゲットとする抗アレルギー薬の開発

  倉橋 航平, 菊永 佐紀子, 上田修司, 山之上稔, 白井 康仁

  第133回日本薬理学会近畿部会, 2018年06月, 日本語, 国内会議

  口頭発表（一般）


• alpha-tocopherol と67 kDa ラミニンレセプターの直接的相互作用の検証

  林 大輝, Varnavas Mouchlis, 王 柳青, 上田 修司, 山之上 稔, 芦田 均, Edward Dennis, 白井 康仁

  第65回日本生化学会近畿支部例会, 2018年05月, 日本語, 兵庫医大, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 味覚センサ分析および官能評価による牛肉呈味性への筋内脂肪の影響

  趙 婭楠, 中田悠介, 上田修司, 白井康仁, 市村 さやか, 吉田 由香, 羽原正秋, 池崎秀和, 山之上 稔

  第59回日本食肉研究会大会, 2018年03月, 日本語, 東京大学農学部, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 熟成中の牛肉の筋内脂肪変化に影響される呈味性の味覚センサおよび官能評価による分析 (第2報)

  趙 婭楠, 中田悠介, 上田修司, 白井康仁, 市村 さやか, 吉田 由香, 羽原正秋, 池崎秀和, 山之上 稔

  日本畜産学会第124回大会, 2018年03月, 日本語, 東京大学農学部, 国内会議

  口頭発表（一般）


• ジアシルグリセロールキナーゼgammaを作用点とする分子標的機能性食品の開発に向けた研究

  倉橋 弘平, 菊永 佐紀子, 上田 修司, 山之上 稔, 白井 康仁

  日本農芸化学会関西支部第501回講演会, 2017年12月, 日本語, 神戸大学農学部, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 緑茶カテキン EGCg のメチル化による糖尿病性腎症改善効果の増強

  林 大輝, 上田 修司, 山之上 稔, 芦田 均, 白井 康仁

  日本農芸化学会 関西・中四国・西日本支部 2017年度合同大阪大会（第49回講演会）, 2017年09月, 日本語, 堺, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 熟成中の牛肉における筋内脂肪変化に影響される呈味性の味覚センサおよび官能評価による分析

  趙 婭楠, 中田悠介, 上田修司, 白井康仁, 羽原正秋, 池崎秀和, 山之上 稔

  日本畜産学会第123回大会, 2017年09月, 日本語, 信州大学伊那キャンパス, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 質量分析計による黒毛和種牛肉の栄養成分のノンターゲット分析による検討

  上田修司, 岩本英治, 白井康仁, 山之上 稔

  日本畜産学会第123回大会, 2017年09月, 日本語, 信州大学伊那キャンパス, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 黒毛和種牛肉の赤身部位の各種分析技術の検討

  上田 修司, 岩本 英治, 吉田 和利, 篠原 正和, 中田 悠介, 高杉 瑠美, 岩本 英樹, 野村 郁代, 小川 隆文, 白井 康仁, 山之上 稔

  日本畜産学会第122回大会, 2017年03月, 日本語, 神戸大学鶴甲第1キャンパス, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Importance of DG signaling in cerebellar motor coordination

  白井 康仁

  第80回 薬理学会年会, 2017年03月, 英語, 長崎 ブリックホール, 国内会議

  シンポジウム・ワークショップパネル（公募）


• Importance of functional correlation between protein kinase C and diacylglycerol kinase in cerebellar motor coordination

  白井 康仁

  The 1st Biosignal Research Center Int. Symposium, 2017, 2017年01月, 英語, 神戸大学 六甲ホール, 国際会議

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• 皮膚におけるジアシルグリセロールキナーゼγの機能解析

  菊永佐紀子, 横谷美由希, 藤原祥高, 上田修司, 山之上 稔, 高岡幸二, 伊川正人, 白井康仁

  日本農芸化学会関西支部例会 第497回講演会, 2016年12月, 日本語, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 皮膚におけるジアシルグリセロールキナーゼgammaの機能解析

  菊永佐紀子, 横谷美由紀, 藤原祥高, 上田修司, 山之上稔, 高岡幸二, 伊川正人, 白井 康仁

  日本農芸化学会関西支部第497回講演会, 2016年12月, 日本語, 神戸大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Identification of novel RhoA binding proteins by using BioID system

  櫛谷 晃帆, 加藤 良毅, Soichiro Yamada, 吉野 健一, 竹内 敦子, 山之上 稔, 白井 康仁, 上田 修司

  The American Society for Cell Biology 2016 ASCB/IFCB Meeting, 2016年12月, 英語, Moscone Center San Francisco, California, 国際会議

  ポスター発表


• Identification of novel HSPB1 binding proteins in skeletal muscle

  加藤 良毅, 小鍛治 泰斗, 櫛谷 晃帆, 吉野 健一, 竹内 敦子, 山之上 稔, 白井 康仁, 上田 修司

  The American Society for Cell Biology 2016 ASCB/IFCB Meeting, 2016年12月, 英語, Moscone Center San Francisco, California, 国際会議

  ポスター発表


• BioID法を用いた低分子量Ｇ蛋白質RhoAの結合蛋白質の探索

  櫛谷晃帆, 上田 修司, 加藤良毅, 吉野健一, 竹内敦子, 山之上稔, 白井康仁

  第39回日本分子生物学会年会, 2016年12月, 日本語, パシフィコ横浜 展示ホール, 国内会議

  ポスター発表


• DGKγ contributes cerebellar motor coordination through regulation of protein kinase C

  Yasuhito Shirai, Ryousuke Tsumagari, Sakiko Kikunaga, Yoshitaka Fujihara, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Sho Kakizawa, Hideaki Hara, Masahito Ikawa

  Neuroscience meeting 2016, 2016年11月, 英語, San Diego Convention center, 国際会議

  ポスター発表


• 骨格筋におけるHSPB1結合蛋白質の探索と

  小鍛冶 泰斗, 加藤 良毅, 櫛谷 晃帆, 吉野 健一, 竹内 敦子, 上田 修司, 山之上 稔, 白井 康仁

  日本農芸化学会平成28年度関西支部大会, 2016年09月, 日本語, 滋賀県立大学（滋賀県彦根市八坂町2500）, 国内会議

  口頭発表（一般）


• The elucidation of the mechanism of lentinan-induced inflammatory suppression by visualizimg TNFR1 on the membrane

  SAKAGUCHI KANA, HASHIMOTO TAKASHI, ITO TOSHIKI, SHIRAI YASUHIDE, MIZUNO MASASAHI

  Functional and Medical Foods for Chronic Diseases: Bioactive Compounds and Biomarkers, 2016年09月, 英語, Harvard Medical School, 国際会議

  ポスター発表


• Possibility of epigallocatechin gallate and a-tocopherol as functional food for diabetic nephropathy and their molecular mechanism

  白井 康仁

  20th International conference of Functional Food in health disease, 2016年09月, 英語, Harbard medical school, Boston, 国際会議

  [招待有り]

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• レンチナンによって誘導されるTNFR1発現変化の可視化による炎症抑制機構の解明

  坂口 香奈, 橋本 堂史, 伊藤 俊樹, 白井 康仁, 水野 雅史

  日本食品科学工学会第63回大会, 2016年08月, 日本語, 名城大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• リチウムによるDGKbetaKOマウスの記憶及び感情障害の改善には、PIP2の減少とPKCgammaの活性抑制が関与している

  沖本 航, 中井 寛子, 石坂 光絵, 中西 広樹, 森口 茂樹, 上田 修司, 山之上 稔, 福永 浩司, 佐々木 雄彦, 原 英彰, 白井 康仁

  第79回脂質生化学会, 2016年06月, 日本語, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 筋肉の増加減退に関わるRhoAの機能解析と相互作用分子の探索

  櫛谷 晃帆, 上田 修司, 加藤 良毅, 桐村 悠佑, 石政 碧, 吉野 健一, 竹内 敦子, 山之上 稔, 白井 康仁

  第６３回日本生化学会近畿支部例会, 2016年05月, 日本語, 神戸薬科大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• カテキン類によるジアシルグリセロキナーゼα活性化機構と、糖尿病性腎症の予防・改善の可能性について

  白井 康仁

  第70回日本栄養・食糧学会大会, 2016年05月, 日本語, 武庫川女子大学, 国内会議

  公開講演，セミナー，チュートリアル，講習，講義等


• Function of diacylglycerol kinase

  白井 康仁

  Lipid mediator in health and disease, 2016年05月, 英語, UCSD, San Diego, 国際会議

  [招待有り]

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• ジアシルグリセロールキナーゼgammaKOマウスは協調運動に障害を示す

  津曲 涼介, 菊永 佐紀子, 藤原 祥高, 上田 修司, 山之上 稔, 伊川 正人, 白井 康仁

  第８９日本薬理学会, 2016年03月, 英語, パシフィコ横浜, 国内会議

  口頭発表（一般）


• ジアシルグリセロールキナーゼalphaの核－細胞質間シャトリングの生理的意義の解明

  渡辺 真以, 木曽 裕子, 上田 修司, 山之上 稔, 齋藤 尚亮, 白井 康仁

  農芸化学会関西支部例会493回講演会, 2016年02月, 日本語, 京都大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 神経系におけるジアシルグリセロールキナーゼgammaの機能解析

  津曲 涼介, 菊永 佐紀子, 藤原 祥高, 上田 修司, 山之上 稔, 伊川 正人, 白井 康仁

  農芸化学会関西支部例会（492回講演会）, 2015年12月, 日本語, 神戸大学 農学部, 国内会議

  口頭発表（一般）


• チロシンリン酸化がジアシルグリセロールキナーゼのドメイン間相互作用及び高次構造に与える影響

  脇阪 昌明, 岩下 智秋, 濱田 大三, 祇園 景子, 上田 修司, 山之上 稔, 鶴田 宏樹, 白井 康仁

  農芸化学会関西支部例会（492回講演会）, 2015年12月, 日本語, 神戸大学 農学部, 国内会議

  口頭発表（一般）


• ジアシルグリセロールキナーゼの218番目のチロシンリン酸化はドメイン間相互作用と高次構造を変化させる

  脇阪 昌明, 岩下 智秋, 濱田 大三, 祇園 景子, 上田 修司, 山之上 稔, 鶴田 宏樹, 白井 康仁

  BMB2015, 2015年12月, 日本語, 神戸国際会議場, 国内会議

  ポスター発表


• Vitamin E activates diacylglycerol kinase alpha through 67LR and Src family tyrosine kinase

  Hayashi D, Wang L, Ueda S, Yamanoue M, Ashida H, Shirai Y

  annual meeting of ASCB 2015, 2015年12月, 英語, San Diego convention center, 国際会議

  ポスター発表


• Mechanism of lithium-induced recovery of memory and emotional impairment in DGKbetaKO mice

  Okimoto W, Ishisaka M, Nakanishi H, Ueda S, Yamanoue M, Sasaki T, Hara H, Shirai Y

  Neuroscience meeting 2015, 2015年12月, 英語, Chicago convention center, 国際会議

  ポスター発表


• Insulin-like growth factor-1 induces activation and upregulation of RhoA via PI3K/AKT/mTOR pathway in masucular hypertrophy mode of C2C12 cells

  Kushiya A, Ueda S, Kirimura Y, Katoh Y, Ishimasa M, Yamanoue M, Satoh T, Shirai Y

  annual meeting of ASCB 2015, 2015年12月, 英語, San Diego convention center, 国際会議

  ポスター発表


• Functional analysis of diacylglycerol kinase theta deficient mice

  Koizumi N, Ueda S, Fujihara Y, Yamanoue M, Ikawa M, Shirai Y

  19th international conference of functional food center, 2015年11月, 英語, 神戸大学 百年記念会館, 国際会議

  ポスター発表


• Effect of Vitamin E on diabetic nephropathy in DGKa knockout mice

  Hayashi D, Yagi K, Ueda S, Yamanoue M, Emoto N, Saito N, Shirai Y

  19th international conference of functional food center, 2015年11月, 英語, 神戸大学 百年記念会館, 国際会議

  ポスター発表


• 細胞内ホスファチジン酸産生を時・空間的に解析できる簡便かつ新規な可視化プローブの開発

  沖本 航, 中井 寛子, 伊藤 俊樹, 森田 真也, 上田 修司, 山之上 稔, 白井 康仁

  第５７回日本脂質生化学会, 2015年06月, 日本語, 東京, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 熟成中の牛肉筋漿における筋原線維Z線近傍コネクチン断片のELISA法による定量

  山之上 稔, 丸山 聖也, 上田 修司, 白井 康仁, 佐々木 加奈

  第119回日本畜産学会大会, 2015年03月, 日本語, 日本畜産学会, 宇都宮大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Screening of novel diacylglycerol kinase a activator to develop drugs improving diabetic nephropathy

  Daiki Hayashi, Ke Kiu, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Fumio Sakane, Yasuhito Shirai

  第８８回 日本薬理学会年会, 2015年03月, 英語, 名古屋国際会議場, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Expression analysis of diacylglycerol kinase theta in mouse tissues by immunostaining and LacZ reporter assay

  UEDA SHUJI, Nao Koizumi, Minoru Yamanoue, Yasuhito Shirai

  第88回日本薬理学会, 2015年03月, 日本語, 名古屋国際会議場, Diacylglycerol kinase (DGK) regulates diacylglycerol signaling, which controls the variety of cell function. DGKθ belongs to the sole member of type V DGK. Several in vitro studies have suggested important role of DGKθ, but the physiological role of the enzyme is still unclear. In this study, to reveal the spatial expression of DGKθ, we performed the immunostaining on paraffin, 国内会議

  ポスター発表


• DGKb as a possible therapeutic target for memory loss and mania

  Yasuhito Shirai

  第８８回 日本薬理学会年会, 2015年03月, 英語, 国内会議

  シンポジウム・ワークショップパネル（公募）


• DGKa欠損マウスにおける糖尿病性腎症に対するビタミンＥの効果

  林 大輝, 八木 敬子, 上田 修司, 山之上 稔, 江本 憲昭, 齋藤 尚亮, 白井 康仁

  日本農芸化学会2015大会, 2015年03月, 日本語, 岡山大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Comprehensive understanding of lipids roles in life science

  Yasuhito Shirai, Edward Dennis

  UC San Diego x Kobe University joint research kick off symposium, 2015年02月, 英語, Kobe Univ, 国際会議

  [招待有り]

  口頭発表（招待・特別）


• 脂質結合ドメインを用いた新規ホスファチジン酸可視化プローブの開発

  沖本 航, 中井 寛子, 伊藤 俊樹, 上田 修司, 山之上 稔, 白井 康仁

  第487回 日本農芸化学会関西支部例会, 2014年12月, 日本語, 神戸大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• A role of RhoA activation in IGF-I-induced muscular hypertrophy model.

  Shuji Ueda, Soichiro Yamada, Yusuke Kirimura, Akiho Kushiya, Minoru Yamanoue, Takaya Satoh, Yasuhito Shirai

  ASCB meeting 2014, 2014年12月, 英語, Philadelphia, 国際会議

  ポスター発表


• Novel aspects of galloyl catechins: development of functional food targeting on diacylglycerol kinase alpha to prevent and/or improve diabetic nephoropathy.

  Daiki Hayashi, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Naoaki Saito, Hitoshi Ashida, Yasuhito Shirai

  17th international concerence of functional food center, 2014年11月, 英語, San Diego, 国際会議

  ポスター発表


• 筋細胞におけるHSPB1の結合分子の探索とその機能解析

  小鍛治 泰斗, 上田 修司, 吉野 健一, 山之上 稔, 白井 康仁

  第87回日本生化学会大会, 2014年10月, 日本語, （公社）日本生化学会, 国立京都国際会館, 国内会議

  ポスター発表


• ガレート型カテキンだけでなくビタミンEも67kDaラミニンレセプターを介してジアシルグリセロールキナーゼαを活性化する

  林 大輝, 芦田 均, 上田 修司, 山之上 稔, 白井 康仁

  2014年度日本農芸化学会関西支部大会 (第486回講演会), 2014年09月, 日本語, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Expression of diacylglycerol kinase theta during the organogenesis of mouse embryos

  UEDA Shuji, Tu-Sekine Becky, YAMANOUE Minoru, RABEN Daniel M, SHIRAI Yasuhito

  Lipid MAPS meeting, 2014年05月, 英語, LIPD MAPS, UCSD, 国際会議

  ポスター発表


• 鶏筋原線維のプロテアーゼ分解によるコネクチン20-kDa断片の生成

  山之上 稔, 佐々木 和, 佐々木 加奈, 上田 修司, 白井 康仁

  第118回日本畜産学会大会, 2014年03月, 日本語, つくば国際会議場, 国内会議

  口頭発表（一般）


• ジアシルグリセロールキナーゼｂ欠損マウスの異常行動に対するバルプロ酸の効果

  石坂 光絵, 鶴間 一寛, 嶋澤 雅光, 白井 康仁, 原 英彰

  第87回 日本薬理学会年会, 2014年03月, 日本語, 仙台, 国内会議

  ポスター発表


• カテキン類によるジアシルグリセロールキナーゼα活性化機構の解明

  林 大輝, 芦田 均, 上田 修司, 山之上 稔, 白井 康仁

  日本農芸化学会2014年度大会, 2014年03月, 日本語, 国内会議

  口頭発表（一般）


• mTORはDGKβが活性依存的及び活性非依存的に誘起する神経突起伸長に関与する

  加野 拓也, 中井 寛子, 中島 昭雄, 吉川 潮, 齋藤 尚亮, 武井 伸之, 上田 修司, 山之上 稔, 白井 康仁

  第87回 日本薬理学会年会, 2014年03月, 日本語, 仙台, 国内会議

  口頭発表（一般）


• カテキン類及びビタミンEは67kDaラミニンレセプターを介してジアシルグリセロールキナーゼαを活性化する (Chatechins and vitamin E activate diacylglycerol kinaseα through 67kDa laminin receptor)

  林 大輝, 芦田 均, 上田 修司, 山之上 稔, 白井 康仁

  第87回日本生化学会大会, 2014年, 日本語, 国内会議

  ポスター発表


• 筋肉における低分子量ヒートショック蛋白質HSPB1の結合分子の探索

  小鍛冶 泰斗, 上田 修司, 吉野 健一, 山之上 稔, 白井 康仁

  若手フロンティア研究会2013, 2013年12月, 日本語, 神戸大学, 国内会議

  ポスター発表


• 細胞周期及び核内ホスファチジン酸産生に及ぼすジアシルグリセロールキナーゼ阻害剤の影響

  山本 麻央, 丸山 量子, 木曽 裕子, 上田 修司, 山之上 稔, 齋藤 尚亮, 白井 康仁

  日本分子生物学会年会, 2013年11月, 日本語, 神戸国際会議場, 国内会議

  ポスター発表


• クロマン環構造に着目した新規ジアシルグリセロールキナーゼα活性化剤の探索

  林 大輝, 芦田 均, 上田 修司, 山之上 稔, 齋藤 尚亮, 白井 康仁

  第124回日本薬理学会近畿部会, 2013年11月, 日本語, 日本薬理学会近畿部会, 京都ガーデンパレス, 国内会議

  ポスター発表


• Both C1 domain and a basic amino acid cluster at C-terminus are important for branching and neurite induction ability of DGKb

  Yasuhito Shirai, Takuya Kano, Takeshi Kouzuki, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Fumio Sakane, Naoaki Saito

  neuroscience meeting 2013, 2013年11月, 英語, San Diego, 国際会議

  ポスター発表


• 胎性期におけるジアシルグリセロールキナーゼシータの発現解析

  UEDA Shuji, Tu-Sekine Becky, YAMANOUE Minoru, RABEN Daniel M, SHIRAI Yasuhito

  第86回日本生化学会大会, 2013年09月, 日本語, 日本生化学会, パシフィコ横浜, 国内会議

  ポスター発表


• Role of protein kinase C in histamine release

  Yasuhito Shirai

  第８６回 日本生化学会, 2013年09月, 英語, 横浜パシフィコ, 国内会議

  シンポジウム・ワークショップパネル（公募）


• Ｃ１ドメインとＣ末塩基性アミノ酸クラスターがDGKbによる神経突起伸長に重要である

  加野 拓也, 上月 健, 上田 修司, 山之上 稔, 坂根 郁夫, 齋藤 尚亮, 白井 康仁

  ２０１３日本神経化学会, 2013年06月, 日本語, 京都国際会館, 国内会議

  ポスター発表


• ジアシルグリセロールキナーゼβによる特徴的な神経突起伸長にはcPKCも関与する

  中井 寛子, 加野 拓也, 上田 修司, 山之上 稔, 斎藤 尚亮, 白井 康仁

  第55回日本脂質生化学会大会, 2013年06月, 日本語, 日本脂質生化学会, 宮城県松島町, 国内会議

  口頭発表（一般）


• ジアシルグリセロールキナーゼβ欠損マウスにおけるけいれん感受性の増加

  石坂光絵, 鶴間一寛, 嶋澤雅光, 白井 康仁, 齋藤尚亮, 原英彰

  第86回 日本薬理学会年会, 2013年03月, 英語, 福岡, 国内会議

  口頭発表（一般）


• C2C12筋管のIGF-1刺激による筋肥大におけるRhoAの活性化機構の解析

  桐村悠祐, 上田修司, 山之上稔, 佐藤孝哉, 白井 康仁

  第86回 日本薬理学会年会, 2013年03月, 日本語, 福岡, 国内会議

  ポスター発表


• 乾燥肌モデルマウス試験におけるパイナップル果実由来グルコシルセラミド経口摂取の皮膚機能改善効果及びin vitro腸管モデルへの影響

  湯浅弘樹, 西谷洋輔, 白井 康仁, 馬場健史, 野嶋潤, 大戸信明, 桒原浩誠, 水野雅史

  第478回 日本農芸化学会関西支部, 2013年02月, 日本語, 京都, 国内会議

  口頭発表（一般）


• The expression of diacylglycerol kinase theta during mouse embryonic development

  UEDA Shuji, Tu-Sekine Becky, YAMANOUE Minoru, RABEN Daniel M, SHIRAI Yasuhito

  The ASCB 2012 Annual meeting, 2012年12月, 英語, American Society for Cell Biology, Moscone Center, USA, 国際会議

  ポスター発表


• DGKbetaによる神経突起伸張機構の解析

  加野 拓也, 上田 修司, 山之上 稔, 齋藤 尚亮, 白井 康仁

  第85回日本生化学会大会, 2012年12月, 日本語, 日本生化学会, 福岡国際会議場, 国内会議

  ポスター発表


• DGKbetaによる神経突起伸張機構の解析

  加野拓也, 上田修司, 山之上稔, 齋藤尚亮, 白井 康仁

  第85回 日本生化学会, 2012年12月, 日本語, 福岡, 国内会議

  ポスター発表


• Functional correlation between PKC and DGK in neurons

  Yasuhito Shirai

  KAIST&KIST, 2012年11月, 英語, Soul (Korea), 国際会議

  公開講演，セミナー，チュートリアル，講習，講義等


• Role of PKCalpha-mediated cofilin phosphorylation in the degranulation from RBL-2H3 mast cells

  Megumi Sakuma, Yasuhito Shirai, Ken-ichiYoshino, Maho Kuramasu, Tomofumi Nakamura, Kensaku Mizuno, Izumi Hide, Yoshihiro Nakata, Naoaki Saito

  22ndIUBMB&37thFEBS, 2012年09月, 英語, Iberia(Spain), 国際会議

  ポスター発表


• Molecular mechanism of DGKβ- mediated neurite blanching and spine formation

  NAKAI Hiroko, TAKEI Nobuyuki, NAKASHIMA Akio, KIKKAWA USHIO, SAITO Naoaki, UEDA Shuji, YAMANOUE Minoru, SHIRAI Yasuhito

  第35回日本神経科学大会, 2012年09月, 日本語, 日本神経科学会, 名古屋国際会議場, 国内会議

  ポスター発表


• Molecular mechanism of DGKβ-mediated neurite blanching and spine formation

  Hiroko Nakai, Nobuyuki Takei, Akio Nakashima, Ushio Kikkawa, Naoaki Saito, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Yasuhito Shirai

  Neuro2102, 2012年09月, 英語, Nagoya, 国際会議

  ポスター発表


• Involvement of mTOR in Diacylglycerol kinase β (DGKβ)-induced neurite branching and spine formation.

  NAKAI Hiroko, NAKASHIMA Akio, KIKKAWA USHIO, SAITO Naoaki, TAKEI Nobuyuki, UEDA Shuji, YAMANOUE Minoru, SHIRAI Yasuhito

  The 22nd IUBMB & the 37th FEBS, 2012年09月, 英語, IUBMB & FEBS, Sevilla, Spain, 国際会議

  ポスター発表


• Involvement of mTOR in Diacylglycerol kinase β (DGKβ)-induced neurite branching and spine formation

  Hiroko Nakai, Akio Nakashima, Ushio Kikkawa, Naoaki Saito, Nobuyuki Takei, Shuji Ueda, Minoru Yamanoue, Yasuhito Shirai

  22ndIUBMB&37thFEBS, 2012年09月, 英語, Iberia(Spain), 国際会議

  ポスター発表


• Functional correlation between PKC and DGK in neuronal morphological change including branching and spine formation

  Yasuhito Shirai

  Neuro2102, 2012年09月, 英語, Nagoya, 国際会議

  [招待有り]

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• Analysis of tissue distribution of diacylglycerol kinase theta

  UEDA Shuji, KIRIMURA Yuji, YAMANOUE Minoru, SHIRAI Yasuhito

  The 14th International Congress of Histochemistry and Cytochemistry, 2012年08月, 英語, International Federation of Societies for Histochemistry and Cytochemisty, Kyoto International Conference Center, 国際会議

  ポスター発表


• Analysis of tissue distribution of diacylglycerol kinase theta

  Shuji Ueda, Yusuke Kirimura, Minoru Yamanoue, Yasuhito Shirai

  14th International Congress of Histochemistry and Cytochemistry, 2012年08月, 英語, kyoto, 国際会議

  ポスター発表


• ジアシルグリセロールキナーゼβによる特徴的な神経突起伸にはmTORが関与する

  白井 康仁, 中井寛子, 中西広樹, 中嶋昭雄, 吉川潮, 上田修司, 山之上稔, 斎藤尚亮

  第54回日本脂質生化学会, 2012年06月, 日本語, 福岡, 国内会議

  口頭発表（一般）


• ジアシルグリセロールキナーゼ_による特徴的な神経突起伸にはmTORが関与する

  白井 康仁, 中井 寛子, 中西 広樹, 中嶋 昭雄, 吉川 潮, 上田 修司, 山之上 稔, 斎藤 尚亮

  第54回日本脂質生化学会大会, 2012年06月, 日本語, 日本脂質生化学会, 九州大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 食肉の日齢評価に利用可能なタンパク質マーカーの探索

  清水俊作, 上田修司, 桐村悠佑, 本田和久, 上曽山博, 白井 康仁, 山之上稔

  日本畜産学会, 2012年03月, 日本語, 名古屋, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 筋肉細胞におけるEGCgの糖代謝に及ぼす影響について

  上田学, 上田修司, 白井 康仁, 芦田均

  日本農芸化学会2012年度大会, 2012年03月, 日本語, 京都, 国内会議

  口頭発表（一般）


• ジアシルグリセロールキナーゼθの機能解析

  上田 修司, 桐村 悠佑, 山之上 稔, 白井 康仁

  日本農芸化学会2012年度大会, 2012年03月, 日本語, 日本農芸化学会, 京都女子大学, 国内会議

  ポスター発表


• ジアシルグリセロールキナーゼthetaの機能解析

  上田修司, 桐村悠佑, 山之上稔, 白井 康仁

  日本農芸化学会2012年度大会, 2012年03月, 日本語, 京都, 国内会議

  口頭発表（一般）


• The role of diacylglycerol kinase in the degranulation from RBL-2H3 mast cells

  M. Sakuma, Shirai Yasuhito, T. Ueyama, N. Saito

  第85回 日本薬理学会年会, 2012年03月, 日本語, 京都, 国内会議

  ポスター発表


• PKCetaによるケラチノサイト分化機構の解明

  白井 康仁, 盛岡祥子, 佐久間恵, 千田和広, 斎藤尚亮

  日本農芸化学会2012年度大会, 2012年03月, 日本語, 京都, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Physiological function of nuclear DGKα under serum depleted conditions

  Y. Kiso, Shirai Yasuhito, M. Sakuma, M. Ikeda, N. Saito

  第85回 日本薬理学会年会, 2012年03月, 日本語, 京都, 国内会議

  ポスター発表


• Diacylglycerol kinase as a possible drug target

  Shirai Yasuhito, N. Saito

  第85回 日本薬理学会年会, 2012年03月, 英語, 京都, 国内会議

  [招待有り]

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• 筋肉細胞におけるEGCgの糖代謝に及ぼす影響について

  上田 学UEDA Manabu, 上田 修司, 白井 康仁, 芦田 均

  日本農芸化学会2012年度大会, 2012年, 日本語, 京都, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Novel. phosphorylation site(s) of cofilinby PKCα and its negative role in the degranulation from RBL-2H3 mast cells

  M. Sakuma, Shirai Yasuhito, K. Yoshino, M .Kuramasu, T. Nakamura, K. Mizuno, I Hide, Y. Nakata, N. Saito

  2011 ASCB Annual Meeting, 2011年12月, 英語, アメリカ・ニューオリンズ, 国際会議

  ポスター発表


• Function of PKC and DGK in neurons

  白井 康仁

  2011 Taiwan-Japan Joint Symposium on Cell Signaling and Gene Regulation, 2011年11月, 英語, 台湾・台南, 国内会議

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• ジアシルグリセロールキナーゼβ（DGKβ）による神経特異的突起伸長機構の解明

  中井寛子, 加野拓也, 上月健, 斉藤尚亮, 中嶋昭雄, 吉川潮, 上田修司, 山之上稔, 白井 康仁

  第3回神戸大学バイオサイエンス研究会・若手研究者交流会, 2011年09月, 日本語, 神戸, 国内会議

  ポスター発表


• Regulation of diacylglycero kinase by phosphorylation

  白井 康仁

  Fifty-Second International Symposium on “Regulation of Enzyme Activity and Synthesis in Normal and Neoplastic Tissues”, 2011年09月, 英語, イタリア・ボローニャ, 国際会議

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• Novel PKCαphosphorylation site(s) contribute to proper termination of histamine release

  M Sakuma, Shirai Yasuhito, K Yoshino, M Kuramasu, T Nakamura, K Mizuno, I Hide, Y Nakata, N Saito

  第８４回日本生化学会, 2011年09月, 日本語, 京都, 国内会議

  ポスター発表


• 異なるチロシンリン酸化によるジアシルグリセロールキナーゼalphaの局在調節機構

  白井 康仁, 池田 もも, 佐久間 恵, 木曽 裕子, 斎藤 尚亮

  第119回 薬理学会近畿支部大会, 2011年07月, 日本語, 名古屋, 国内会議

  口頭発表（一般）


• ジアシルグリセロールキナーゼαの核移行と細胞周期制御に関する研究２－c-Ablによるチロシンリン酸化サイトの同定－

  白井 康仁, 池田 もも, 木曽 裕子, 佐久間 恵, 齋藤 尚亮

  第53回日本脂質生化学会, 2011年05月, 日本語, 東京, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 血清によるDGKαの核外移行におけるc-Ablによるリン酸化サイトの同定

  池田もも, 白井 康仁, 木曽 裕子, 佐久間 恵, 斎藤 尚亮

  第84回 日本薬理学会年会（但し地震のため紙上開催）, 2011年03月, 日本語, 横浜, 国内会議

  ポスター発表


• PKCetaによるケラチノサイト扁平化機構～PKCeta とRalAの結合とケラチノサイト扁平化における役割り～

  白井 康仁, 斎藤 尚亮

  第84回 日本薬理学会年会（但し地震のため紙上開催）, 2011年03月, 日本語, 横浜, 国内会議

  [招待有り]

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• Direct binding of RalA to PKCeta and its crucial role in morphological change during keratinocytes differentiation

  白井 康仁

  神戸大学ブリュッセルオフィイスオープニング記念シンポジウム, 2011年03月, 英語, ベルギー・ブリュッセル, 国際会議

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• Impairment of cognitive function and lithium-sensitive behavior of knockout mice of neuron-enriched subtype of DG kinase, DGKｂ

  Shirai Yasuhito, T Kouzuki, K Kakefuda, A. Ohyagi, K. Horie, S. Moriguchi, S. Morita, M. Shimazawa, K. Fukunaga, J. Takeda, N. Saito, H. Hara

  First annual meeting of International Society of Radiation Neurobiology., 2011年01月, 英語, Maebashi, 国際会議

  ポスター発表


• Nuclear diacylglycerol signaling regulated by nuclear-cytoplasmic shuttling of diacylglycerol kinaseα and its correlation to cell cycle control

  Shirai Yasuhito, N Saito

  BMB2010 (兼 第83回日本生化学会大会), 2010年12月, 英語, Kobe, 国際会議

  [招待有り]

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• Correlation between abnormal behavior and lipids contents of DGKβ KO mice. The 5th international mini-symposium on diacylglycerol kinase (DGK)

  Shirai Yasuhito

  5th mini-symposium on DGK, 2010年12月, 英語, Kobe, 国際会議

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• Visualization of protein kinase C and diacylglycerol kinase in living cells

  Shirai Yasuhito, N. Saito

  28th JES summer seminar on Endocrinology & Metabolism, 2010年07月, 英語, nagasaki, 国際会議

  [招待有り]

  シンポジウム・ワークショップパネル（指名）


• Membrane lipids control by neuron-enriched diacylglycerol kinaseb is important for spine formation and cognitive function

  Shirai Yasuhito, T. Kouzuki, K. Kakefuda, S. Moriguchi, A. Oyagi, K. Horie, S. Morita, M. Shimazawa, K. Fukunaga, J. Takeda, N. Saito, H. Hara

  Keystone symposia “Bioactive lipids: biochemistry and diseases", 2010年06月, 英語, kyoto, 国際会議

  ポスター発表


• 神経特異的ジアシルグリセロールキナーゼDGK betaの機能解析

  上月 健, 白井 康仁, 掛札 賢一, 大八木 篤, 堀江 恭二, 嶋澤 雅光, 福永 浩司, 竹田 潤二, 齋藤 尚亮, 原 英彰

  第82回日本薬理学会年会, 2009年03月, 日本語, パシフィコ横浜, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 気分障害と神経特異的ジアシルグリセロール

  白井 康仁

  第82回日本薬理学会年会, 2009年03月, 日本語, パシフィコ横浜, 国内会議

  口頭発表（招待・特別）


• 神経特異的ジアシルグリセロールキナーゼDGKの機能解析

  白井 康仁, 上月 健, 掛札 賢一, 大八木 篤, 堀江 恭二, 嶋澤 雅光, 齋藤 尚亮

  第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学大会合同大会, 2008年12月, 日本語, 神戸, 国内会議

  ポスター発表


• RalAはeta PKCによるケラチノサイトの扁平化に必須である

  白井 康仁, 盛岡 祥子, 大辻 千裕, 吉野 健一, 酒井 規雄, 上山 健彦, 齋藤 尚亮

  第113回日本薬理学会近畿部会, 2008年06月, 日本語, 岡山, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Differential regulation of dual oxidase 1 by dual activator 1 splicing variants.

  Tsujibe Satoshi, Ueyama Takehiko, Shirai Yasuhito, Leto L. Thomas, Saito Naoaki

  第81回日本薬理学会年会, 2008年03月, 日本語, パシフィコ横浜, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Clarification of regulatory mechanism of Orail(SOCs)by PKC.

  Kawasaki Takumi, Ueyama Takehiko, Shirai Yasuhito

  14th Congress of Ca2+ binding proteins & Ca2+ function in health & disease, 2007年10月, 英語, La Palma Spain, 国際会議

  ポスター発表


• c-Ab1, a tyrosine kinase involved in chronic myeloid leukemia, regulates nucleo-cytoplasmic shuttling of DGK alpha and cell cycle.

  Shirai Yasuhito, Matsubara Takehiro, Saito Naoaki

  第111回日本薬理学会近畿部会, 2007年08月, 英語, Indian Wells CA, 国際会議

  ポスター発表


• 脂質代謝酵素DGKの核―細胞質問shuttling機構と細胞周期制御への関与

  松原 岳大, 白井 康仁, 齋藤 尚亮

  第49回日本脂質生化学会, 2007年06月, 日本語, 北海道大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 脂質代謝酵素DGK alphaの核―細胞質問shuttling機構と細胞周期制御への関与

  松原 岳大, 白井 康仁, 齋藤 尚亮

  第49回日本脂質生化学会, 2007年06月, 日本語, 第49回日本脂質生化学会, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 核内脂質シグナル及び核移行蛋白質の可視化システムを用いた細胞周期機構の解明－DGKの核－細胞質間移行機構と核内における機能に着目して－

  白井 康仁, 松原 岳大, 齋藤 尚亮

  第49回日本脂質生化学会, 2007年06月, 日本語, 北海道大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• ヒトケラチノサイトにおけるTNF-によるNGF分泌促進作用とそのシグナル伝達機能

  高岡 幸二, 白井 康仁, 齋藤 尚亮

  第111回日本薬理学会近畿部会, 2007年06月, 日本語, 名古屋, 国内会議

  口頭発表（一般）


• DG-PKCシグナル系の可視化とその異常による疾患

  齋藤 尚亮, 白井 康仁, 松原 岳大, 足立 直子, 高橋 英之, 酒井 規雄

  第49回日本脂質生化学会, 2007年06月, 日本語, 北海道大学, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 表皮細胞ケラチノサイトの分化におけるPKCの機能解析

  盛岡 祥子, 白井 康仁, 大辻 千裕, 柏木 香保里, 酒井 規雄, 齋藤 尚亮

  第80回日本薬理学会年会, 2007年03月, 日本語, 名古屋国際会議場, 国内会議

  ポスター発表


• 表皮細胞ケラチノサイトの分化における eta PKCの機能解析

  盛岡 祥子, 白井 康仁, 大辻 千裕, 柏木 香保里, 酒井 規雄, 齋藤 尚亮

  第80回日本薬理学会年会, 2007年03月, 日本語, 名古屋国際会議場, 国内会議

  ポスター発表


• 新規蛍光蛋白システムを用いたphox蛋白内の特異的結合の解明：p40phoxの分子内結合に注目して

  日下部 とも子, 清水 彩, 上山 健彦, 川﨑 拓実, 白井 康仁, 唐澤 智司, 宮脇 敦, 齋藤 尚亮

  第80回日本薬理学会年会, 2007年03月, 日本語, 名古屋国際会議場, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 新規蛍光蛋白システムを用いたphox蛋白内の特異的結合の解明：p40phoxの分子内結合に注目して

  日下部 とも子, 清水 彩, 上山 健彦, 川﨑 拓実, 白井 康仁, 唐澤 智司, 齋藤 尚亮

  第80回日本薬理学会年会, 2007年03月, 日本語, 名古屋国際会議場, 国内会議

  口頭発表（一般）


• RBL-2H3細胞の脱顆粒におけるPKCとアクチンの機能協関解析

  倉増 真帆, 白井 康仁, 中村 朋文, 秀 和泉, 中田 義啓, 齋藤 尚亮

  第80回日本薬理学会年会, 2007年03月, 日本語, 名古屋国際会議場, 国内会議

  ポスター発表


• The mechanism of nucleo-cytoplasmic shuttling of diacylglycerol kinaseα.

  Shirai Yasuhito, Matsubara Takehiro, Saito Naoaki

  The International Symposium Functional organization of the nucleus, 2007年01月, 英語, 淡路夢舞台（兵庫）, 国際会議

  口頭発表（一般）


• The mechanism of nucleo-cytoplasmic shuttling of diacylglycerol kinase alpha.

  Shirai Yasuhito, Matsubara Takehiro, Saito Naoaki

  International Symposium Functional organization of the nucleus, 2007年01月, 英語, 淡路国際夢舞台, 国際会議

  口頭発表（一般）


• ジアシルグリセロールキナーゼによるクラスリン依存性エンドサイトーシスの制御

  川﨑 拓実, 小林 剛, 上山 健彦, 白井 康仁, 齋藤 尚亮

  第110回日本薬理学会近畿部会, 2006年11月, 日本語, ぱるるプラザ京都, 国内会議

  口頭発表（一般）


• Spatial and temporal controls of PKC isoform activation.

  Shirai Yasuhito, Saito Naoaki

  International Union of Pharmacology, 2006年07月, 英語, 北京五洲大酒店（中国）, 国際会議

  口頭発表（招待・特別）


• プロテインキナーゼCεのフォスファチジルイノシトール２リン酸結合能と神経突起伸長能との相関

  白井 康仁, 村上 卓也, 倉増 真帆, 齋藤 尚亮

  第48回日本脂質生化学会, 2006年06月, 日本語, 東京大学医科学研究所, 国内会議

  口頭発表（一般）


• The Interaction between the Domains of DGK & gamma.

  三畝 宏一, 白井 康仁, 松原 岳大, 山口 泰人, 齋藤 尚亮

  20th IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology and 11th FAOBMB Congress, 2006年06月, 英語, 国立京都国際会館, 国内会議

  ポスター発表


• 糖尿病性腎症改善薬のターゲットとしてのジアシルグリセロールキナーゼ(DGK)

  白井 康仁, 齋藤 尚亮

  第79回日本薬理学会年会, 2006年03月, 日本語, 国内会議

  口頭発表（一般）


• NADPHオキシダーゼ複合体の形成メカニズムの解析

  辰野 敏彦, 上山 健彦, 辻部 智, 白井 康仁, 齋藤 尚亮

  第79回日本薬理学会年会, 2006年03月, 日本語, 国内会議

  口頭発表（一般）


• クラスリン依存性エンドサイトーシスにおけるDGキナーゼの役割

  川﨑 拓実, 筧 朋子, 白井 康仁, 齋藤 尚亮

  第28回日本分子生物学会, 2005年12月, 日本語, 国内会議

  口頭発表（一般）


• 発達期のラットの脳におけるジアシルグリセロールキナーゼ、サブタイプの発現変化.

  足立 直子, 大保 三穂, 谷口 泰造, 山口 泰人, 竹中 利佳, 白井 康仁, 齋藤 尚亮

  第４６回日本組織細胞化学会, 2005年10月, 日本語, 国内会議

  口頭発表（一般）


• DGKa の核局在制御と細胞周期

  松原 岳大, 白井 康仁, 佐谷 秀行, 齋藤 尚亮

  第78回日本生化学会大会, 2005年10月, 日本語, 国内会議

  口頭発表（一般）

• 北米神経科学会


• 日本脂質生化学会


• 日本神経科学会


• 日本薬理学会


• 日本生化学会

• DGキナーゼを介した食品成分による糖尿病性腎症改善機構の解明とその応用

  白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(C), 神戸大学, 2020年04月01日 - 2023年03月31日


• 膵β細胞の新生・増殖を標的とする新規糖尿病治療法を指向した細胞内脂質シグナル研究

  石川 智久, 金子 雪子, 白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(B), 静岡県立大学, 2017年04月01日 - 2020年03月31日

  β細胞特異的ジアシルグリセロールキナーゼ (DGK) δ欠損マウスでは小型膵島の増加が観察されるという我々のこれまでの知見を基に、DGK δ欠損によるβ細胞量増加の機序、およびそれによる糖尿病改善の可能性を検討した。その結果、β細胞のDGKδ欠損により細胞周期関連遺伝子の発現上昇を伴ってβ細胞増殖が亢進すること、また、β細胞特異的DGK δ欠損マウスではβ細胞破壊処理による血糖上昇が部分的に回復することを示した。以上より、β細胞のDGKδ阻害により細胞増殖が亢進してβ細胞量が増加し、それにより糖尿病病態が改善することが示唆された。


• 小腸上皮多糖受容体を介した自然免疫修飾を利用した健康増強に資する高機能性食品開発

  水野 雅史

  科学研究費補助金／基盤研究(B), 2015年04月 - 2018年03月

  競争的資金


• 酵素の細胞内局在調節機構の包括的解明－ＤＧキナーゼを例として－

  白井 康仁

  学術研究助成基金助成金／基盤研究(C), 2015年04月 - 2018年03月, 研究代表者

  競争的資金


• ドメインライゲーションによって再構成したキナーゼ全長の動的構造解析

  三島 正規, 白井 康仁, 伊藤 隆

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 挑戦的萌芽研究, 首都大学東京, 2015年04月01日 - 2017年03月31日

  キナーゼの多くは、柔軟なリンカーで連結されたマルチドメインで構成される全長構造をもつ。本研究では、ドメイン間の配置とその変化（活性化）を、全長のキナーゼの分子構造レベルで可視化し、不活性型から活性化に至る制御機構を明らかにすることを目的としている。まずsortaseによるライゲーションによる再構成を試み、Protein Kinase CのキナーゼドメインとC1Bドメインの連結に成功した。また、全長での構造解析に必要な長距離情報を得るためのスピンラベルプローブとして、DOTA-M8を合成し、実際に常磁性効果（PCS）のNMRによる観測に成功した。


• 生命現象を形作る生体組織の巧みな構造－瀬戸内の豊かな食材を例に学ぶ生物の「超」ミクロの世界－

  白井 康仁

  独立行政法人日本学術振興会, 研究成果の社会還元・普及事業 ひらめき☆ときめきサイエンス, 2017年, 研究代表者

  競争的資金


• 細胞・組織が作り出す生命の多様な構造－顕微鏡観察で学ぶミクロの世界－

  白井 康仁

  ひらめき☆ときめきサイエンス, 2015年, 研究代表者

  競争的資金


• 生命現象を形作る生体組織の巧みな構造-地元食材から学ぶ細胞・組織のミクロの世界-

  白井 康仁

  ひらめき☆ときめきサイエンス, 2014年, 研究代表者

  競争的資金


• A-STEP「ＰＫＣ及びＤＧキナーゼをターゲットとする新規抗ヒスタミン薬の開発と分子標的機能性食品への応用」

  白井 康仁

  研究成果最適展開支援プログラム フィージビリティスタディステージ 探索タイプ, 2013年, 研究代表者

  競争的資金


• A-STEP「ＰＫＣ及びＤＧキナーゼをターゲットとする新規抗ヒスタミン薬の開発と分子標的機能性食品への応用」

  白井 康仁

  研究成果最適展開支援プログラム フィージビリティスタディステージ 探索タイプ, 2012年, 研究代表者

  競争的資金


• ＰＫＣの機能破綻により発症する神経変性疾患モデル動物作製と解析および創薬への応用

  齋藤 尚亮

  科学研究費補助金／基盤研究(B), 2009年

  競争的資金


• ＰＫＣとの機能協関に着目したＤＧキナーゼの機能解析とその応用

  白井 康仁

  科学研究費補助金／基盤研究(C), 2009年, 研究代表者

  競争的資金


• プロテインキナーゼＣシグナル系路の異常による疾患の発症メカニズムの解明とその応用

  齋藤 尚亮

  科学研究費補助金／基盤研究(B), 2007年

  競争的資金


• 蛋白質のシグナル伝達機能

  吉川 潮

  2006年

  競争的資金


• ＤＮＡ Ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎによる膜機能蛋白に対する抗体作成

  谷口 泰造

  科学研究費補助金／萌芽研究, 2005年

  競争的資金


• 蛋白質のシグナル伝達機能

  吉川 潮

  2005年

  競争的資金


• 細胞膜リン脂質の動的代謝による細胞応答誘導の分子機構

  齋藤 尚亮

  科学研究費補助金／基盤研究(B), 2005年

  競争的資金


• 活性酸素産生機構における脂質シグナルのダイナミックイメージング解析

  齋藤 尚亮

  科学研究費補助金／特定領域研究, 2005年

  競争的資金


• 核内脂質シグナル及び核移行蛋白質の可視化システムを用いた細胞周期制御機構の解明

  白井 康仁

  科学研究費補助金／特定領域研究, 2005年, 研究代表者

  競争的資金


• 小脳長期抑圧現象におけるプロテインキナーゼCおよびDGキナーゼの時空間解析

  齋藤 尚亮, 白井 康仁, 柏木 香保里

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 特定領域研究, 神戸大学, 2004年 - 2004年

  本研究では、PKCとDGK分子機能相関を明らかにした上で、小脳スライスのLTDに対してPKCとDGKの結合および相互機能修飾がどのように働くかを、電気生理学的現象と同時にライブイメージングを用いて神経可塑性における分子メカニズムを明らかにすることを目的とした。 その結果、(1)GFP標識PKCを発現する遺伝子操作動物を作製した。この動物においてはGFP標識PKCの脳内の発現部位および発現時期がともに制御可能であり、各脳部位でのPKC分子のライブイメージングが可能であるだけでなく、各脳部位でのPKC発現による行動変化の解析も可能である。今回、この動物の小脳スライスを用いて、Purkinje細胞におけるgammaPKC-GFPのイメージングを行ったところ、平行線維刺激によっては、gammaPKC-GFPの細胞膜へのトランスロケーションが、樹状突起遠位から近位へと伝播する様子が認められた。この事実は、シナプスを介した刺激によりPKCの活性化がニューロン内で伝播されることを示しており、LTDの分子メカニズムを理解する上で非常に興味深い。(2)小脳Purkinje細胞に共存する2種類のリン酸化酵素PKCおよびDGK分子間の機能的協関を解析した。PKCとDGKは、PKCの活性化とともに結合し、DGKはPKCによりリン酸化されることが明らかとなった。Mass spectrometryにより、DGKのリン酸化部位を決定し、変異体を作製した結果、PKCによるDGKのリン酸化は、DGK活性の上昇を導くことが明らかになった。これらの結果は、受容体刺激によるDG産生およびCa2+上昇を介したPKCの活性化は、DGKの細胞膜上でのPKCとの結合を引き起こし、そこでのDGKのPKCによるリン酸化による活性化を導く。このDGKの活性化は細胞膜上のDG量を減少させ、PKCの活性化を終了させると推測され、LTDの分子機構にも重要なメカニズムであると考えられる。


• PKCターゲティングのFRETによる抗癌剤のハイスループットスクリーニングの開発

  齋藤 尚亮, 白井 康仁, 柏木 香保里

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 萌芽研究, 神戸大学, 2003年 - 2004年

  PKCの多彩な機能は、10種類以上のサブタイプが、種々の細胞害外刺激に応じて、細胞内の目的とする部位に移動し、特定の基質をリン酸化するという機能(ターゲティング機能)を有するためであると考えられてきている。 本年度の研究では、種々の合成ホルボールエステルによるPKC各サブタイプのターゲティングをスクリーニングすることにより、特定のPKC機能の阻害剤(活性化剤)を見出すことを目的とした。また、種々の病態における各PKCサブタイプの役割についても検討した。その結果、(1)特定のPKCサブタイプを特異的に活性化する合成ホルボールエステルを同定した。このホルボールエステルはin vitroでは特異性を示さないものの、in vivoではbetaPKCを特異的に活性化する働きを有した。(2)脳虚血による脳神経細胞死に対して予防作用を持つエストロゲンは、PKC特にgammaPKCを介して、その効果を発揮することを示した。また、その神経保護作用は従来の核型エストロゲン受容体ではなく、細胞膜に存在する新しいエストリロゲン受容体を介することが明らかとなった。(3)VEGF受容体を介したERKの活性化機構にはdeltaPKCの活性化が必須であることを示した。(4)ミクログリア細胞によるドン食作用には2種のPKC、epsilonおよびbetaが関与しているが、それぞれ、異なる機構に関与することを示した。つまり、活性酸素産生に関与するbetaPKCと、ドン食運動に関与するepsilonである。 以上の結果から、細胞種、細胞機能により機能するPKCが異なっており、各生理作用に関与するPKCサブタイプを決定し、さらにサブタイプ特異的なPKC作用薬の開発を行うことにより、副作用の少ない薬物の開発が可能となることを示した。


• PKC及びDGKに存在する脂肪酸応答ドメインの高次構造解析

  白井 康仁, 齋藤 尚亮, 谷口 泰造

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(C), 神戸大学, 2003年 - 2004年

  PKC及びDGKに存在する脂肪酸応答ドメインの高次構造を明らかにする研究の一環として、以下の研究を行った。 まず、PKC及びDGKの脂肪酸応答ドメインの同定を行ったところ、εPKCとDGKγにおいてはC1AではなくC1Bドメインが脂肪酸と相互作用すると予想された。一方、γPKCはC1AとC1Bのどちらかがあれば充分であった。ついで、NMR解析に供するため、DGKγC1A及びC1BドメインとGSTまたはMBPとの融合蛋白質を作製を試みた。最終的に、500mlの大腸菌培養液から約0.5mgのMBP-DGKγC1A及びMBP-DGKγC1Bを得た。一方、GST融合蛋白質の収量は非常に少なかった。そこで、MBP-DGKγC1A及びMBP-DGKγC1Bをプロテアーゼ処置によりタグを切断した後、Superose 6HRを用いたゲルろ過に供した。しかし、目的のペプチドが得られなかった。そこで、より微量なペプチドを検出するために、C末端にもFLAGタグを融合したMBP-DGKγC1A-FLAG及びMBP-DGKγC1B-FLAGを作製し、同様の実験を行った。その結果、DGKγC1A-FLAGとDGKγC1B-FLAGは、ともにボイドボリュームに溶出され、aggregationを起こしている可能性が強く示唆された。この傾向は、同様に作製したMBP-DGKγC1-FLAG, MBP-εPKCC1-FLAG及びMBP-εPKCC1A-FLAGでも認められた。また、作製した各融合蛋白質を再フォールディング後、PDBu結合能を測定したが、有意な結合は認められなかった。以上のことから、MBP融合PKC及びDGKのC1ドメインを大腸菌を用いて発現させた場合には、正常な高次構造を保持していない可能性が示唆された。今後、HAタグや、バキュロウイルス発現系など対応策を講じていく必要があると思われる。


• CキナーゼとDGキナーゼの神経情報伝達におけるクロストーク機構のイメージング解析

  齋藤 尚亮, 白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 特定領域研究, 神戸大学, 2002年 - 2002年

  【緒言】プロテインキナーゼC(PKC)は、神経可塑性を調節していることが報告されているが、神経可塑性に関与する情報伝達経路の中でどのPKCサブタイプが、いつ、どこで、どのような役割を果たしているかという時空間レべルの解明は、未だ行われていない。我々は、GFP融合PKCを用いた検討により、PKCには種々に刺激に応じて異なる蛋白質へターゲットする機構(ターゲティング機構)があることも報告し、このターゲティング機構が神経可塑性においても重要であることを示唆してきた。本年度の研究において、神経におけるPKCターゲティング機構の解明、および、PKCターゲティングを制御する因子であるDGKとの関連の解明を目的として研究を行った。 【結果と考察】1)脂質メッセンジャーであるアラキドン酸およびセラミドはPKCepsilon(前シナプス型サブタイプ)およびPKCdelta(痛覚路発現サブタイプ)のC1Bドメインに作用し、サブタイプ特異的にゴルジ体にトランスロケーションさせること、2)PKCの活性化をともなわないターゲティングによっても、細胞死などの現象を引き起こすこと、3)PKCgammaとDGKgammaは、カルシウム依存性に細胞内で直接結合し、お互いの機能を制御しうること、を見出した。これらの結果より、酵素の活性化とは関係なくPKCターゲティングが生理機能をもつこと、および、このPKCのターゲティングは調節する薬物のターゲットとして、PKC epsiolonのC1Bドメイン、DGKgammaなどが候補となることが示唆された。さらに、GFP標識した各PKCサブタイプを脳部位特異的、時期特異的に発現可能なトランスジェニックマウスを作成し、各脳部位でのPKCのターゲティングと電気生理現象の関連を解析を可能とした。脳スライスにおけるPKCターゲティングは培養細胞において観察されたものと異なっていることから、神経可塑性におけるPKCおよびDGKの機能を解析するためには、脳スライス内を用いたより生理的な条件下でのPKCターゲティングの検討が必要であることが示唆された。


• CキナーゼとDGキナーゼの脂質性シグナルによる標的認識機構の解明

  白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 若手研究(B), 神戸大学, 2001年 - 2002年

  プロテインキナーゼC(PKC)及びジアシルグリセロールキナーゼ(DGK)の脂質性シグナルによるサブタイプ特異的標的認識(ターゲティング)機構を解明する目的で、εPKC及びDGKγの変異体とGFPとの融合蛋白質を作製し、脂質性シグナルによる動態をコンフォーカルレーザー顕微鏡で観察した。その結果、1,C1Bドメインを変異(欠損または点変異)させたεPKCは、アラキドン酸(AA)及びセラミドによるゴルジ体へのターゲティングが消失したことから、これらの脂質性シグナルによるターゲティングにはC1Bドメインが関与していることが明らかになった。 2,δPKCは、セラミドによりゴルジ体へターゲティングされるが、AAには応答しない。そこで、εPKCのC1BドメインをδPKCのC1Bに入れ替えたキメラを作製したところ、AAに応答しなくなった。反対に、εPKCのC1BドメインをもつキメラδPKCは、AAに応答するようになった。これらのことから、εPKCとδPKCのAAに対する応答能の違いは、それぞれのC1Bが決定づけていることが明らかになった。 3,DGKγはAA及びTPAにより細胞質膜へターゲティングされる。C1Bドメインを欠損させるとAAによるターゲティングは消失したが、C1Aドメインを欠損させてもAAによるターゲティング能は有していた。一方、C1Aドメインを欠損させるとAAに対する応答能は保持していたが、TPAには応答しなくなった。このことから、DGKγのAA応答にはC1Bドメインが、TPA応答にはC1Aドメインが重要でり、TPAとAAに応答するモチーフはそれぞれ独立していることが明らかになった。


• プロテインキナーゼCの時空間シグナリング機構(ターゲティング機構)の解明

  齋藤 尚亮, 酒井 規雄, 白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(B), 神戸大学, 2001年 - 2002年

  PKCの多彩な機能は、10種類以上のサブタイプが各々独自の機能を種々の細胞内で発揮するためと考えられているが、「どのサブタイプが、どこで」、「どのような機序で」、「どの細胞機能に」関与しているかは未だ明らかではない。我々は、GFP融合PKCを用いた検討により、PKCには種々に刺激に応じて異なる蛋白質へターゲットする機構(ターゲティング機構)があることも報告し、このターゲティング機構が神経可塑性においても重要であることを示唆してきた。本年度の研究において種々のPKCターゲティング機構における分子メカニズムについて解析した。 その結果、1)脂質メッセンジャーであるアラキドン酸およびセラミドはPKCepsilonおよびPKCdeltaのC1Bドメインに作用し、サブタイプ特異的にゴルジ体にトランスロケーションさせること、2)deltaPKCは、セラミドの刺激によって特異的にゴルジ体にターゲティングし、同時にチロシンリン酸化によって活性化されること、つまり、このセラミドによるdeltaPKCの活性化機構は、ホルボールエステルにより細胞膜へのトランスロケーションを伴う活性化機構とは全く異なっており、それにより導かれる細胞応答も異なっていること、3)deltaPKCの細胞膜へのターゲティングにより細胞死が誘導されるが、その機構においてdeltaPKCの活性化は不要であること、4)siRNAにより種特異的にPKCサブタイプをノックダウンすることが可能となったこと、5)マクロファージによるドン食作用におけるPKCepsilonの作用について、報告した。これらの結果より、酵素の活性化とは関係なくPKCターゲティングが生理機能をもつこと、および、このPKCのターゲティングがPKCの多岐にわたる機能の分子基盤になっていることを示唆した。さらに、GFP標識した各PKCサブタイプを脳部位特異的、時期特異的に発現可能なトランスジェニックマウスを作成し、各脳部位でのPKCのターゲティングと電気生理現象の関連を解析を可能とした。生組織におけるPKCターゲティングは培養細胞において観察されたものと異なっていることから、PKCの機能を解明するためには、生組織を用いたより生理的な条件下でのPKCターゲティングの検討が必要であることが示唆された。


• 神経可塑性制御に対するPKCの役割-トランスジェニックマウスを用いた研究-

  酒井 規雄, 天野 託, 松林 弘明, 白井 康仁, 斎藤 尚亮

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 特定領域研究, 2001年 - 2002年

  (1)Tet制御システムを用いたγPKC-GFP,εPKC-GFPトランスジェニックマウスの解析 neuron specific enolase promoterの下流にtTAを発現するマウス(NSE-tTA)、calcium calmodulin kinaseII promoterの支配下にtTAを発現するマウス(CamKII-tTA)と掛け合わした際のPKC-GFPの発現部位の特徴についての解析はほぼ終了した。現在、NSE-tTA x γPKC-GFPバイトランスジェニックマウスから小脳生スライスを作製し、γPKC-GFP発現小脳プルキンエ細胞において、2光子励起レーザー顕微鏡や高感度CCDカメラを用いて、γPKCのトランスロケーションの観察を試みた。各種グルタミン酸受容体作用薬、あるいは電気刺激により、γKCのトランスロケーションが観察可能で刺激に応じてPKC-GFPのトランスロケーションが伝播していくライブイメージをとらえることが可能になった。また、CamKII-tTAマウスとγPKC-GFPマウスを掛け合わせ、海馬を含む前脳全体にγPKC-GFPが発現するマウスにおいてもγPKCのトランスロケーションの観察を試みを行っている。このように、我々の作成したマウスはターゲティングを指標にPKCの神経系での機能を解析するツールとなるだけでなく、神経の興奮の伝播を蛋白質レベルで明瞭にイメージングすることが出来る新しい神経機能解析のための遺伝子操作動物であると考えられる。 (2)PKCターゲティングを脳部位特異的に減弱させたトランスジェニックマウスを作製し神経特異的機能とPKCとの関連を明らかにする。 δPKC γPKCのPDK1リン酸化部位をアラニンに変異させた変異体を作成し、培養細胞に発現させ受容体刺激に伴うトランスロケーションを観察したところ、野生型に比し、細胞膜に長くとどまることが明らかになった。このように、PDK1はPKCをリン酸化することによりターゲティングを調節しうることが明らかになった。


• CキナーゼとDGキナーゼの神経情報伝達におけるクロストーク機構の解析

  齋藤 尚亮, 白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 特定領域研究(C), 神戸大学, 2001年 - 2001年

  神経可塑性における蛋白質リン酸化酵素を介した細胞内情報伝達の時・空間ネットワークを解明することを目的とし、GFP標識PKC各サブタイプを脳部位特異的に発現するTet制御システム遺伝子導不動物を用いて、神経可塑性(特にLTP、LTD)におけるこれらリン酸化酵素各サブタイプの時間的・空間的動態を電気生理学的現象と同時に解析することを試みた。同時に、PKC, DGキナーゼそれぞれ複数のサブタイプに焦点をあて、それらを波長の異なる2種類の蛍光タンパク質で標識し、発現させ、生細胞で同時に可視化し、リン酸化酵素群のクロストークを解析した。 【結果】PKCおよびDGKの神経における働き、特に神経可塑性におけるこれらリン酸化酵素のクロストークをライブイメージングし、解析を行った。その成果として、1)PKCによる基質タンパク質のリン酸化にはPKCのターゲティングが必須であること、2)DGKがPKCのターゲティングのスィッチオフに深く関与すること、3)FRETを用いた解析により、DGKとPKCが直接結合すること、を明らかにし、また、4)tTA・TetOPシステムを用いて、小脳プルキンエ細胞、海馬錐体細胞などにGFP標識各PKCサブタイプを発現誘導可能なマウスの作製に成功した。作製したGFP標識PKC発現トランスジェニックマウスの脳スライスを用いて、PKCターゲティングを観察した結果、脳スライスにおけるPKCターゲティングは、培養細胞あるいは初代培養神経細胞におけるターゲティングと異なっている事が明らかとなった。 また、PKCターゲティング機構の分子メカニズムおよびその生理的意義を明らかにするために種々の脂質シグナルによるPKCターゲティングを解析した。その結果、deltaPKCは、セラミドの刺激によって特異的にゴルジ体にターゲティングし、同時にチロシンリン酸化によって活性化されることを示した。このセラミドによるdeltaPKCの活性化機構は、ホルボールエステルにより細胞膜へのトランスロケーションを伴う活性化機構とは全く異なっており、それにより導かれる細胞応答ち異なっていた。つまり、HeLa細胞においては、セラミドは細胞のアポトーシスを引き起こすのに対して、ホルボールエステルはG2/M期での停止を起こした。このように、同一のPKCサブタイプであっても、ターゲティング部位の違いによって、明らかに異なる細胞反応を引き起こすことから、PKCターゲティング機構の重要性が明らかにされた。


• 可視化システムを用いたプロテインキナーゼCのターゲティング機構の解析

  白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 奨励研究(A), 神戸大学, 1999年 - 2000年

  本研究は、「PKCの多様なタ一ゲッティングを調節する機構を分子レベルで解明すること」を目的としている。本年度は、計画1(ターゲッティングに関与するepsilon PKC分子内ドメインの決定)に焦点を絞り実験を行った。実際には、蛍光蛋白質で標識したepsilon PKCの変異体を作製し、ホルボールエステルと、各脂肪酸によるトランスロケーション様式を解析した。その結果、ステアリン酸による細胞質膜ヘのトランスロケーションには、疑似基質領域付近とClBドメインが重要であるのに対して、アラキドン酸やリノール酸によるゴルジ体へのトランスロケーションにはClBドメインが必須であることを明らかにした。また、このClBドメインをCHO-K1細胞内に発現させるとゴルジ体に集積することから、このドメイン内にゴルジ体と相互作用する部位が存在することも明らかにした。一方、TPAによる細胞質膜への不可逆的なトランスロケーションには、C1BドメインとClAドメインが関与しており、このうち主にClBドメインが重要であることが明らかになった。さらに、脂肪酸などの脂質シグナルとそれを産生するホスホリパーゼA2が、受容体を介したPKCのトランスロケーションに関与していることを明らかにし、Journal of Cell Scienceに報告した。今後、このC1Bドメインを中心として、計画2(脂質シグナルとPKCとの結合様式の解析)と計画3(ゴルジ体において、epsilon PKCと結合する分子の同定)を進めていく予定である。


• プロテインキナーゼCサブタイプの活性化とターゲッティング機構の関連に関する研究

  斎藤 尚亮, 白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 特定領域研究(A), 神戸大学, 1998年 - 1998年

  プロテインキナーゼC(PKC)のtranslocation(ターゲッティング)機構を解析することにより、PKC各分子種の生理的な役割について解析した。我々はGFP(Green fluorescent protein)とラット各PKC分子種(γ-,.ε-,δ-PKC)の融合蛋白質を各種培養細胞に発現させ、細胞外刺激により活性化された生細胞内のPKCの細胞内の動態の観察を行った。その結果、 1)γ-,δ-,ε-PKCすべでが、G蛋白質共役型ATP受容体刺激により、20sec以内に細胞膜にtranslocationし、3min以内に元の状態に戻る(Retranslocation)。しかし、ホルボールエステル刺激によっては、すべての分子種が比較的ゆっりくりと(3-5min)ranslocationし、そのまま膜にとどまる。つまり、同一の分子種であっても、刺激により異なるターゲッティング機構を持つことが示された。 2)アラキドン酸刺激により、γ-PKCは素早く細胞膜に、ε-PKCはややゆっくりとGolgi体周辺にtranslocationするのに対して、δ-PKCはtranslocationしない。つまり、同一の刺激によっても分子種によってtargeting部位(translocation)は異なることが示された。 3)δ-PKCを活性化する3種の刺激(ATP,TPA,H202)は、それぞれ異なるターゲッティング機構によるものであり、細胞の機能に対する調節機構も異なると推測される。以上の結果から、PKCのターゲッティング機構は、分子種特異的、刺激特異的でありしかも時間的、空間的にも異なっていることが示され、ターゲッティング機構の解析はPKC分子種独自の機能の解明に有力な方法と考えられた。


• GFP標識プロテインキナーゼC遺伝子改変マウスの作製とその神経可塑性研究への応用

  斎藤 尚亮, 白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 特定領域研究(A), 神戸大学, 1998年 - 1998年

  本研究では、培養細胞系を用いて、各PKCサブタイプ特異的なターゲッティング機構を生細胞内で明らかにするとともに、長期増強や長期抑圧現象におけるPKCの細胞内動態を解析することにより、PKCのシナプス可塑性における働きを明らかにすることを目的とした。そのために、1)培養細胞系におけるGFP標識PKC各分子種のトランスロケーション現象と活性化機構の関連についての解析、2)GFP標識PKCトランスジェニックマウスの作製の試みを行った。その結果、1)γ-,δ-,ε-PKCすべてが、G蛋白質共役型ATP受容体刺激により、20sec以内に細胞膜にtranslocationし、3min以内に元の状態に戻る(Retranslocation)。しかし、ホルボールエステル刺激によっては、すべての分子種が比較的ゆっくりと(3-5min)ranslocationし、そのまま膜にとどまる。つまり、同一の分子種であっても、刺激により異なるターゲッティング機構を持つことが示された。2)アラキドン酸刺激により、γ-PKCは素早く細胞膜に、ε-PKCはややゆっくりとGolgi体周辺にtranslocationするのに対して、δ-PKCはtranslocationしない。つまり、同一の刺激によっても分子種によってtargeting部位(translocation)は異なることが示された。3)δ-PKCを活性化する3種の刺激(ATP,TPA,H202)は、それぞれ異なるターゲッティング機構によるものであり、細胞の機能に対する調節機構も異なると推測される。 以上の結果から、PKCのターゲッティング機構は、分子種特異的、刺激特異的でありしかも時間的、空間的にも異なっていることが示され、ターゲッティング機構の解析はPKC分子種独自の機能の解明に有力な方法と考えられた。


• セロトニントランスポーターの発現調節機構と感情障害の関係する研究

  斎藤 尚亮, 酒井 規雄, 白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 基盤研究(C), 神戸大学, 1997年 - 1998年

  本研究では、感情障害の原因とも考えられているセロトニントランスポーター(SET)に注目し、SET機能の制御機構と病態との関連の解明を目的とした。SETの生理機能を解析するために、まず、リン酸化、脱リン酸化によってSETの機能がどのように修飾されるかを検討した。SET活性は、PKCの活性化、あるいはフォスファターゼ1および2Aの阻害剤であるカリクリンAにより抑制された。これらの事実により、SET活性はリン酸化、脱リン酸化のバランスによって制御されていることが示された。この制御はSETのセロトニンに対する親和性には影響を与えず、最大取り込み速度の抑制によることが示された。site-diretednutagenesis法を用いた実験により、このSET機能の抑制は、リン酸化酵素によるSETの直接のリン酸化によるものではなく、細胞骨格蛋白質のリン酸化による間接的な抑制作用である可能性が示唆された。また、SET抗体を用いた免疫電顕法によって、SETは神経終末およびnerve fiberのvaricosity内の小胞に存在することが明らかになった。さらに、インターフェロン治療における大きな問題であるうつ病の発症の機序について、SET遺伝子発現の制御機構の解析を行った結果、1)インターフェロンによるSETの転写の促進、2)SET蛋白の増加による神経終末でのセロトニン取り込みの上昇、3)セロトニン神経伝達の抑制、という病態が考えられた。以上、SETの調節機構と感情障害の関連について、蛋白質修飾レベル、および遺伝子発現レベルでの解析を終了し、セロトニントランスポーターの生理的意義の解明に向けた研究を行う要件を整えることが出来た。今後、本研究により達成された成果に基づき、セロトニントランスポーターの機能異常と病態の関連および、それに対する薬剤開発の道を拓く研究を行うことを計画している。


• 蛍光標識プロテインキナーゼCの遺伝子改変マウスの作製とその神経可塑性研究への応用

  斎藤 尚亮, 白井 康仁, 酒井 規雄

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 重点領域研究, 神戸大学, 1997年 - 1997年

  本研究は、長期増強、長期抑圧現象におけるプロテインキナーゼC(PKC)分子種の役割を明らかにすることを目的とし、PKC各分子種のトランスロケーション現象の解析を行い、活性化型PKCとリン酸化基質の空間的関係を形態学的に解析することを目的とした。本年度は神経系に多く存在するPKC分子種のうち、シナプス後部に存在するγ-分子種に焦点を当て研究を行った。γ-PKCにGFP融合した蛋白質を細胞に発現させ、コンフォーカル顕微鏡下でGFP蛍光を指標として種々の細胞外刺激によるPKCの細胞内動態を経時的に記録した。刺激後のGFP蛍光の局在は、免疫蛍光染色によるそれぞれのPKC分子種の局在と一致しており、また、Immunoblotによってもγ-PKC-GFPの分解産物が認められなかったことから、経時的に観察したGFP蛍光はPKC自体の動態をあらわすものと考えられた。また、酵素学的な解析によりγ-PKC-GFPもγ-PKCと同様の酵素学的特性を持つことが明らかとなり、GFPの融合によってもγ-PKCの特性には影響が少ないと考えられた。このGFP融合PKC分子種を用いて1)TPAによるtranslocationは比較的遅い時間経過で起こり、irreversibleであった、2)CaイオンによるtranslocationおよびG蛋白質結合型受容体の刺激によるtranslocationも20sec以内に細胞膜にtranslocationし、3min以内に元の状態に戻る速くreversibleなものであった。また、site-directed mutagenesisを用いた実験により、受容体の刺激によるtranslocationには、Caイオン、C2 domainは必須であるが、TPAによるtranslocationには、Caion,C2 domainは必須ではないことが明らかになった。


• Na^+/Cl^-依存性トランスポーターの分子間相互作用と機能協関する蛋白質の検索

  斎藤 尚亮, 白井 康仁, 酒井 規雄

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 重点領域研究, 神戸大学, 1997年 - 1997年

  本研究では、Na^+/Cl^-依存性トランスポーターの一種であり、感情障害の原因とも考えられているセロトニントランスポーター(SET)に注目し、SETと結合し機能協関する蛋白質の検索と機能解析を目的とした。SETの生理機能を解析するために、まず、リン酸化、脱リン酸化によってSETの機能がどのように修飾されるかを検討した。SET活性は、PKCの活性化により有意に抑制され、その抑制はリン酸化酵素阻害薬によって完全に阻害された。また、不活性型のホルボールエステルはこのような抑制効果を示さなかった。また、フォスファターゼ1および2Aの阻害剤であるカリクリンAも同様にSET活性を抑制し、そのカリクリンによる抑制もリン酸化酵素阻害薬によって阻害された。これらの事実により、SET活性はリン酸化、脱リン酸化のバランスによって制御されていることが示された。Eadie-Hofstee解析により、このTPAやCLAによる制御はSETのセロトニンに対する親和性には影響を与えず、最大取り込み速度の抑制によることが示された。このプロテインキナーゼCによるリン酸化が、直接のリン酸化によるものであるかどうかを検討するために、site-directed mutagenesisを用いて、5カ所のリン酸化されうると推定されるそれぞれのセリンあるいはトレオニン残基を変異させた変異体を作製し、リン酸化、脱リン酸化の影響を検討した。その結果、すべてのリン酸化されうる部位を変異させても、TPA、CLAの効果が認められ、少なくともこの5カ所は直接リン酸化されないことが明らかになった。これらの結果から、SETはリン酸化・脱リン酸化酵素によって、間接的に制御されておいることが示唆された。今後、その間接的な制御機構を分子レベレで解明するためにSET結合蛋白の単離を行う予定である。


• カイコ前胸腺刺激ホルモン分泌におけるリン酸化タンパク質の解析

  白井 康仁

  日本学術振興会, 科学研究費助成事業, 奨励研究(A), 神戸大学, 1995年 - 1995年

  アセチルコリンが誘起する前胸腺刺激ホルモン分泌(PTTH)において、特異的にリン酸化される3種(32k,25k21k)の蛋白質の機能を解明する研究の一環として、カイコ脳-側心体-アラタ体複合器官(Br-CC-CA)における低分子量G蛋白質を検索し、その分子特性並びに細胞内局在性をリン酸化蛋白質のそれと比較した。 その結果、Br-CC-CA中に3種(28k,25k,21k)の低分子量G蛋白質を見いだした。このうち、カイコ25kG蛋白質は、哺乳類の低分子量G蛋白質であるRab3Aに対する抗体に交叉性を示したが、他のカイコ低分子量G蛋白質は、哺乳類の低分子量G蛋白質に対するどの抗体とも交叉性を示さなかった。ついで、Rab3A抗体を用いてカイコ25kG蛋白質の組織局在性を調べたところ、脳及び食道下神経節に多量に存在している事が明らかになった。この知見は、Rab3Aが哺乳類において神経特異的に発現している事実と類似していた。一方、PTTH分泌においてリン酸化される蛋白質とカイコ低分子量G蛋白質の細胞内局在性を調べたところ、共に側心体一アラタ体より調製した粗シナプトソーム画分に存在した。 以上、分子量並びにその細胞内局在性が一致することから、PTTH分泌においてリン酸化される25kリン酸化蛋白質はRab3Aと相同性を有する低分子量G蛋白質であり、21kリン酸化蛋白質は新規な低分子量G蛋白質であることが示唆された。現在、2次元電気泳動を駆使して、両リン酸化蛋白質が真に低分子量G蛋白質であるか否かを詳細に検討している。また、32kリン酸化蛋白質に機能については、今後の研究課題として残された。