研究者紹介システム

入子 英幸
イリコ ヒデユキ
大学院保健学研究科 保健学専攻
准教授
医学
Last Updated :2020/06/04

研究者情報

所属

  • 【主配置】

    大学院保健学研究科 保健学専攻
  • 【配置】

    医学部 保健学科, 数理・データサイエンスセンター

学位

  • 博士(学術), 麻布大学

授業科目

ジャンル

  • 医療・健康 / 臨床医学

コメントテーマ

  • 寄生虫学
  • マラリア

研究活動

研究キーワード

  • Malaria
  • Parasitology (including Medical Zoology)
  • マラリア
  • 寄生虫学
  • 寄生虫

研究分野

  • ライフサイエンス / 寄生虫学

論文

  • Tomoko Ishino, Mayumi Tachibana, Minami Baba, Hideyuki Iriko, Takafumi Tsuboi, Motomi Torii

    Plasmodium parasites cause malaria in mammalian hosts and are transmitted by Anopheles mosquitoes. Gametocytes, which differentiate from asexual-stage parasites, are activated by environmental changes when ingested into the mosquito midgut, and are rapidly released from erythrocytes prior to fertilization. Secretory proteins localized to osmiophilic bodies (OBs), organelles unique to gametocytes, have been reported to be involved in female gametocyte egress. In this study, we investigate the dynamics of OBs in activated gametocytes of Plasmodium falciparum and Plasmodium yoelii using the female OB-specific marker protein, G377. After activation, female gametocyte OBs migrate to the parasite surface and fuse to form large vesicles beneath the parasite plasma membrane. At the marginal region of female gametocytes, fused vesicles secrete contents by exocytosis into the parasitophorous vacuole space, prior to parasite egress via the break-down of the erythrocyte membrane. This is the first detailed description of how proteins are transported through osmiophilic bodies.

    2020年01月22日, Molecular and biochemical parasitology, 236, 111261 - 111261, 英語, 国際誌

    [査読有り]

  • Plasmodium RON12 localizes to the rhoptry body in sporozoites.

    Oda-Yokouchi Y, Tachibana M, Iriko H, Torii M, Ishino T, Tsuboi T

    2019年02月, Parasitol Int., 68 (1), 17 - 23, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Skeleton binding protein 1 (SBP1) of Plasmodium falciparum accumulates in electron-dense material before passing through the parasitophorous vacuole membrane.

    Iriko H, Ishino T, Tachibana M, Omoda A, Torii M, Tsuboi T

    2019年, 2019 Nov 13;75:102003. doi: 1, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Dibothriocephalus nihonkaiensis infection identified by pathological and genetic analyses -a case report and a recent literature review of human diphyllobothriasis

    Yoshitane Tsukamoto, IRIKO HIDEYUKI, Shohei Matsuo, Yoshihiro Shimono, Junichi Miyazaki, Hironori Tanaka, Toshiya Komatsu, Seiji Azuma, Hiroko Oota, Yui Yamashita, Mizuka Ohkouchi, Yuka Hashikura, Seiichi Hirota

    2019年, Human Pathology: Case Reports, 16, 1 - 5, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Plasmodium falciparum Exported Protein 1 is localized to dense granules in merozoites.

    Iriko H, Ishino T, Otsuki H, Ito D, Tachibana M, Torii M, Tsuboi T

    2018年06月, Parasitol Int., 67 (5), 637 - 639, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Antibodies against a Plasmodium falciparum RON12 inhibit merozoite invasion into erythrocytes

    Ito D, Takashima E, Yamasaki T, Hatano S, Hasegawa T, Miura K, Morita M, Thongkukiatkul A, Diakite M, Long C, Prachumsri J, Udomsangpetch R, Iriko H, Ishino T, Tsuboi T

    2018年, Parasitol Int, [Epub ahead of print], 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Hasan I, Watanabe M, Ishizaki N, Sugita-Konishi Y, Kawakami Y, Suzuki J, Dogasaki C, Rajia S, Kawsar SM, Koide Y, Kanaly RA, Sugawara S, Hosono M, Ogawa Y, Fujii Y, Iriko H, Hamako J, Matsui T, Ozeki Y

    2016年01月, Molecules (Basel, Switzerland), 21 (1), 129

    [査読有り]

  • Mayumi Tachibana, Nantavadee Suwanabun, Osamu Kaneko, Hideyuki Iriko, Hitoshi Otsuki, Jetsumon Sattabongkot, Akira Kaneko, Socrates Herrera, Motomi Torii, Takafumi Tsuboi

    Malaria transmission-blocking vaccines (TBV) aim to interfere with the development of the malaria parasite in the mosquito vector, and thus prevent spread of transmission in a community. To date three TBV candidates have been identified in Plasmodium vivax; namely, the gametocyte/gamete protein Pvs230, and the ookinete surface proteins Pvs25 and Pvs28. The Plasmodium falciparum gametocyte/gamete stage proteins Pfs48/45 and Pfs47 have been studied as TBV candidates, and Pfs48/45 shown to induce transmission-blocking antibodies, but the candidacy of their orthologs in P. vivax, Pvs48/45 (PVX_083235) and Pvs47 (PVX_083240), for vivax TBV have not been tested. Herein we investigated whether targeting Pvs48/45 and Pvs47 can inhibit parasite transmission to mosquitoes, using P. vivax isolates obtained in Thailand. Mouse antisera directed against the products from plasmids expressing Pvs48/45 and Pvs47 detected proteins of approximately 45- and 40-kDa, respectively, in the P. vivax gametocyte lysate, by Western blot analysis under non-reducing conditions. In immunofluorescence assays Pvs48/45 was detected predominantly on the surface and Pvs47 was detected in the cytoplasm of gametocytes. Membrane feeding transmission assays demonstrated that anti-Pvs48/45 and -Pvs47 mouse sera significantly reduced the number of P. vivax oocysts developing in the mosquito midgut. Limited amino acid polymorphism of these proteins was observed among 27 P. vivax isolates obtained from Thailand, Vanuatu, and Colombia; suggesting that polymorphism may not be an impediment for the utilization of Pvs48/45 and Pvs47 as TBV antigens. In one Thai isolate we found that the fourth cysteine residue in the Pvs47 cysteine-rich domain (CRD) III (amino acid position 337) is substituted to phenylalanine. However, antibodies targeting Pvs47 CRDI-Ill showed a significant transmission-reducing activity against this isolate, suggesting that this substitution in Pvs47 was not critical for recognition by the generated antibodies. In conclusion, our results indicate that Pvs48/45 and Pvs47 are potential transmission-blocking vaccine candidates of P. vivax. (C) 2015 Elsevier Ltd. All rights reserved.

    ELSEVIER SCI LTD, 2015年04月, VACCINE, 33 (16), 1901 - 1908, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Joao C. Aguiar, Jessica Bolton, Joyce Wanga, John B. Sacci, Hideyuki Iriko, Julie K. Mazeika, Eun-Taek Han, Keith Limbach, Noelle B. Patterson, Martha Sedegah, Ann-Marie Cruz, Takafumi Tsuboi, Stephen L. Hoffman, Daniel Carucci, Michael R. Hollingdale, Eileen D. Villasante, Thomas L. Richie

    Background Nearly 100% protection against malaria infection can be achieved in humans by immunization with P. falciparum radiation-attenuated sporozoites (RAS). Although it is thought that protection is mediated by T cell and antibody responses, only a few of the many pre-erythrocytic (sporozoite and liver stage) antigens that are targeted by these responses have been identified. Methodology Twenty seven P. falciparum pre-erythrocytic antigens were selected using bioinformatics analysis and expression databases and were expressed in a wheat germ cell-free protein expression system. Recombinant proteins were recognized by plasma from RAS-immunized subjects, and 21 induced detectable antibody responses in mice and rabbit and sera from these immunized animals were used to characterize these antigens. All 21 proteins localized to the sporozoite: five localized to the surface, seven localized to the micronemes, cytoplasm, endoplasmic reticulum or nucleus, two localized to the surface and cytoplasm, and seven remain undetermined. PBMC from RAS-immunized volunteers elicited positive ex vivo or cultured ELISpot responses against peptides from 20 of the 21 antigens. Conclusions These T cell and antibody responses support our approach of using reagents from RAS-immunized subjects to screen potential vaccine antigens, and have led to the identification of a panel of novel P. falciparum antigens. These results provide evidence to further evaluate these antigens as vaccine candidates.

    PUBLIC LIBRARY SCIENCE, 2015年08月, PLOS ONE, 10 (8), 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Imtiaj Hasan, Miharu Watanabe, Naoto Ishizaki, Yoshiko Sugita-Konishi, Yasushi Kawakami, Jun Suzuki, Chikaku Dogasaki, Sultana Rajia, Sarkar M. A. Kawsar, Yasuhiro Koide, Robert A. Kanaly, Shigeki Sugawara, Masahiro Hosono, Yukiko Ogawa, Yuki Fujii, Hideyuki Iriko, Jiharu Hamako, Taei Matsui, Yasuhiro Ozeki

    A specific galactose-binding lectin was shown to inhibit the hemolytic effect of streptolysin O (SLO), an exotoxin produced by Streptococcus pyogenes. Commercially available lectins that recognize N-acetyllactosamine (ECA), T-antigen (PNA), and Tn-antigen (ABA) agglutinated rabbit erythrocytes, but had no effect on SLO-induced hemolysis. In contrast, SLO-induced hemolysis was inhibited by AKL, a lectin purified from sea hare (Aplysia kurodai) eggs that recognizes a-galactoside oligosaccharides. This inhibitory effect was blocked by the co-presence of D-galactose, which binds to AKL. A possible explanation for these findings is that cholesterol-enriched microdomains containing glycosphingolipids in the erythrocyte membrane become occupied by tightly stacked lectin molecules, blocking the interaction between cholesterol and SLO that would otherwise result in penetration of the membrane. Growth of S. pyogenes was inhibited by lectins from a marine invertebrate (AKL) and a mushroom (ABA), but was promoted by a plant lectin (ECA). Both these inhibitory and promoting effects were blocked by co-presence of galactose in the culture medium. Our findings demonstrate the importance of glycans and lectins in regulating mechanisms of toxicity, creation of pores in the target cell membrane, and bacterial growth.

    MDPI AG, 2014年09月, MOLECULES, 19 (9), 13990 - 14003, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Natural infection of Plasmodium falciparum induces inhibitory antibodies against gametocyte development in human hosts.

    Tonwong N, Sattabongkot J, Tsuboi T, Iriko H, Takeo S, Sirichaisinthop J, Udomsangpetch R

    2012年, Jpn J Infect Dis, 65 (2), 152 - 156, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Mayumi Tachibana, Yimin Wu, Hideyuki Iriko, Olga Muratova, Nicholas J. MacDonald, Jetsumon Sattabongkot, Satoru Takeo, Hitoshi Otsuki, Motomi Torii, Takafumi Tsuboi

    The aim of a malaria transmission-blocking vaccine is to block the development of malaria parasites in the mosquito and thus prevent subsequent infection of the human host. Previous studies have demonstrated that the gametocyte/gamete surface protein Pfs230 can induce transmission-blocking immunity and have evaluated Escherichia coli-produced Pfs230 as a transmission-blocking vaccine candidate. In this study, we used the wheat germ cell-free expression system to produce N-terminal fragments of Pfs230 and evaluated the transmission-blocking activity of antisera raised against the recombinant Pfs230 protein. The rabbit antisera reacted to the surface of cultured gametocytes and gametes of the Plasmodium falciparum NF54 line, recognized the 360-kDa form of parasite-produced Pfs230 by Western blot assay, and reduced the infectivity of NF54 parasites to Anopheles stefensi mosquitoes in the presence of complement in a standard membrane feeding assay. Thus, our data demonstrate that the N-terminal pro domain of Pfs230 is sufficient to induce complement-dependent transmission-blocking activity against P. falciparum.

    AMER SOC MICROBIOLOGY, 2011年08月, CLINICAL AND VACCINE IMMUNOLOGY, 18 (8), 1343 - 1350, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Otsuki H, Kaneko O, Thongkukiatkul A, Tachibana M, Iriko H, Takeo S, Tsuboi T, Torii M

    2009年, Proc Natl Acad Sci U S A, 106 (17), 7167 - 7172, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Helminth Infections Prevent Autoimmune Diseases through Th2-Type Immune Response

    Soji Fukumoto, Hideyuki Iriko, Hitoshi Otsuki

    Helminth parasites are known to elicit the immune response towards T helper 2 (Th2)type, characterized by Th2 related cytokines, that typically include interleukin-4 (IL4), IL-5 and IL-13. In this review we will describe the mechanisms involved in helminth induced Th2 immune response. Intestinal epithelial cells (IECs) produce thymic stromal lymphopoietin (TSLP), which is both necessary and sufficient for the initiation of Th2 cytokine-driven inflammation. IL-33 mRNA is expressed early during parasite infection and IL-33 binds ST2 receptor, both of which are associated with optimal CD4(+) Th2 polarization. Following innate immune cell recognition, basophils and mast cell can secrete Th2 type cytokines that are thought to contribute to CD4(+) Th2 differentiation. Additionaly, dendritic cell conditioned with some helminth products can promote CD4(+) Th2 differentiation. Alternatively activated macrophages, activated by the Th2 cytokines IL-4 and IL-13 in parasitic infections, contribute to the host protective response: control of Th1-type inflammation, wound healing and worm expulsion. Experimentally, helminths have been associated with protection against a number of autoimmune disorders, including inflammatory bowel diseases and type 1 diabetes. It may be a novel strategy to ameliorate autoimmune inflammation by expanding and activating the Th2 response originated from parasites.

    TOTTORI UNIV, FACULTY MEDICINE, 2009年09月, YONAGO ACTA MEDICA, 52 (3), 95 - 104, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Hideyuki Iriko, Ling Jin, Osamu Kaneko, Satoru Takeo, Eun-Taek Han, Mayumi Tachibana, Hitoshi Otsuki, Motomi Torii, Takafumi Tsuboi

    During the last decade transcriptome analyses demonstrated that alternative splicing plays an important role to generate a large number of mRNA and protein isoforms from a limited number of genes. However, the frequency of the alternative splicing dramatically Varies among living organisms. For example, 35-65% of human genes are involved in alternative splicing, whereas only a few are reported for unicellular organism yeast. Alternative splicing has been observed for several genes in the deadliest malaria parasite Plasmodium falciparum, but the frequency and the type were not systematically analyzed so far. In this study, we determined partial cDNA sequences for 88 open reading frames surrounding 246 introns in P falciparum which were transcribed at schizont and gametocyte stages, and observed 15 instances of alternative splicing within a total of 14 gene transcripts, 16% of the analyzed genes. Among 5 basic splicing patterns, alternative 5' and 3' splicing, and intron retention were detected. Alternative splicing in 7 open reading frames had effects on the domain architectures of the gene products, which might result in modifying the cellular localization and function of these products. (C) 2009 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved.

    ELSEVIER IRELAND LTD, 2009年06月, PARASITOLOGY INTERNATIONAL, 58 (2), 196 - 199, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Expression of malaria vaccine candidates using a wheat germ cell-free protein synthesis system without codon optimisation.

    Tsuboi Takafumi, Takeo Satoru, Iriko Hideyuki, Jin Ling, Tsuchimochi Masateru, Matsuda Shusaku, Han Eun-Taek, Otsuki Hitoshi, Kaneko Osamu, Sattabongkot Jetsumon, Udomsangpetch Rachanee, Sawasaki Tatsuya, Torii Motomi, Endo Yaeta

    2008年01月, INTERNATIONAL JOURNAL FOR PARASITOLOGY, 38, S77

    [査読有り]

  • Tsuboi T, Takeo S, Iriko H, Jin L, Tsuchimochi M, Matsuda S, Han ET, Otsuki H, Kaneko O, Sattabongkot J, Udomsangpetch R, Sawasaki T, Torii M, Endo Y

    2008年, Infect Immun., 76 (4), 1702 - 1708, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Iriko H, Kaneko O, Otsuki H, Tsuboi T, Su XZ, Tanabe K, Torii M

    2008年, Mol Biochem Parasitol., 158 (1), 11 - 21, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Eun-Taek Han, Risa Watanabe, Jetsumon Sattabongkot, Benjawan Khuntirat, Jeeraphat Sirichaisinthop, Hideyuki Iriko, Ling Jin, Satoru Takeo, Takafumi Tsuboi

    Loop-mediated isothermal amplification (LAMP), a novel nucleic acid amplification method, was developed for the clinical detection of four species of human malaria parasites: Plasmodium falciparum, P. vivax, P. malariae, and P. ovate. We evaluated the sensitivity and specificity of LAMP in comparison with the results of microscopic examination and nested PCR. LAMP showed a detection limit (analytical sensitivity) of 10 copies of the target 18S rRNA genes for P. malariae and P. ovate and 100 copies for the genus Plasmodium, P. falciparum, and P. vivax. LAMP detected malaria parasites in 67 of 68 microscopically positive blood samples (sensitivity, 98.5%) and 3 of 53 microscopically negative samples (specificity, 94.3%), in good agreement with the results of nested PCR. The LAMP reactions yielded results within about 26 min, on average, for detection of the genus Plasmodium, 32 min for P. falciparum, 31 min for P. vivax, 35 min for P. malariae, and 36 min for P. ovate. Accordingly, in comparison to the results obtained by microscopy, LAMP had a similar sensitivity and a greater specificity and LAMP yielded results similar to those of nested PCR in a shorter turnaround time. Because it can be performed with a simple technology, i.e., with heat-treated blood as the template, reaction in a water bath, and inspection of the results by the naked eye because of the use of a fluorescent dye, LAMP may provide a simple and reliable test for routine screening for malaria parasites in both clinical laboratories and malaria clinics in areas where malaria is endemic.

    AMER SOC MICROBIOLOGY, 2007年08月, JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, 45 (8), 2521 - 2528, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • コムギ胚芽無細胞タンパク質合成法:マラリアワクチン研究への応用

    坪井 敬文, 竹尾 暁, 入子 英幸, 金子 修, 鳥居 本美, 遠藤 弥重太

    2007年, 愛媛医学, 26, 8 - 11, 日本語

    [査読有り]

    研究論文(大学,研究機関等紀要)

  • Osamu Kaneko, Thomas J. Templeton, Hideyuki Iriko, Mayumi Tachibana, Hitoshi Otsuki, Satoru Takeo, Jetsumon Sattabongkot, Motomi Torii, Takafumi Tsuboi

    The Plasmodium circumsporozoite protein/thrombospondin-related anonymous protein-related protein (CTRP) is expressed at the mosquito midgut ookinete stage and is considered to be a transmission-blocking vaccine candidate. CTRP is composed of multiple von Willebrand factor A (vWA) and thrombospondin type I domains in the extracellular portion of the molecule, and a short acidic cytoplasmic domain that interacts with the actomyosin machinery. As a means to predict functionally relevant domains within CTRP we determined the nucleotide sequences of CTRP from the Plasmodium vivax Sall and the Plasmodium yoelii 17XL strains and characterized the conservation of domain architectures and motifs across Plasmodium genera. Sequence alignments indicate that the CTRP 1st to 4th vWA domains exhibit greater conservation, and thereby are perhaps functionally more important than the 5th and 6th domains. This point should be considered for the development of a transmission-blocking vaccine that includes CTRP recombinant subunit. To complement previous cellular studies on CTRP, we further determined the expression and cellular localization of CTRP protein in R vivax and P. yoelii. (c) 2006 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved.

    ELSEVIER IRELAND LTD, 2006年09月, PARASITOLOGY INTERNATIONAL, 55 (3), 227 - 231, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Screening of novel malaria transmission-blocking vaccine candidates using wheat germ cell-free protein synthesis system

    Hideyuki Iriko, Satoru Takeo, Ling Jin, Osamu Kaneko, Motomi Torii, Jetsumon Sattabongkot, Sanjay Singh, Tatsuya Sawasaki, Yaeta Endo, Takafumi Tsuboi

    AMER SOC TROP MED & HYGIENE, 2005年12月, AMERICAN JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE AND HYGIENE, 73 (6), 292 - 292, 英語

    [査読有り]

  • Wheat germ cell-free system: A powerful tool to identify novel vaccine candidates based on the Plasmodium Falciparum genome database

    Takafumi Tsuboi, Satoru Takeo, Hideyuki Iriko, Ling Jin, Eun-Taek Han, Osamu Kaneko, Jetsumon Sattabongkot, Rachanee Udomsangpetch, Tatsuya Sawasaki, Motomi Torii, Yaeta Endo

    AMER SOC TROP MED & HYGIENE, 2005年12月, AMERICAN JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE AND HYGIENE, 73 (6), 338 - 338, 英語

    [査読有り]

  • O Kaneko, BYSY Lim, H Iriko, IT Ling, H Otsuki, M Grainger, T Tsuboi, JH Adams, D Mattei, AA Holder, M Torii

    The Plasmodium falciparum high molecular mass rhoptry protein (`PfRhopH') complex is important for parasite growth and comprises three distinct gene products: RhopH1, RhopH2 and RhopH3. We have previously shown that P. falciparum RhopH1 is encoded by either PFC0110w (clag3.2) or PFC0120w (clag3.1), members of the previously-named clag (cytoadherence-linked asexual gene) multigene family. In this report, we have further characterized rhoph1/clag members in terms of gene structure, transcription and protein expression. The cDNA sequences for all five rhoph1/clag members were determined, confirming previous in silico predictions of intron-exon boundaries. All member genes were transcribed in HB3 and 3D7 parasite lines, but clag3.2 was not transcribed in Dd2 parasites. The peak abundance of transcripts for all genes was observed during the late schizont stage. Antisera specific to Clag2 and Clag3.1 localized these proteins to the apical end of merozoites in segmented schizonts, and both proteins are found to be components of the PfRhopH complex. PfRhopH complex that was immunoprecipitated with anti-Clag9 antibody contained neither Clag2 nor Clag3.1, thereby suggesting that PfRhopH complexes contain only individual rhoph1/clag gene products. Since the PfRhopH complex binds the erythrocyte surface, and RhopH2 and RhopH3 are encoded by single copy genes, the RhopH1/Clag proteins may serve to confer some degree of specificity to the roles of the individual complexes. (c) 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.

    ELSEVIER SCIENCE BV, 2005年09月, MOLECULAR AND BIOCHEMICAL PARASITOLOGY, 143 (1), 20 - 28, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • マラリア原虫の赤血球侵入に関わる多重遺伝子族

    金子 修, 大槻 均, 入子 英幸, 坪井 敬文, 鳥居 本美

    2003年, 愛媛医学, 22, 102 - 109, 日本語

    [査読有り]

    研究論文(大学,研究機関等紀要)

  • H Iriko, K Nakamura, H Kojima, N Iida-Tanaka, T Kasama, Y Kawakami, Ishizuka, I, A Uchida, Y Murata, Y Tamai

    Glycosphingolipids (GSLs) were purified from adults and plerocercoids of the tapeworm Diphyllobothrium hottai , and their chemical structures were determined. Total lipid fractions prepared from chloroform/methanol extracts of whole tissues were fractionated successively on ion-exchange chromatography, silicic acid column chromatography, and preparative TLC. The purified GSLs were characterized by methylation analysis, TLC-immunostaining, liquid secondary ion MS, MALDI-TOF MS, and (1) H-NMR. Ten GSLs were isolated from adult worms and four from plerocercoids, comprising mono-, di-, tri-, tetra-, and pentasaccharides. The GSL Galbeta1-4(Fucalpha1-3)Glcbeta1-3Galbeta1-Cer was found in adult worms but not in plerocercoids, whereas Galbeta1-4 (Fucalpha1-3)Glcbeta1-3(Galbeta1-6)Galbeta1-Cer was found in both adult worms and plerocercoids. We previously found a similar series of GSLs in plerocercoids of the cestode Spirometra erinaceieuropaei , and termed them 'spirometosides'[Kawakami, Y. et al . (1996) Eur J. Biochem . 239 , 905-911]. The core structure of spirometosides, Galbeta1-4Glcbeta1-3 Galbeta1-Cer, may have taxonomic significance, being characteristic of pseudophyllidean tapeworms. In the present study, GSL compositions were significantly different between adults and plerocercoids, and growth-dependent changes in composition were documented. We found a novel dihexosylceramide, Glcbeta1-3Galbeta1-Cer, which is a possible precursor for spirometosides. Immunohistochemical examination showed that spirometoside GSLs are highly enriched in the inner surface of bothria, the major point of contact between the adult worm and the host's intestine. Our findings indicate that spirometosides are involved in host-parasite interaction.

    BLACKWELL PUBLISHING LTD, 2002年07月, EUROPEAN JOURNAL OF BIOCHEMISTRY, 269 (14), 3549 - 3559, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

  • Yanagisawa M, Kojima H, Kawakami Y, Iriko H, Nakamura T, Nakamura K, Uchida A, Murata Y, Tamai Y

    1999年08月, Mol Biochem Parasitol., 102 (2), 225 - 235, 英語

    [査読有り]

    研究論文(学術雑誌)

MISC

  • 原虫・寄生虫検査に強くなろう- II 吸虫類 肺寄生、肝・胆道寄生、消化管寄生、門脈寄生

    大槻 均, 入子 英幸, 蓼本 早百合, 福本 宗嗣

    2013年, 臨床と微生物, 40 (3), 327 - 333, 日本語

    記事・総説・解説・論説等(学術雑誌)

  • 感染症症候群(第2版)-症候群から感染性単一疾患までを含めてー 上 病原体感染症編 VI. 原虫症, 吸虫症 <日本海裂頭条虫症, 広節裂頭条虫症>

    福本 宗嗣, 大槻 均, 入子 英幸, 蓼本 早百合

    2013年, 別冊日本臨床 新領域別症候群シリーズ, 24, 733 - 737, 日本語

    記事・総説・解説・論説等(学術雑誌)

  • Discovering novel blood stage malaria vaccine candidates: Screening with immune sera from falciparum malaria patients and asymptomatic parasite carriers

    Satoru Takeo, Ling Jin, Hirokazu Sakamoto, Eun-Taek Han, Hideyuki Iriko, Osamu Kaneko, Motomi Torii, Jetsumon Sattabongkot, Rachanee Udomsangpetch, Tatsuya Sawasaki, Yaeta Endo, Takafumi Tsuboi

    AMER SOC TROP MED & HYGIENE, 2006年11月, AMERICAN JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE AND HYGIENE, 75 (5), 302 - 302, 英語

    [査読有り]

    研究発表ペーパー・要旨(国際会議)

書籍等出版物

  • Glycosphingolipids in prendophyllidean tapeworms (共著)

    9th International Congress of Parasitology, 1998年

所属学協会

  • 日本生化学会

  • 日本寄生虫学会

共同研究・競争的資金等の研究課題

  • 三日熱マラリア伝搬阻止効果のある患者血漿を用いた新規ワクチン候補抗原の探索

    石野 智子, 橘 真由美, 馬場 みなみ, 鳥居 本美, 入子 英幸

    日本学術振興会, 科学研究費助成事業 国際共同研究加速基金(国際共同研究強化(B)), 国際共同研究加速基金(国際共同研究強化(B)), 愛媛大学, 2019年10月07日 - 2023年03月31日

  • 入子 英幸

    日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 神戸大学, 2016年04月01日 - 2019年03月31日, 研究代表者

    マラリア原虫は、赤血球侵入時に「寄生胞膜」と呼ばれる膜を形成する。この寄生胞膜は、宿主免疫応答・環境ストレスに対する障壁として機能するが、その一方で、栄養源であるヘモグロビンから原虫を隔離する。そのため、マラリア原虫は、サイトストームと呼ばれる特徴的な膜構造を形成し、ヘモグロビンを取り込み、代謝の場である食胞へと輸送する。本研究では、熱帯熱マラリア原虫の生殖母体期に着目し、ヘモグロビン輸送に関連する膜構造に局在する分子群を同定し、それらのヘモグロビン輸送における機能を明らかにすることを目的としている。本年度は、生殖母体期における寄生胞膜分子のプロファイリングを目的として、生殖母体期に発現するPfs16を指標として、間接蛍光抗体法により熱帯熱マラリア原虫の寄生胞膜分子4種類(ETRAMP4, 5, 10.2, 10.3)の発現及び局在を、無性生殖期と生殖母体間で比較した。これらの結果から、熱帯熱マラリア原虫の寄生胞膜を構成する分子は、生殖母体期に特有のもの(ETRAMP4, ETRAMP10.3)、無性生殖期と生殖母体期に共通のもの(ETRAMP10.2)、無性生殖期に特有のもの(ETRAMP5)に分類できることが明らかになった。マラリア原虫の無性生殖期に発現する赤血球侵入関連分子は、遺伝子欠損原虫の表現型が致死となるため解析が困難である。これに対し、生殖母体期に特異的に発現する分子群は、逆遺伝学的手法を用いた解析が可能である。現在、生殖母体期特異的に寄生胞膜に発現するETRAMP4, ETRAMP10.3に着目し、CRISPR-Cas9ゲノム編集システムを用いた遺伝子改変を試みている。

    競争的資金

  • 入子 英幸

    日本学術振興会, 科学研究費助成事業 若手研究(B), 若手研究(B), 2013年04月01日 - 2015年03月31日, 研究代表者

    マラリア原虫のヘモグロビン輸送機構を理解することを目的とし、ヘモグロビン代謝が活発なトロホゾイト期に発現する膜タンパク質ETRAMP4に着目し、免疫電顕法を用いた分子局在を解析した。ETRAMP4は、初期トロホゾイト期の寄生胞膜に局在し、ヘモグロビン輸送に関わる膜構造(サイトストーム、輸送小胞)に移行することから、マラリア原虫のヘモグロビン輸送の指標となることが明らかになった。

    競争的資金

  • 福本 宗嗣, 入子 英幸, 大槻 均

    日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 鳥取大学, 2009年 - 2011年

    マンソン裂頭条虫幼虫由来の免疫抑制因子(ES90)の遺伝子をクローニングし、コムギ胚芽の無細胞系で組換えタンパク質を作成したが、マクロファージのNO産生の抑制作用は認められなかった。一方、旋毛虫感染マウスの腹腔マクロファージでは、FIZZ, Ym1, arginaseなどの遺伝子発現が認められ、これに関連して2種類のPRXをクローニングした。Prx-1は発育ステージによって遺伝子発現に変化がみられた

  • 入子 英幸

    日本学術振興会, 科学研究費助成事業 若手研究(B), 若手研究(B), 鳥取大学, 2009年 - 2010年

    マラリア原虫は赤血球侵入時に寄生胞膜と呼ばれる膜を形成する。この寄生胞膜は、原虫-宿主間の物質輸送に深く関わるなど、原虫の寄生戦略において重要な役割を担っている。本研究では、寄生胞膜への移行シグナル配列の同定と寄生胞膜動態の解析を試みた。その結果、寄生胞膜の可視化に成功し、寄生胞膜の伸張および感染赤血球細胞質内の膜系(管小胞膜ネットワーク、サーキュラークレフト)の形成時期を特定した。

  • 福本 宗嗣, 入子 英幸

    日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(C), 基盤研究(C), 鳥取大学, 2007年 - 2008年

    マンソン裂頭条虫擬充尾虫(幼虫)由来の免疫抑制因子(ES90)のN末端と内部のアミノ酸配列に基づいてRT-PCR法でcDNAが増幅でき、クローニングの基礎試料が得られた。また、同じ幼虫由来の130kDaの免疫抑制因子(ES130)を精製した。ES130は活性化マクロファージが産生する3つのケモカイン(RANTES, MIP-2, IP-10)の遺伝子発現を抑制し、炎症や免疫応答の抑制への関与が推察された。

  • 新規熱帯熱マラリア伝搬阻止ワクチン抗原の網羅的な同定

    坪井 敬文, 竹尾 暁, 入子 英幸

    日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(B), 基盤研究(B), 愛媛大学, 2006年 - 2007年

    マラリア伝搬阻止ワクチンは、現在までわずかに4種類の候補分子が研究されてきたのみであり、未だ実用化に至っていない。そこで、ゲノムワイドに発現した熱帯熱マラリア原虫生殖母体期の組換えタンパク質を用いて、新規の熱帯熱マラリア伝搬阻止ワクチン抗原を同定することを目的に本研究を実施した。合計170種類のcDNAをクローニングし、網羅的な生殖母体特異的cDNAライブラリーを完成した。これらのcDNAを用いて合計148種類の熱帯熱マラリア原虫生殖母体タンパク質を、コムギ無細胞タンパク質合成法を用いて発現した。また、これらの生殖母体特異的組換えタンパク質を、熱帯熱マラリア伝搬阻止活性が認められている患者血清を用いて酵素抗体法によりスクリーニングしたところ、27種類の生殖母体タンパク質が抗原として選択された。これら27種類の生殖母体タンパク質cDNAをコムギ胚芽無細胞合成系専用プラスミドにサブクローニングし、組換えタンパク質の大量合成及び精製を行った。その結果得られた22種類の精製タンパク質を個別にマウスに免疫し、抗血清を作製した。作成した抗血清を用いて、培養熱帯熱マラリア原虫生殖母体、生殖体及びオーキネートを染色し、原虫における抗原の発現時期およびその局在を観察した。原虫との反応性を確認した後、これらの抗血清を用いて培養熱帯熱マラリア原虫に対する伝搬阻止活性を測定した。その結果、2種類の抗血清に熱帯熱マラリア伝搬阻止活性が認められた。以上の結果から、本アプローチは新規マラリア伝搬阻止ワクチン候補抗原の探索に有用であることが判明した。

  • 病原微生物が発現する宿主細胞認識分子のハイスループットな同定法の開発

    坪井 敬文, 竹尾 暁, 入子 英幸

    日本学術振興会, 科学研究費助成事業 萌芽研究, 萌芽研究, 愛媛大学, 2005年 - 2006年

    近年、多くの病原微生物のゲノム塩基配列が決定されているが、タンパク質の機能に関しては未だに得られる情報は少ない。核酸代謝・アミノ酸代謝といった生命現象に普遍的な分子は、生物全般で保存されており解析も比較的容易であるが、病原微生物の病原性に関与する分子、中でも感染の成立時に働く宿主細胞認識分子は病原微生物に固有のものが多く、ワクチンや創薬の標的であるにもかかわらず研究が遅れている。そこで我々は、病原微生物の宿主細胞認識分子をゲノムワイドに同定する手法の開発を目的として本研究を開始した。昨年度は、複雑な生活環を持ち多くの宿主細胞認識分子を持つと考えられる熱帯熱マラリア原虫の遺伝子約400個をモデルとして、コムギ無細胞タンパク質合成法を応用することにより、それらの約70%をGFP融合タンパク質として発現できた。本年度は、その原虫組換えタンパク質のレセプターとなるヒト赤血球膜ベジクルの作製を試みたが、均一なベジクルの作製は困難であった。そこで一分子蛍光分析システムを応用したレセプター・リガンドの同定の一例として、マラリア患者血清を用いた抗原抗体反応の測定を試みた。その結果、上記GFP融合原虫タンパク質の内約100種類と、患者血清を用いて検討した結果、3種類の原虫タンパク質がヒト血清中の抗体と反応し、抗原性を有していることが明らかとなった。したがって、本法は病原微生物と宿主分子間の結合をハイスループットに同定できる手法となりうることが示唆された。

  • 患者血清を用いた新規マラリアワクチン抗原の高速スクリーニング

    坪井 敬文, 竹尾 暁, 入子 英幸

    日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(B), 基盤研究(B), 愛媛大学, 2004年 - 2006年

    熱帯熱マラリア原虫のゲノム情報から、約5400個の遺伝子のうち200種類あまりが赤血球への侵入型原虫に特異的に発現していると予想されている。一方、現在マラリアワクチン候補抗原として研究がすすめられている原虫タンパク質は限られている。その最大の理由は熱帯熱マラリア原虫の遺伝子をそのまま用いて組換えタンパク質を発現することが非常に困難なためである。申請者らは、これまでにコムギ胚芽無細胞タンパク質合成法により、原虫遺伝子をそのまま用いて組換えタンパク質を効率よく作製する方法を開発し、これによりマラリアワクチン候補タンパク質をゲノムワイドに発現することが可能となった。そこで本研究は、1)ワクチン候補タンパク質を効率良くスクリーンニングするため、マラリア流行地の様々な病態を示す患者の血清を幅広く収集し、2)これらの血清の中で、無症状感染者の血清に着目して、これらの血清中の抗体によって認識される原虫タンパク質を検索することで、新規の熱帯熱マラリア発病予防ワクチン抗原を同定することを目的に実施した。本研究期間内の成果を下記に列挙する。 1)熱帯熱マラリア原虫メロゾイト特異遺伝子約180種類をクローニングし、149種類を組換えタンパク質として発現した。 2)タイ国内の複数のマラリア流行地の住民および数カ所のマラリア診療所においてマラリア患者血清の採取し、本研究に有用な無症状感染者の血清を最終的に約30人分入手した。また、バンコク市内の病院においても、患者血清を約30分入手した。なお、これらの患者血清試料の採取については、愛媛大学医学部ヒトゲノム・遺伝子解析研究倫理委員会にて実施が承認されている。 3)これらの無症状感染者の血清の内、比較的量に余裕がある5サンプルと上記メロゾイト期組換えタンパク質149種類を用いて酵素抗体法にてスクリーニングし、約10種類の原虫抗原が同定された。

  • 流行地で分離した熱帯熱マラリア原虫の赤血球結合蛋白発現レベルの解析

    鳥居 本美, 松田 正司, 金子 修, 坪井 敬文, 入子 英幸, 橘 真由美

    日本学術振興会, 科学研究費助成事業 基盤研究(B), 基盤研究(B), 愛媛大学, 2001年 - 2002年

    マラリア流行地ではマラリアの選択圧によって原虫の侵入標的となるヒト赤血球表面蛋白の多型が存在するが、これに対応して熱帯熱マラリア原虫は複数の赤血球結合蛋白を発現調節して、宿主の抵抗を回避していると考えられる。したがって、流行地において熱帯熱マラリア原虫分離株の赤血球結合蛋白がどのように発現されているかを調査することは、マラリアの感染の分子機序の解明のみならず、今後のワクチン開発を行う上でも重要な課題である。本研究は、流行地の熱帯熱マラリア患者の血液を採取し、これを用いて熱帯熱マラリア原虫の赤血球結合蛋白の発現様式をmRNAおよび蛋白のレベルで解析することを目的として実施した。 先ず、一連の赤血球結合蛋白の塩基配列を基にPCR用のオリゴヌクレオチドを作成し、熱帯熱マラリア原虫実験室内株(3D7株)から抽出したmRNAを鋳型として赤血球結合分子RhopH1多重遺伝子族に関して定量的RT-PCR法による赤血球結合蛋白の転写レベル測定系を構築した。この方法により、世界各地の患者由来の実験室培養株におけるRhopH/Clag多重遺伝子族の発現様式を比較した所、転写レベルに差が見られた。一方、核酸レベルでの多型が存在すると正確な測定ができなくなるため、種々の実験室培養株間において多型現象が見られることがわかってきた。タイ国内のマラリア流行地において、熱帯熱マラリア患者から採集したマラリア原虫において多型と転写レベルの解析を継続中である。 さらに、これらの遺伝子の蛋白レベルにおける発現量を調べるため、各メンバー間で交差反応を示さない抗血清の作成を試み、5つあるメンバーのうちの3つにつき、作成に成功した。残りは交差反応を示したため、現在、合成ペプチドなどによる抗血清の作成している。作成した抗血清を用いた間接蛍光抗体法とウェスタン解析により、実験室内株において発現のパターンに異なることが観察された。